肺神经内分泌肿瘤的病理学诊断要点及研究进展

国际肺癌研究学会（InternationalAssociationfortheStudyofLungCancer，IASLC）、美国胸科学会（AmericanThoracicSociety，ATS）和欧洲呼吸病学会（EuropeanRespiratorySocie—ty，ERS）公布的2011年肺腺癌的国际多学科新分类方案引起了一定反响，同样也引发了人们对肺神经内分泌肿瘤（neuroendocrinetumors，NETs）分类及其相关问题的关注和讨论。为此，本文对相关进展进行简要介绍。

原发性血小板减少性紫癜与溶血性贫血脾脏病理形态学比较

对９３例原发性血小板减少性紫癜（ＩＴＰ）脾脏病理形态进行了观察，并与２２例溶血性贫血及６例外伤切除的正常脾脏进行了比较，发现ＩＴＰ脾红髓ＣＤ＿（１５）￣＋分叶核粒细胞数显著增多，且伴核碎片明显增多，７５％ＩＴＰ脾脏铁染色阴性，铁染色阳性者铁颗粒少，其阳性强度与自身免疫溶血性贫血、遗传性球形红细胞增多症、Ｅｖａｎｓ综合征及正常脾脏无交叉重叠现象，ＩＴＰ脾可染铁缺乏具相对特异性。电镜下可见巨噬细胞吞噬血小板及红细胞碎片，次级溶酶体、髓样体及脂质体增多。根据ＩＴＰ脾脏分叶核白细胞及核碎片显著增多，铁染色阴性，脾肿大不明显可与溶血性贫血脾脏相鉴别，对ＩＴＰ脾分叶核粒细胞增多及铁贮存减少的机理作了讨论。

子宫颈小细胞神经内分泌癌34例临床病理特征及预后分析

目的探讨子宫颈小细胞神经内分泌癌(small cell-neuroendocrine carcinomas,SCNEC)的临床病理特征、诊断、鉴别诊断及预后因素。方法回顾性分析34例SCNEC的临床资料,采用HE、免疫组化EnVision两步法染色,采用Kaplan-Meier法和Cox回归模型进行生存分析。结果患者年龄27~72岁,中位年龄47岁;肿瘤中位直径3 cm。27例为单纯性小细胞癌,7例合并其他类型癌或癌前病变。免疫表型:33例(97.06%)至少出现一项神经内分泌标志物阳性,仅1例活检病例Syn、CgA、CD56均阴性,被误诊为低分化子宫颈腺癌;Syn、CgA、CD56、CKpan、p16、TTF-1阳性率分别为91.18%、55.88%、88.24%、82.35%、100.00%、47.06%。Ki-67增殖指数为40%~90%。27例获得随访,随访时间6~90个月,18例存活(66.67%),5年累积生存率为28.9%,3例有复发及远处转移。统计结果显示肿瘤直径与总生存期有关,是影响SCNEC患者的独立预后因素。结论SCNEC有高度侵袭性,初诊多为活检标本,确诊需结合组织学特征及免疫表型;肿瘤直径是影响SCNEC预后的独立因素。

大块骨质溶解症的病理变化（1例光、电镜观察及DNA含量分析）

大块骨质溶解症的病理变化（１例光、电镜观察及ＤＮＡ含量分析）梁建钢，滕 云，李挺泰，林 娜，李良华，卢心宇关键词：骨溶解，骨肿瘤，脱氧核糖核酸大块骨质溶解症（ｍａｓｓｉｖｅｏｓｔｅｏｌｙｓｉｓ）为一罕见的进行性骨溶解破坏性疾病，系骨的淋巴管瘤或血管瘤...

