黄胸蓟马化学感受蛋白基因ThawCSP1克隆与表达分析

化学感受蛋白(chemosensory proteins,简称CSPs)除了具有感知化学分子的功能,还与昆虫个体生长与发育、生殖、杀虫剂抗性等密切相关。黄胸蓟马(Thrips hawaiiensis)广泛分布于亚洲热带、亚热带和北美南部,是一种重要的农业和园艺作物害虫。本研究克隆鉴定了黄胸蓟马化学感受蛋白基因ThawCSP1开放阅读框(ORF),然后利用MEGA 7.0软件以邻接法构建ThawCSP1系统发育树,最后利用RT-qPCR、免疫荧光、免疫电镜技术,从mRNA和蛋白水平分析黄胸蓟马ThawCSP1基因的表达情况。结果表明,黄胸蓟马ThawCSP1基因(GenBank登录号:OQ730210)ORF为405 bp,编码134个氨基酸,预测蛋白分子量为15.181 ku。分子进化树显示ThawCSP1与同属缨翅目的西花蓟马、花蓟马和牛角花齿蓟马CSPs序列同源性分别为79.55%、80.30%、76.52%。ThawCSP1基因在黄胸蓟马各个发育阶段均有表达,其中羽化1、5、10 d的成虫相对表达量最高,其次是1龄、2龄若虫和羽化15 d的成虫,蛹期的表达量最低;在黄胸蓟马成虫不同组织中,ThawCSP1表达量最高的是触角,其次是足和头部,分别是腹部表达量的222.33、181.60、79.03倍。免疫荧光和免疫电镜观察也表明,ThawCSP1蛋白在黄胸蓟马触角高表达。研究结果将为解析ThawCSP1基因功能提供试验依据,也为基于昆虫CSPs研发高效引诱剂提供了理论依据。

新入侵害虫木瓜秀粉蚧防治药剂的筛选及敏感性测定

【目的】木瓜秀粉蚧Paracoccus marginatus Williams and Granara de Willink是我国一种重要的新入侵害虫,为筛选出防治木瓜秀粉蚧的高效药剂,明确其对不同杀虫剂的敏感性。【方法】采用浸叶法测定了2龄若虫和雌成虫对15种常用杀虫剂的敏感性。【结果】从15种药剂中筛选出5种对木瓜秀粉蚧毒力较高的杀虫剂,分别为25 g·L^-1高效氯氟氰菊酯乳油、10%虫螨腈悬浮剂、4.5%高效氯氰菊酯乳油、15%哒螨灵水乳剂和15%唑虫酰胺悬浮剂;其中,25 g·L^-1高效氯氟氰菊酯乳油对木瓜秀粉蚧的致死中浓度(LC50)最小,2龄若虫和雌成虫的致死中浓度LC50分别为0.243 0、0.782 1 mg·L^-1,其次为10%虫螨腈悬浮剂、4.5%高效氯氰菊酯乳油和15%哒螨灵水乳剂,15%唑虫酰胺悬浮剂的LC50值最大;木瓜秀粉蚧2龄若虫对药剂的敏感性明显高于雌成虫。【结论】就生物活性测定而言,在木瓜秀粉蚧爆发时,可选用25 g·L^-1高效氯氟氰菊酯乳油、10%虫螨腈悬浮剂、4.5%高效氯氰菊酯乳油、15%哒螨灵水乳剂和15%唑虫酰胺悬浮剂作为当前防治木瓜秀粉蚧的主要防治药剂,可有效遏制入侵害虫木瓜秀粉蚧的危害。

