香烟烟雾提取物对人支气管上皮细胞中脂质代谢的影响研究

目的基于液相色谱-质谱联用(LC-MS)技术研究香烟烟雾提取物(CSE)对人支气管上皮细胞(HBECs)中脂质代谢的影响。方法体外建立CSE干预HBECs模型,以5%CSE干预的支气管上皮细胞为实验组,以无CSE干预的细胞为对照组,采用LC-MS技术定量检测HBECs内的脂质成分,数据经主成分分析及正交偏最小二乘法判别分析,从728个脂质(11类脂质)中筛选出差异脂质。结果与对照组比较,实验组的HBECs显示出191个差异表达脂质,有185个脂质上调,6个脂质下调,其中增高数量比例最高的脂质为鞘脂途径脂质,增高倍数最大的脂质为甘油三酯。结论CSE可导致HBECs的脂质代谢紊乱,尤其是鞘脂途径脂质的积累,可能与慢性阻塞性肺疾病进程相关。

对氧磷脂酶-1与氧化低密度脂蛋白在脑梗死发病机制中的作用

目的探讨血清对氧磷脂酶-1活性与血浆氧化低密度脂蛋白在动脉粥样硬化性脑梗死发病机制中的作用。方法采用分光光度法和酶联免疫吸附法检测127例动脉硬化性脑梗死患者血清对氧磷脂酶-1活性,以及血浆氧化型低密度脂蛋白、血浆血管性假血友病因子、血浆α颗粒膜蛋白-140(GMP-140)及血清一氧化氮的变化,并对各项指标间的关系进行相关分析。另选择128例同期行体格检查或经头部CT检查无异常的轻度颅脑创伤患者作为对照。结果脑梗死组和对照组受试者血清对氧磷脂酶-1活性均在国人正常值范围。但与对照组比较,脑梗死组患者血清对氧磷脂酶-1活性明显降低(P<0.05),血浆氧化低密度脂蛋白水平明显升高(P<0.05);而且血浆血管性假血友病因子、血浆α颗粒膜蛋白-140等项指标亦均高于对照组(P<0.01),血清一氧化氮水平低于对照组(P<0.01)。相关分析表明,血清对氧磷脂酶-1活性分别与血浆血管性假血友病因子、血浆α颗粒膜蛋白-140及血浆氧化低密度脂蛋白水平呈负相关(r=0.423,0.383,0.339;均P<0.01),与血清一氧化氮水平呈正相关(r=0.205,P<0.01);而血浆氧化低密度脂蛋白与血清一氧化氮水平呈负相关(r=0.223,P<0.01),与血浆血管性假血友病因子和血浆α颗粒膜蛋白-140水平呈正相关(r=0.315,0.203;均P<0.01)。血清对氧磷脂酶-1活性与血清高密度脂蛋白-胆固醇、载脂蛋白B之间无相关性(P>0.05)。结论脑梗死组患者血清对氧磷脂酶-1活性的下降与其血浆氧化低密度脂蛋白水平增高有关,而血清对氧磷脂酶-1活性下降及血浆氧化低密度脂蛋白水平增高是脑梗死发病危险因素。

HLA-B27抗原检测与基因检测在强直性脊柱炎诊断中的应用

目的研究强直性脊柱炎(AS)中HLA-B27抗原表达与基因亚型分布特点,探讨HLA-B27抗原和基因检测在AS诊断中的应用价值。方法收集103例AS患者及105例健康人群对照静脉全血,分别采用流式细胞术(FCM)及基于序列分析的PCR分型法(PCR-SBT)检测HLA-B27。结果 FCM检测HLA-B27诊断AS的灵敏度和特异度分别为97.09%和92.38%,PCR-SBT诊断AS的灵敏度和特异度为96.12%和97.14%。AS组HLA-B位点等位基因检出频率以B27最高。结论 HLA-B27抗原和基因检测对AS诊断均具有较高价值。FCM检出灵敏度略高于PCR-SBT,但特异度低于PCR-SBT。

