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题名中国南瓜CmHSP70基因的克隆及表达分析
被引量:7
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作者
陈敏氡
王彬
朱海生
温庆放
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机构
福建省农业科学院作物研究所蔬菜研究中心福建省蔬菜工程技术研究中心
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出处
《西北植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第6期1016-1023,共8页
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基金
福建省农业科学院蔬菜科技创新团队(STIT2017-1-2)
福建省农科院“青年科技英才百人计划”(YC2017-5)
+1 种基金
国家大宗蔬菜产业技术体系福州综合试验站(CARS-23-G-53)
福建省属公益类科研院所基本科研专项(2017R1026-6,2019R1026-3)
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文摘
为了探究中国南瓜(Cucurbita moschata)热激蛋白70基因的功能,该研究采用转录组测序和RT-PCR方法,从中国南瓜中分离获得3个HSP70基因的开放阅读框(ORF)全长,分别命名为CmHSP70-1、CmHSP70-2和CmHSP70-3,三者的序列长度分别为1 998、1 941和2 118 bp,编码666、647和706个氨基酸。蛋白序列分析显示,3个CmHSP70蛋白均属于亲水性蛋白,都含有典型的NBD和SBD保守结构域;CmHSP70-1蛋白含有信号肽和跨膜结构,亚细胞主要定位于内质网;CmHSP70-2蛋白和CmHSP70-3蛋白不含信号肽和跨膜结构,亚细胞主要定位于细胞质和叶绿体。同源比对和进化分析发现,3个CmHSP70蛋白与苦瓜、甜瓜和黄瓜的HSP70蛋白的相似性最高且遗传距离最近。qRT-PCR分析显示,42℃处理能够诱导3个CmHSP70基因在根、茎、嫩叶和成熟叶中表达,并且表达量存在明显的组织特异性,成熟叶中基因的表达量最高;高温条件下,成熟叶中3个CmHSP70基因均能够在短时间内(处理0~2 h)响应热胁迫而大量表达,尤其是CmHSP70-2基因,推测该基因可能在中国南瓜热胁迫过程发挥重要的调节作用。该研究结果为深入了解HSP70基因功能以及阐明中国南瓜的耐热机制提供理论依据。
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关键词
中国南瓜
CmHSP70基因
热胁迫
表达分析
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Keywords
Cucurbita moschata
CmHSP70
heat stress
expression analysis
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分类号
Q785
[生物学—分子生物学]
Q786
[生物学—分子生物学]
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题名黄秋葵八氢番茄红素脱氢酶基因的克隆与分析
被引量:4
- 2
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作者
李永平
王彬
陈敏氡
刘建汀
朱海生
温庆放
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机构
福建省农业科学院作物研究所蔬菜研究中心福建省蔬菜工程技术研究中心
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出处
《西北植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第7期1195-1202,共8页
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基金
福建省属公益类科研院所基本科研专项(2019R1026-9)
中央引导地方科技发展专项(2018L3005)
+2 种基金
福建省农业科学院科技创新团队建设项目(STIT2017-1-2)
国家大宗蔬菜产业技术体系福州综合试验站(CARS-23-G-53)
国家特色蔬菜产业技术体系福州综合试验站(GARS-24-G-07)
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文摘
该研究根据黄秋葵( Hibiscus esculentus L.)转录组测序获得的八氢番茄红素脱氢酶基因( HePDS )序列(GenBank登录号为MG372370)设计引物,克隆验证得到1条 HePDS 基因全长为2 020 bp cDNA,开放阅读框(ORF)包含1 686个碱基;预测其编码561个氨基酸,理论分子量为62.62 kD,等电点为8.155;编码的蛋白与海岛棉( Gossypium barbadense )、雷蒙德氏棉( Gossypium raimondii )、陆地棉( Gossypium hirsutum )同源蛋白的相似性均在93%以上,均含有1个保守的二核苷酸结合域和1个类胡萝卜素结合域,显示其高度的保守性。荧光定量PCR 分析表明, HePDS 基因在黄秋葵根、茎、叶、花和果荚中均有表达;叶发育过程以嫩叶中表达最高,果实发育中以花后2 d表达量最高。类胡萝卜素含量随着叶、果实发育逐渐升高,成熟叶的含量最高,果实以花后4 d含量最高,且 HePDS 基因的表达与类胡萝卜素含量存在密切的相关性。该研究结果为进一步探讨 HePDS 基因的功能和调控机制,以及采用VIGS和CRISPR/Cas9技术开展黄秋葵基因功能的反向遗传学研究奠定了基础。
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关键词
黄秋葵
八氢番茄红素脱氢酶
类胡萝卜素
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Keywords
Hibiscus esculentus L.
phytoene desaturase
carotenoid
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分类号
Q785
[生物学—分子生物学]
Q786
[生物学—分子生物学]
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