土荆芥精油对小菜蛾幼虫表皮的渗透促进作用

【目的】了解土荆芥精油对杀虫剂的渗透促进作用,明确土荆芥精油对小菜蛾幼虫透皮吸收的效果。【方法】采用扫描电镜观察施用土荆芥精油后小菜蛾表皮超微结构的变化,并利用气质联用仪测定和分析土荆芥精油对杀虫剂透皮吸收量的影响。【结果】与蒸馏水对照和丙酮处理相比,土荆芥精油或氮酮处理后,小菜蛾表皮蜡质层结构出现明显的结构性损伤,刺状突起排列变得较为松散,刺状突起变得平滑,刺状突下部变得褶皱或开裂。随着时间的延续,土荆芥精油对3种杀虫剂的透皮吸收量和渗透率均大幅增加;处理24 h后,土荆芥精油处理的氟虫腈渗透率达99.34%,显著高于氟虫腈单剂(55.12%)。【结论】土荆芥精油与氮酮处理对小菜蛾幼虫表皮的影响相似,土荆芥精油对敌百虫、氟虫腈、毒死蜱都具有很好的渗透促进作用。本研究结果可为利用土荆芥精油促进有机磷、苯基吡唑类和硫代磷酸酯类杀虫剂的透皮作用提供理论依据。

氟啶虫酰胺和联苯菊酯及其复配剂对非靶标节肢动物的风险评估

【目的】联苯菊酯和氟啶虫酰胺及其复配剂是农田常用的杀虫剂,七星瓢虫和玉米螟赤眼蜂是测试农药对非靶标节肢动物风险的指示性昆虫。明确联苯菊酯和氟啶虫酰胺及其复配对非靶标节肢动物的急性毒性及风险可为二者的安全使用提供参考。【方法】采用药膜法测试3种杀虫剂对七星瓢虫和玉米螟赤眼蜂的急性毒性,并预测杀虫剂在农田内外的暴露量,表征毒性风险。【结果】10%联苯菊酯水乳剂对七星瓢虫和玉米螟赤眼蜂的LR50(有效成分)分别为1.305 g·hm^−2和0.237 g·hm^−2;10%氟啶虫酰胺水分散粒剂对七星瓢虫和玉米螟赤眼蜂的LR50均大于其最大推荐有效成分剂量75 g·hm^−2;20%氟啶虫酰胺·联苯菊酯悬浮剂对七星瓢虫和玉米螟赤眼蜂的LR50(有效成分)分别为1.168 g·hm^−2和2.634 g·hm^−2。评估3种杀虫剂在农田内和农田外的风险性,初级风险评估结果表明:10%氟啶虫酰胺水分散粒剂农田内和农田外的风险均可接受;10%联苯菊酯水乳剂在农田内风险不可接受,农田外风险可接受;20%氟啶虫酰胺·联苯菊酯悬浮剂农田内风险不可接受,农田外风险可接受。【结论】两种杀虫剂复配有效降低了单剂的毒性,复配剂农田内风险依然不可接受,需要采取风险减缓措施。

空心莲子草叶片特征及生长期对莲草直胸跳甲产卵选择的影响

【目的】明确空心莲子草叶片特征及生长期对莲草直胸跳甲产卵选择的影响,为莲草直胸跳甲的大量繁殖及空心莲子草的生物防治提供指导。【方法】采用选择性试验,接虫后24 h测定莲草直胸跳甲对空心莲子草的叶位、叶片性状(长宽比和表皮毛密度)的产卵选择情况;采用笼罩试验,测定空心莲子草生长期(苗期、生长期和老叶期)以及原有落卵量(0、1、2和4块/株)对莲草直胸跳甲产卵选择的影响。【结果】莲草直胸跳甲成虫喜好产卵在叶位3和叶位4上,在叶位3和叶位4上的卵块数和卵粒数分别占总数的81.52%和81.10%,显著高于叶位1和叶位2(P<0.05,下同),且这2个叶位的平均叶片长宽比显著大于叶位1和叶位2;偏好在叶背表皮毛密度适中的叶片产卵。莲草直胸跳甲对空心莲子草叶片背面(95.65%)和靠近叶片端部(61.96%)位置的产卵选择率显著高于叶片正面(4.35%)和叶片基部(38.04%)位置。莲草直胸跳甲对生长期植株和未被产卵的空心莲子草叶片的产卵选择率分别为55.09%和45.26%,显著高于其他处理。【结论】莲草直胸跳甲喜好将卵产在叶片长宽比较大的空心莲子草的叶位3和叶位4,被产卵叶片表皮毛密度适中;莲草直胸跳甲对空心莲子草叶片背面和靠近叶片端部的位置产卵选择率高,且偏好在生长期植株和未被产卵的空心莲子草叶片上产卵。