多发性肌炎并肺间质病变血清蛋白质组学研究

目的寻找可预测多发性肌炎(PM)及合并肺间质病变(ILD)发生、发展的血清蛋白质。方法收集PM、PM+ILD患者及正常人(对照组)各3例,用双向电泳分离血清蛋白质点。凝胶经考马斯亮兰染色后,采用Analysis 2D7.0软件进行分析,光密度差异(ratio)>2且差别具有统计学意义(P<0.05)的蛋白质点为差异表达蛋白。基质辅助激光解析电离飞行时间质谱进行鉴定;ELISA方法进行验证。结果通过2-DE图谱分析发现,15个差异表达蛋白质点,质谱鉴定出9种蛋白质。与对照组比较,PM组表达上调的蛋白为血清淀粉样蛋白A、载脂蛋白A1、凝集素、血清白蛋白;PM组表达下调的蛋白为转铁蛋白(TRF);PM+ILD组表达下调的蛋白为锌-a2-糖蛋白、TRF、a2-H2-糖蛋白、a1-β-糖蛋白。与PM组比较,PM+ILD组表达下调的蛋白为TRF、β2-糖蛋白1。ELISA进一步验证显示,TRF在各组间表达差别无统计学意义(P>0.05)。结论 PM组、PM+ILD组及对照组3组间存在8种差异表达的蛋白,这些蛋白可能是PM及ILD发病的相关蛋白,参与了疾病的进程。

成人Graves病患者血清Th1/Th2细胞因子与sCTLA-4水平及其关系的探讨

目的 探讨成人 Graves病患者血清 Th1 /Th2变化及 s CTLA- 4与 Th1 /Th2细胞因子的关系。方法 对 30例 GD治疗前、2 0例 GD治疗后临床缓解和 2 0例对照组采用酶联免疫吸附试验测定血清IFN- γ、IL- 4、IFN- γ/IL- 4、s CTLA- 4。结果 GD治疗前和治疗后临床缓解组血清 IL- 4明显低于对照组( P<0 .0 1 )。同时 IL - 4与 s CTLA- 4呈负相关 ( r=- 0 .384,P<0 .0 1 )。结论 GD患者 Th2细胞反应强度降低而导致 Th1 /Th2细胞的平衡相对偏向 Th1 ,s CTLA- 4可能通过对共同刺激信号 CD2 8/CTAL- 4:B7的调节而致 Th1 /Th2细胞因子的变化。

绝经后妇女血清骨代谢生化指标的变化及意义

目的 为了探讨绝经后妇女的骨代谢。方法 本文对 37例绝经后妇女及 2 7例正常对照组 ,测定血清 型前胶原羧基末端前肽 (PICP)、 型胶原羧基端吡啶并啉交联肽 (ICTP)、骨钙素 (BGP)、碱性磷酸酶(AL P)、钙 (Ca)、磷 (P)等骨代谢指标。结果 绝经后妇女 组血清 PICP结果明显低于对照组 (P<0 .0 1) ,ICTP结果明显高于对照组 (P<0 .0 0 1) ,BGP明显低于对照组 (P<0 .0 5 )。绝经后妇女 I组 ICTP结果明显高于对照组(P<0 .0 1)。绝经后妇女年龄与血清 PICP、ICTP、BGP具有相关性 ,骨形成指标 PICP、BGP与骨吸收指标 ICTP均有相关性。结论 表明了绝经后妇女骨吸收过程增加较为明显 。

Nicotiflorin对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨Nicotiflorin(Kaempferol 3-O-β-rutinoside,山奈酚-3-O-芸香糖苷)对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制,以及诱导细胞凋亡和对细胞周期的影响。方法采用MTS法检测细胞存活率,计算IC50值;流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡;Western-blot检测DNA损伤标记蛋白γ-H2AX及凋亡相关蛋白Bcl-2的变化。结果 Nicotiflorin能剂量依赖性地抑制人乳腺癌MCF-7细胞的增殖,IC50值为28.2μmol/L。流式细胞仪检测结果显示,Nicotiflorin使MCF-7细胞周期阻滞于G2/M期,不同浓度的Nicotiflorin作用48h后细胞凋亡率均增加。Western-blot检测发现,Nicotiflorin处理后,磷酸化的H2AX(γ-H2AX)随时间依赖性地增加,提示Nicotiflorin诱导DNA双链断裂从而使细胞阻滞于G2/M期,同时Nicotiflorin可能通过抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达诱导细胞凋亡。结论 Nicotiflorin能抑制人乳腺癌MCF-7细胞的增殖并诱导其凋亡。