k-ras基因在中国结直肠癌患者中的突变状态

目的:评价中国结直肠癌患者中k-ras基因突变状态及其与临床病理参数的关系.方法:收集2008-01/2009-12在中国人民解放军南京军区福州总医院手术切除的临床资料完整的结直肠癌石蜡包埋组织280例,分别应用实时荧光定量PCR和直接测序法检测结直肠癌中k-ras基因外显子2中第12、13编码子上最常见的7种突变类型,即第12编码子的35G>A、35G>T、35G>C、34G>A、34G>T、34G>C及第13编码子的38G>A,同时将两种检测结果进行比对分析.结果:(1)经直接基因测序,确认在280例结直肠癌中,k-ras基因测序阳性(基因突变型)94例,阳性率33.57%(94/280),其中第12编码子的35G>A、35G>T、35G>C、34G>A、34G>T及34G>C的突变率分别为14.64%(41/280)、4.29%(12/280)、0.36%(1/280)、2.86%(8/280)、3.57%(10/280)、0.36%(1/280),第13编码子的38G>A的突变率为7.5%(21/280);(2)94例k-ras基因测序阳性(基因突变型)病例中,实时荧光定量PCR阳性91例[灵敏度96.8%(91/94)],阴性3例;186例基因测序阴性(野生型)中,实时荧光定量PCR阴性184例[特异性98.9%(184/186)],阳性2例;实时荧光定量PCR法与直接基因测序法符合率为98.2%[(91+184)/280];(3)k-ras基因突变与患者性别、年龄相关(均P<0.05),而与肿瘤部位、分化程度、浸润深度、TNM分期、淋巴结转移及远处转移无相关性(均P>0.05).结论:(1)中国结直肠癌患者中存在较大比例的k-ras基因突变(33.57%),在临床选取表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂和抗EGFR单抗靶向药物治疗结直肠癌患者之前均应常规检测k-ras基因突变状态,从而为靶向治疗提供可靠的参考依据;(2)实时荧光定量PCR检测结果与基因测序检测结果高度一致,实时荧光定量PCR能够准确、快速、简便的检测出结直肠癌k-ras基因突变位点,可用于结直肠癌k-ras基因突变的检测;(3)k-ras基因突变与结直肠癌的生物学行为无明显相关性,但在≥60岁的女性人群中k-ras基因突变率较高.

plk1、Raf-1和Ki-67在胃癌组织中的表达及其意义

目的探讨plk1、Raf-1和Ki-67在胃癌组织中的表达及其相关性,分析它们的表达与胃癌临床病理指标之间的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测80例胃癌组织和15例癌旁正常胃组织中plk1、Raf-1和Ki-67的表达水平。结果80例胃癌组织中plk1、Raf-1和Ki-67的阳性表达率分别为82.5%(66/80)、81.3%(65/80)、80.0%(64/80),15例癌旁正常胃组织中均未见表达。plk1和Raf-1表达与胃癌的浸润深度、TNM分期以及淋巴结转移显著相关(P<0.05),与患者性别、年龄、肿瘤部位、分化程度无相关性;Ki-67表达与胃癌的分化程度、浸润深度、TNM分期以及淋巴结转移显著相关(P<0.01),而与其它因素无关。plk1与Ki-67、Raf-1与Ki-67、plk1与Raf-1的表达显著相关(P<0.01)。结论plk1、Raf-1和Ki-67的过表达可能与胃癌的发生发展有关,三者联合检测可为判断胃癌生物学行为乃至预后提供重要的参考指标。

DR-nm23基因及其蛋白在大肠癌组织中的表达研究

目的探讨DR-nm23基因及其蛋白在大肠癌组织中的表达及意义。方法应用核酸原位杂交和SP免疫组化方法,从mRNA和蛋白两个水平上检测98例大肠癌、57例大肠腺瘤及42例正常大肠黏膜组织中DR-nm23的表达情况。结果 DR-nm23 mRNA在正常组、大肠癌组和腺瘤组中的表达水平逐渐下降,3组间比较差异显著(P<0.01);腺瘤组中,高级别上皮内肿瘤其表达率低于低级别上皮内肿瘤,但表达差异不显著(P>0.05);DR-nm23 mRNA表达与淋巴结转移呈负相关(P<0.01),与肿瘤病理分级相关(P<0.01),但与组织学分型无关(P>0.05)。DR-nm23蛋白在正常组、腺瘤组和大肠癌组中的表达水平逐渐下降3,组间表达差异显著(P<0.01);腺瘤组中,高级别上皮内肿瘤其表达率低于低级别上皮内肿瘤(P<0.01);DR-nm23蛋白表达不仅与淋巴结转移呈负相关(P<0.05),而且与肿瘤病理分级及组织学分型相关(P<0.01)。原发癌与淋巴结转移癌中DR-nm23基因及其蛋白表达差异均无显著性(P>0.05)。结论 DR-nm23参与大肠癌细胞的分化,其表达下调与大肠癌发生发展密切相关,可作为判断大肠癌生物学行为及其预后的潜在重要指标。

十二指肠胃型上皮化生与幽门螺杆菌感染

对33例十二指肠溃疡患者手术标本的球部进行回顾性形态学观察,发现93.94%有胃型上皮化生。其中90.32%有幽门螺杆菌(HP)感染,67.74%伴活动性炎症,进一步证实胃型上皮化生、HP感染和十二指肠溃疡的密切关系。电镜观察18例十二指肠溃疡患者的活检球部粘膜,将胃上皮化生分为完全性和不完全性两类,后者为不成熟的粘液细胞,常保留肠吸收细胞的某些特征。化生细胞中的粘液与十二指肠腺内的粘液不同,显然化生细胞来源于腺窝内干细胞。根据HP寄居部位及其引起的细胞损害,表明其侵袭力及毒力不强。胃粘液在HP感染的建立和粘膜屏障方面具有双重作用,粘液数量和质量变化可能是HP致病过程中重要因素。

