碱性成纤维生长因子基因修饰骨髓间充质干细胞治疗鼠后肢缺血

目的 观察大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植联合人碱性成纤维生长因子（hbFGF）基因治疗对大鼠缺血后肢血管新生的影响.方法 12只SD大鼠均切除右侧股动脉及其分支,形成后肢缺血模型鼠.成模后随机分为2组（每组6只）：碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）-BMSCs组,缺血后肢肌内多点注射经过bFGF基因修饰的BMSCs;绿色荧光蛋白（GFP）-BMSCs组,缺血后肢肌内多点注射携带GFP空载病毒转染的BMSCs.术后2周,取内收肌和腓肠肌组织,一部分用于冰冻切片,计数微血管密度并观察移植细胞的改变;另一部分用于Western blot,检测bFGF、血管内皮生长因子（VEGF）等在大鼠体内的表达.结果接受基因转染的细胞高强度表达GFP.细胞移植2周后,受体大鼠体内可见绿色荧光阳性细胞,其中GFP-BMSCs组,GFP＋细胞数（15.40±3.85）个/视野低于bFGF-BMSCs组（26.60±3.51）个/视野（t=4.811,P＜ 0.01）.干细胞在体内分化为血管内皮细胞,但是GFP-BMSCs组的GFP＋CD31＋细胞数[（7.00±2.12）个/视野]低于bFGF-BMSCs组（14.00±1.53）个/视野（t=5.916,P＜ 0.01）.微血管密度bFGF-BMSCs组[（55.0±16.5）个/视野]高于GFP-BMSCs组[（28.6±4.2）个/视野,t=5.4,P＜ 0.01].结论 bFGF能够提高BMSCs在体内的存活率和分化率,过表达bFGF的BMSCs能更有效地促进缺血后肢的血管新生.