多发性肌炎/皮肌炎患者外周血Ⅰ型干扰素诱导趋化因子的临床意义

目的 探讨Ⅰ型干扰素诱导趋化因子在多发性肌炎/皮肌炎的表达及与临床特征相关性.方法 实时定量PCR检测52例多发性肌炎(polymyositis,PM)/皮肌炎(dermatomyositis,DM)患者及20名健康对照组(health donors,HD)PBMCs中5个经典的Ⅰ型干扰素趋化因子诱导基因:单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)、 干扰素诱导蛋白10(interferon-inducible protein-10,IP-10)、 重组人干扰素诱导T细胞趋化物(interferon-inducible T cell alpha chemoattractant,I-TAC)、 单核细胞趋化蛋白-2(monocyte chemotactic protein 2,MCP-2)、 人巨噬细胞炎性蛋白1α(macrophage inflammatory protein1α,MIP-1α),计算趋化因子积分,并与相应临床资料进行统计学分析.组间比较采用Mann-Whitney检验,相关性分析采用Spearman检验.结果 多发性肌炎/皮肌炎组PBMC上述趋化因子的mRNA水平均明显高于健康对照组:MCP-1[180.4(54.1,501.1)比16.4(0.8,27.8)]、IP-10[320.4(104.8,534.7)比24.1(0.9,31.4)]、I-TAC[48.4(25.4,144.7)比24.1(3.6,31.3)]、MCP-2[201.6(104.3,658.7)比24.6(2.8,32.8)]、MIP-1α[168.3(110.4,527.6)比21.5(0.8,31.4)](Z=-4.775,-4.676,-4.479,-4.298,-5.022;P<0.0001).且趋化因子积分在多发性肌炎/皮肌炎患者中显著增高[48.4(25.4,144.7)比2.2(0.6,4.0),Z=-5.630,P<0.01].同一患者,与稳定期相比,疾病活动期的趋化因子积分显著升高(P<0.05).结论 MCP-1、IP-10、I-TAC、MCP-2、MIP-1α的mRNA水平在多发性肌炎/皮肌炎患者PBMC中表达明显增高,趋化因子积分可能是反映多发性肌炎/皮肌炎活动的生物学标志物.

2型糖尿病患者NO,TNF—α测定及其临床意义

目的 探讨一氧化氮（ＮＯ）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－ α） 在２型糖尿病无并发症及伴肾者的变化。方法 对４０例２型糖尿病患者和３０例健康对照组，采用硝酸还原酶法和放射免疫法测定ＮＯ和ＴＮＦ－α。结果 ２型糖尿病无并发症组ＮＯ水平略高健康对照组，但无统计学意义（Ｐ〉０．０５），伴肾病组则明显升高（Ｐ〈０．０１）；２型糖尿现无并发症组、伴肾病组ＴＮＦ－α水平明显高于健康对照组（Ｐ〈０．０１）。结论 ＮＯ、

强直性脊柱炎患者HLA-B27基因亚型分析

目的探讨强直性脊柱炎(AS)患者人类白细胞抗原B27(HLA-B27)各亚型分布及其与疾病的相关性。方法收集103例AS及105例健康对照患者血清,流式细胞术初筛HLA-B27抗原,聚合酶链式-直接测序分型法(PCRSBT)测定基因型别。结果 AS组检出4种HLA-B27亚型,分别为B2704、B2705、B2707和B2715,B2704占HLA-B27亚型构成比最高(93.93%)。结论本地区AS患者HLA-B27基因型别以B2704亚型为主。

血浆内皮素、心钠素变化与Graves病相关性的探讨

目的 探讨 Graves病患者血浆内皮素、心钠素对心血管的影响。方法 对 30例 GD治疗前、 2 0例GD治疗后临床缓解和 30例对照组采用放射免疫法测定血浆 ET- 1、 ANP。结果 GD治疗前血浆 ET- 1、 ANP明显高于对照组 ,GD治疗后临床缓解与对照组 ,同时 Graves病患者 FT3、FT4 、ET- 1、ANP之间均存在着相关性。结论 GD患者甲状腺激素直接作用于心血管 ,参与产生和释放 ET- 1、 ANP。