Galectin-3、CK19和MC在甲状腺良、恶性肿瘤中的表达及意义

目的探讨Galectin-3、CK19(Cytokcratin 19)和MC(Mesothelial Cell)蛋白在甲状腺良、恶性肿瘤中的表达及意义。方法采用免疫组化染色法检测Galectin-3、CK19和MC在84例良、恶性甲状腺病变组织中的表达。结果Galectin-3、CK19和MC蛋白在甲状腺乳头状癌和滤泡癌中强表达,在良性病变中不表达或弱表达,其表达差异具有显著性意义(P<0.01)。结论Galectin-3、CK19和MC蛋白是甲状腺癌较好的标记物,对提高甲状腺癌诊断准确性及甲状腺良、恶性病变的鉴别诊断均具有重要意义。3种抗体联合应用效果更好。

陈旧性组织苏木素-伊红教学切片的快速修复法

医学形态学教学中尽管数字教学切片日渐普及与深化,但苏木素-伊红（hematoxylin-eosin staining,HE）染色切片仍是必不可少的最直观的重要教学工具.病变典型的教学切片十分珍贵,有的几乎是一片难求,尤其是上世纪50-60年代的一些特异性疾病的标本,如风湿性心肌炎、肾小球肾炎、大叶性肺炎、小叶性肺炎、乙型脑炎等.而随着使用时间延长,这些教学切片都会出现不同程度的褪色、变黄、组织结构模糊不清,蓝色的细胞核淡到无法观察,红色的细胞质变淡、变黄或整片红染（图1A,B）,严重影响学生对切片的正常观察和组织细胞结构变化的学习.2年来,笔者应用高温高压修复快速处理1954年以来的陈旧、褪色、发黄等无法观察的HE组织教学切片,使陈旧的HE教学切片组织结构清晰,细胞核、质染色对比良好,有效提高了奇、缺、难得病例教学切片的利用价值.

喉癌与喉异型增生、喉单纯增生病变中Ki67的表达和临床意义

目的:探讨检测喉不同病变中Ki67的表达情况及其临床意义。方法:采用免疫组化SP法对40例喉癌、28例喉异型增生、12例喉单纯增生病变组织标本Ki67表达进行检测。结果:人喉癌组织中Ki67指数显著高于喉异型增生、单纯增生(P<0.01),重度异型增生与喉癌无显著性差异(P>0.05)。结论:Ki67的表达对喉粘膜病变性质的诊断有一定的价值。

男性胃畸胎瘤1例报告并文献复习

目的:探讨男性胃畸胎瘤的诊断治疗。方法:分析我院近来诊治的男性胃畸胎瘤1例临床病理资料并进行文献复习。结果:临床表现为腹部肿块呕吐或血便。结论:男性胃畸胎瘤罕见,易引起误诊。B超,CT,胃镜均有较高的术前诊断价值。确诊有赖于病理检查。治疗为手术切除肿瘤及胃部分切除。

重组人促红细胞生成素对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响及其作用机制研究

目的 探讨重组人促红细胞生成素（recombinant human erythropoietin,rh-EPO）对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响及其作用机制.方法 将人乳腺癌 MDA-MB-231 细胞进行培养.传至5～6代,细胞生长状态稳定后,收集人乳腺癌 MDA-MB-231细胞用于MTT实验.采用MTT法检测 5 组（阴性对照组、rh-EPO A 组、rh-EPO B组、rh-EPO C 组和rh-EPO D 组）MDA-MB-231细胞增殖的情况.用10 μmol·L-1p38MAPK抑制剂SB203580、ERK抑制剂U0126、JNK抑制剂SP600125和NF-κB 抑制剂PDTC预处理人乳腺癌 MDA-MB-231 细胞后,用MTT法检测经100、200、300和400 U·mL-1的rh-EPO（PDTC＋EPO 组、SB203580＋EPO 组、SP600125＋EPO组和U0126＋EPO组）诱导后细胞增殖的情况.结果 阴性对照组、rh-EPO A 组、rh-EPO B组、rh-EPO C 组和rh-EPO D 组 72 h PI值分别为：1.000 0±1.000 0、1.231 8±0.133 0、1.323 9±0.136 0、1.351 7±0.146 0和1.423 1±0.084 0;96 h PI值分别为：1.000 0±1.000 0、1.352 5±0.036 0、1.359 7±0.112 0、1.387 2±0.063 0和1.410 8±0.060 0.rh-EPO A 组、rh-EPO B组、rh-EPO C 组和rh-EPO D 组 72、96 h PI值与阴性对照组比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）.PDTC＋EPO 组、SB203580＋EPO 组72、96 h PI值均较EPO组明显降低（均P＜0.05）,SP600125＋EPO组、U0126＋EPO组72、96 h PI值与EPO组比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）.结论 rh-EPO可能是通过NF-κB、MAPK传导通路发挥效应,促进人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖.

