Ad-NK4增强人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞对硼替佐米化疗敏感性的作用

目的:观察Ad-NK4能否增强RPMI 8226细胞对硼替佐米(BOR)的化疗敏感性。方法:细胞-基质粘附实验和RPMI 8226细胞-ECV 304细胞粘附实验检测Ad-NK4对RPMI 8226细胞粘附的影响;Western blot检测粘附和侵袭相关蛋白MMP2、MMP3、MMP7、VEGF表达的变化;MTT法检测Ad-NK4对细胞增殖的影响;PI流式细胞术检测Ad-NK4对细胞凋亡的影响;Western Blot检测Cleaved caspase-3、BAX和BCL-2蛋白表达水平的变化。结果:两种细胞粘附实验均显示Ad-NK4可显著抑制RPMI 8226细胞粘附,且与Erk信号通路和JAK/STAT信号通路显著相关(P<0.05);Ad-NK4能明显降低RPMI 8226细胞MMP-2、MMP-3和VEGF蛋白的表达水平(P<0.05),但对M M P-7的蛋白表达水平无明显影响(P>0.05)。Ad-NK4和BOR联用的细胞抑制率和诱导凋亡比例均显著高于单用Ad-NK4或BOR。同样,Ad-NK4和BOR联用组Cleaved caspase-3和BAX蛋白水平均明显高于单独作用组,而BCL-2蛋白水平却相反,同时在联用组BAX/BCL-2比率增加。结论:通过活化Caspase-3和上调BAX/BCL-2比率的途径,Ad-NK4可增强BOR体外抗骨髓瘤RPM I 8226细胞作用。

雷帕霉素逆转骨髓瘤U266细胞黏附介导的耐药

目的探讨雷帕霉素(Rapamycin,RAPA)对骨髓瘤U266细胞的黏附作用的影响及因黏附介导的阿霉素耐药的影响。方法采用结晶紫染色法检测U266细胞与纤连蛋白(Fibronectin,FN)的黏附作用;MTT实验检测RAPA对骨髓瘤细胞因黏附介导的阿霉素耐药的影响。结果U266细胞与FN黏附1、6、12h,其黏附率分别为(35.13±4.31)%、(43.65±3.86)%和(60.38±5.27)%;用160nmol·L^(-1)RAPA处理1、6、12h后黏附率分别降为(22.14±6.13)%、(21.99±5.68)%和(27.76±4.91)%,组间比较差异显著(P<0.05);当阿霉素作用时,FN黏附组细胞IC50值〔(3.16±0.29)mol·L^(-1)〕显著高于BSA组〔(0.62±0.19)mol·L^(-1)〕(P<0.05);FN联合RAPA组IC50值〔(0.65±0.31)mol·L^(-1)〕显著低于FN组(P<0.05),但与BSA联合RAPA组〔(0.58±0.22)mol·L^(-1)〕相比无显著性差异(P>0.05),但却低于FN组(P<0.05)。结论RAPA能降低U266细胞与FN的黏附率和逆转黏附介导的阿霉素耐药。