泉州地区部分人群EB病毒感染状况调查分析

目的调查泉州地区部分人群EB病毒的感染情况。方法对本院体检组2 187例、鼻咽癌组18例和健康对照组20例采用酶联免疫吸附法(ELISA)对EBV-EA-IgA与EBV-VCA-IgA抗体水平进行检测,分析鼻咽癌高危人群中EB病毒感染情况。结果健康体检组中EA-IgA阳性60例,占2.74%(60/2 187);VCA-IgA阳性255例,占11.66%(255/2 187);两种抗体同时阳性为51例,占2.33%(51/2 187)。鼻咽癌患组EA-IgA阳性14例,占77.7%(14/18);VCA-IgA阳性17例,占94.4%(17/18)。健康对照组EA-IgA与VCA-IgA抗体皆阴性。VCA-IgA阳性率随年龄增长而增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论泉州地区鼻咽癌高危人群的EA-IgA抗体与VCA-IgA抗体水平在鼻咽癌患者中高于健康体检者,早期筛查EB病毒EA-IgA与VCA-IgA抗体水平对进行早期诊断鼻咽癌具有重要价值。

Graves病患者血清IL-6、TNF-α水平的变化和分析(附80例分析)

目的 为了探讨 IL- 6、TNF- α在 GD中的致病作用。方法 对 30例 GD病治疗组、 2 0例治疗缓解组和 30例对照组血清 FT3、 FT4 、 s- TSH、 IL - 6和 TNF-α的测定。结果 GD治疗组 FT3、 FT4 、 IL - 6明显高于对照组 ,而 s- TSH、TNF- α明显低于对照组。缓解组各指标与对照组比较均无统计学意义。GD治疗组 FT3、FT4 与 TNF-α的相关系数分别为 - 0 .4 6 1和 - 0 .397,FT4 与 IL - 6的相关系数为 0 .4 0 2。结论 GD患者 IL - 6、 TNF-α可能参与 GD的发生发展 ,同时为临床免疫治疗提供重要的依据。

肝纤维化多种血清标志物检测的分析及临床意义

目的 :为了探讨肝纤维化多种血清标志物的诊断价值。方法本文对 2 3例慢性活动性肝炎、16例肝硬化和 40例正常对照组采用放射免疫方法测定血清Ⅰ型前胶原羧基末端前肽 (PICP)、Ⅰ型胶原羧基吡啶并啉交联肽 (ICTP)、Ⅲ型前胶原氨基端肽 (PIIINP)、透明质酸 (AH)、层粘连蛋白 (LN水平。结果 :慢性活动性肝炎、肝硬化PICP、ICTP、PIIINP、AH、LN均明显高于正常对照组 (P <0 .0 1) ,肝硬化ICTP、PIIINP、AH、LN升高尤为明显 ,其阳性率AH(93.7% )、PIIINP(87.5 % )、ICTP(6 2 .5 % )、LN(5 6 .2 % )、PICP(2 5 % ) ,同时ICTP、PIIINP、AH、LN之间具有明显相关性。结论 :联合检测有助于肝病病人肝纤维化的诊断。

甲状腺功能亢进患者PICP.ICTP等骨代谢指标水平的变化

目的探讨甲状腺激素与骨代谢的关系。方法对 40例甲状腺机能亢进 (甲亢 )患者和 40名正常人对照组血清 型前胶原羧基末端前肽 (PICP)、 型胶原羧基端吡啶并啉交联肽 (ICTP)、骨钙素 (BGP)、碱性磷酸酶(AL P)、FT3、FT4测定。结果表明甲亢患者血清 PICP、ICTP、BGP、AL P均明显增高 (P<0 .0 0 1) ,相关分析表明血清 FT3、FT4与 PICP、ICTP、BGP、AL T均呈正相关。结论甲状腺激素可能直接参与骨代谢 ,且骨吸收过程增加较为明显 ,造成骨量丢失。