恶性上皮性肿瘤中c-kit基因蛋白表达意义探讨

目的：了解恶性上皮性肿瘤c-kit基因蛋白表达分布及其意义。方法：回顾我院及南京军区福州总医院2005-08～2006-08共634例外科手术切除病检标本，免疫组化检测CD117在恶性上皮性肿瘤表达。结果：CD117阳性癌症患者共16例。胃肠道癌8例，其中1例为复发性癌，乳腺癌6例，肺癌2例。结论：少数恶性上皮性肿瘤c-kit基因蛋白表达，可能提示部分恶性上皮性肿瘤的格列卫用药指征。

皮肤麦克尔细胞癌伴显著骨化1例

患者,男性,78岁.发现右臀部逐渐增大的无痛性肿物1年.体检：一般情况尚好,头颈部正常,影像学双肺阴性,腹部B超各脏器未见肿物.术中见肿瘤位于皮下组织,未累及皮肤、真皮及骨组织,术后未予以治疗.

肺良性转移性平滑肌瘤的临床病理研究及文献回顾

目的:研究发生于肺的良性转移性平滑肌瘤(BML)的临床病理特点。方法:收集本病1例,分析研究其临床表现、影像学资料、大体形态、组织学形态及免疫组化结果并查阅对照相关文献。结果:本例BML为49岁女性患者,子宫平滑肌瘤术后15年发生肺转移,无全身其他部位转移。组织形态类似于子宫平滑肌瘤,细胞无异型,未找到核分裂象,免疫组化染色结果符合子宫原发。结论:BML是一种罕见的发生于有子宫平滑肌瘤手术史的女性,肺是主要转移部位,呈激素依赖性,定期全身体检是早期发现肿瘤转移的关键。

负载肿瘤抗原DC与CIK共培养对裸鼠肺腺癌移植瘤抑制作用观察

目的探讨负载肿瘤抗原的树突状细胞(dendritic cells,DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer,CIK)共培养后在体内的杀伤活性及分子机制。方法常规方法分离2011-05-06-2013-07-08南京军区福州总医院健康成年志愿者外周血单个核细胞,体外分别诱导培养为DC和CIK细胞;流式细胞仪测定负载抗原的DC与CIK的表型变化;建立人肺腺癌A549裸鼠(24只)移植瘤模型,应用随机数字表按完全随机分组原则分为PBS组、CIK组和AgDC-CIK组。治疗30d后摘取瘤块,称质量并计算抑瘤率;HE染色观察瘤体组织细胞的形态学变化,免疫组化法检测瘤体组织中VEGF、MMP-9和Bcl-2表达情况。结果负载抗原后DC细胞表面标志CD83+为(45.812±6.110)%,CD86+为(78.341±6.839)%,HLA-DR+为(75.103±5.913)%,与负载前比较均显著升高,t值分别为5.384、7.902和10.132,P值分别为0.009、0.003和<0.001;与CIK共培养CD3+CD8+为(55.417±8.428)%,CD3+CD56+为(39.823±7.215)%,均有显著增加,t值分别为6.185和9.904,P值分别为0.008和0.001;Ag-DC-CIK组能明显下调移植瘤VEGF、MMP-9和Bcl-2等蛋白的表达,t值分别为7.630、11.751和9.624,P值分别为0.002、<0.001和<0.001;且Ag-DC-CIK组对VEGF和Bcl-2表达的抑制作用均强于单纯CIK组,t值分别为5.832和6.214,P值分别为0.009和<0.001;在MMP-9的表达上与单纯CIK组差异无统计学意义,t=1.022,P=0.865。结论负载肿瘤抗原的DC与CIK共培养后可有效抑制VEGF、MMP-9和Bcl-2的表达,抑制裸鼠肺腺癌移植瘤的生长。

2型糖尿病大鼠模型中医证型演变的实验研究

目的观察不同时期糖尿病大鼠模型的证型属性,探讨其证型演变。方法选用Wistar大鼠,除正常对照组普食喂养外,余均高脂高糖喂养4周后,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)2次制备糖尿病模型大鼠。将成模大鼠按血糖水平分层后随机分为模型组、增液汤组、生脉散组、肾气丸组。每组再根据用药时间不同分为、、期。每期予相应药物干预4周后,进行血糖、血脂、胰岛素、胰高血糖素检测和病理观察。结果期肾气丸干预效果优于其他各组;期生脉散干预能显著改善各指标;期增液汤干预优于其他药物干预组。病理观察发现增液汤组胰岛细胞趋于正常,未见岛内纤维化。结论此法所形成的糖尿病模型类似于人类2型糖尿病,其成模初期(期)偏于阴阳两虚,中期(期)偏于气阴两虚,后期(期)偏于阴虚。