生物技术与林木遗传改良——现状与前景

现代生物技术是70年代初在重组DNA技术、细胞培养技术以及生物反应技术等深入发展的基础上产生的一门新兴学科。一般认为生物技术包括细胞工程、基因工程、酶工程和发酵工程等四个方面。近十几年来,生物技术在林木遗传改良中应用的研究越来越受到重视,尽管这些研究尚处于初级阶段。

龙眼试管微芽嫁接研究

龙眼试管微芽嫁接研究福建省农科院生物技术研究中心魏文雄，杨永青近年来，随着龙眼离体培养研究的进展，提出了一些问题。例如龙眼花培取得的单倍体植株士培成活率低；通过胚培养进行焦核品种选育过程中，如何保证焦核胚试管实生苗单株都能成为单株系，以便不丢失育种宝...

雏番鸭细小病毒病的病毒分离和鉴定

从以腹泻和呼吸困难为主要症状的雏番鸭肝、脾中分离到2株番鸭细小病毒(Muscovy Duckling Parvovirus,MPV)MPV-F和MPV-P。番鸭胚胎接种病毒后8～7天死亡,胚体呈弥漫性充血、出血。病毒能在番鸭胚肾(MDEK)细胞和番鸭胚成纤维(MDEF)细胞上增殖。雏番鸭人工感染病毒后出现与自然罹病者相似的症状,并回收到病毒。小鹅和雏半番鸭接种病毒后不出现临床症状。病毒耐乙醚、胰蛋白酶、酸和热。但是,对紫外线照射敏感。在电镜下病毒呈晶格排列,有实心和空心两种病毒粒子,直径为20～24nm,无囊膜。有4种结构蛋白;VP1(85kD)、VP2(70kD),VP3(56kD)和VP4(39kD),其中VP3是主要结构蛋白。病毒核酸为单链DNA,分子量约为5.1kb。酶联免疫吸附试验(ELISA),荧光抗体试验(FA)、胶乳凝集(LPA)试验、琼脂扩散沉淀(AGP)试验和中和试验(NT)中,MPV的单抗与鹅细小病毒(Gosling Parvovirus,GPV)不发生交叉反应,GPV单抗也不与MPV发生反应。证明MPV是雏番鸭以泻、喘为主要症状的疫病的病原,是细小病毒科的一个新成员。

4种检测伪狂犬病病毒抗原方法的比较

本文应用特异性单克隆抗体,建立了3种检测伪狂犬病病毒抗原的方法(FA、RPHA和EL-ISA)。这3种方法的特异性和敏感性与病毒分离法作了比较。结果表明:FA和RPHA不仅特异性强,同时具有与病毒分离同等的阳性检出率,它们与病毒分离的符合率分别为88.2%、76.5%(肺组织)和88.5%、58.8%(扁桃体)。三者之间阳性检出率在统计学上无显著差异(P>0.05)。由于RPHA设备要求低,操作简便,结果直观。因此更适于兽医基层单位推广应用。此外,利用病毒分离和FA试验,测定了PRV在病猪体内心、肝、脾、肺、肾、脑干、扁桃体等组织上的分布,结果表明,除肺和扁桃体外,其它各组织PRV出现的阳性数较少,且不稳定,因此肺和扁桃体是诊断猪伪狂犬病最好材料。

胶乳凝集试验在鸡传染性法氏囊病诊断中的应用

应用鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体（ＩＢＤＶ－ＭｃＡｂ）致敏的聚苯乙稀胶乳，建立了检测ＩＢＤＶ抗原和抗体的胶乳凝集（ＬＰＡ）和胶乳凝集抑制（ＬＰＡＩ）试验。ＬＰＡ可检测出６ｍｇ／Ｌ的ＩＢＤＶ蛋白。比较了ＬＰＡ、直接萤光抗体试验（ＤＦＡ）和琼脂扩散沉淀试验（ＡＧＰ）三种方法检测ＩＢＤＶ抗原的特异性、敏感性和相关性，明确了ＬＰＡ和ＤＦＡ的检出率高于ＡＧＰ，ＬＰＡ和ＤＦＡ检测结果的符合率为８６％。

苏云金杆菌毒性蛋白基因5′端的PCR合成、克隆及序列测定

以苏云金杆菌戈尔斯德亚种(Bacillus thuringiensis var.kurstaki HD-1)的总DNA为模板,用多聚酶链反应(PCR)的方法,成功合成了该菌毒性蛋白基因5′端片段,并克隆到大肠杆菌Bluescript质粒载体上,获得了重组质粒pQC20。核酸限制酶谱分析表明,pQC20的重组片段属于Kronstad的毒性蛋白基因限制酶片段长度多型性分类系统中5.3 Kb类型基因。对该基因片段的全序列分析结果证明,在以PCR合成的1959个核苷酸中与国外已发表的5.3 Kb类型基因的相应片段仅有一个核苷酸差异。该基因片段具有表达有生物活性的毒性蛋白所必需的全部核苷酸序列。