原发性高血压血清PⅠCP、PⅢNP测定及其意义

目的 探讨高血压病心血管胶原化对心功能的影响。方法 对28例高血压病人和18例正常对照组,采用放射免疫法测定血清PⅠCP、PⅢNP。结果 高血压组血清PⅠCP、PⅢNP(119.42±32.3μg/L,4.37±2.06 μg/L)明显高于正常对照组(104.97±16.09 μg/L,3.31±1.08μg/L),(P<0.05)。结论高血压病血清PⅠCP、PⅢNP含量测定对心肌胶原重构的程度有一定的评估价值。

胃癌组织中高尔基体磷酸化蛋白的表达及临床意义

目的探讨高尔基体磷酸化蛋白(GOLPH3)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法收集该院2009年5月至2012年7月经手术切除病理证实为胃癌的组织标本40例,用Real-time PCR方法检测其肿瘤组织和癌旁组织中GOLPH3的表达,并分析其表达与临床病理特征的关系。结果 GOLPH3在肿瘤组织的表达明显高于癌旁组织(P<0.001),GOLPH3的表达与肿瘤大小(P=0.029)、分化程度(P=0.036)、浸润深度(P=0.002)、淋巴结转移(P=0.030)和TNM分期(P=0.006)相关。结论 GOLPH3在胃癌中过表达,可能参与了胃癌的发生发展,有望成为胃癌新的独立预测指标。

G蛋白偶联受体37(GPR37)上调促进人胶质瘤U251细胞的增殖

目的探讨G蛋白偶联受体37(GPR37)表达上调对人胶质瘤U251细胞增殖的影响。方法构建携带GPR37基因的重组质粒,采用脂质体转染法在U251细胞上调表达GPR37,采用实时荧光定量PCR检测GPR37 mRNA水平,Western blot法检测GPR37、磷酸化的蛋白激酶B[p-AKT(Ser473)]蛋白水平,CCK-8法检测U251细胞增殖情况,流式细胞术检测U251细胞的细胞周期。结果与阴性对照组相比,过表达GPR37组细胞的GPR37 mRNA和蛋白水平显著提高。上调细胞的GPR37水平后,明显增加U251细胞的增殖、G1/G0期细胞比例降低,S期和G2期细胞比例升高,并增加p-AKT(Ser473)蛋白水平。结论上调U251细胞的GPR37水平可加速U251细胞周期进程、活化AKT途径并促进细胞增殖。

激光照射下硫化铜纳米颗粒对Hela细胞的杀伤作用

目的探讨新型光热剂硫化铜纳米颗粒(BSA-CuS NPs)对HeLa细胞的光热杀伤作用及机制。方法以牛血清清蛋白(BSA)为生物模板合成BSA-CuS NPs,对其进行物理表征和光热转换实验。将HeLa细胞分为对照组、硫化铜组、光照组和联合组。采用CCK-8法检测BSA-CuS NPs的细胞毒性,TUNEL实验检测细胞的凋亡情况,酶标法检测各组细胞内超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力,免疫蛋白印迹分析细胞色素C(Cyt-c)蛋白的表达。结果 BSA-CuS NPs为直径(26.25±1.86)nm的片状结构,紫外线可见吸收峰位于980nm。升温曲线说明BSA-CuS NPs较去离子水溶液升温效果更加明显,呈现光照强度依赖性。CCK-8实验结果表明,在100mg/L浓度范围内培养24h,BSA-CuS NPs对HeLa细胞的生长无明显抑制。TUNEL实验结果表明,联合组细胞的凋亡情况较其余3组明显增强。氧化应激指标测定显示,硫化铜组、光照组的SOD、GSH-Px较对照组降低,差异有统计学意义(F=223.36、920.00,P<0.01);联合组与硫化铜组比较、联合组与光照组比较,SOD、GSH-Px均降低,差异有统计学意义(t=5.28~33.84,P<0.01)。免疫蛋白印迹分析结果表明,联合组的Cytc蛋白表达量较硫化铜组、光照组和对照组增加,差异有统计学意义(F=19.85,P<0.01)。结论 BSA-CuS NPs对HeLa细胞具有光热杀伤效应,机制可能与BSA-CuS NPs诱导大量自由基产生,进而启动凋亡基因程序有关。