胫骨内移植UMR-106成瘤组织块构建裸鼠骨肉瘤模型

目的获得UMR-106成瘤组织块,构建裸鼠骨肉瘤模型。方法采用组织块移植的方法,在受体动物的胫骨髓腔内移植UMR-106骨肿瘤细胞株,观察裸鼠行为特征变化、体质量变化、肿瘤生长状况、成瘤率、肿瘤包块的病理学、血清指标,构建裸鼠骨肉瘤模型。结果造模后,模型组裸鼠活动量明显减少,精神状态变差,觅食性变差;模型组裸鼠体质量随着天数的增加逐渐增大;肿瘤体积随着天数的增加逐渐增大,成瘤率91.67%;模型组皮下肿瘤形体可见明显包膜,较大,瘤体质地较硬,表面呈结节状,表面大量血管分布,显微镜下可见丰富的毛细血管,细胞核有异型且大小不等,核仁约1～4个,核分裂相较多;模型组与对照组相比,碱性磷酸酶和磷酸差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用组织块移植的方法,在受体动物的胫骨髓腔内移植UMR-106骨肿瘤细胞株,构建骨肉瘤动物模型,为骨肉瘤的进一步研究、治疗等奠定了实验基础。

基于多重信号放大的miR-135b电化学传感器的制备及效果评价

目的通过"多重信号放大策略"构建一种miR-135b电化学传感器,并将其用于骨肉瘤标志物miR-135b的检测,考察其应用价值。方法设计高特异性茎环捕获探针(CP)并进行末端氨基修饰,再采用L-赖氨酸通过循环伏安电聚合法在电极表面形成一层纳米膜,将捕获探针与修饰电极通过共价键相连后,通过T-7核算外切酶实现靶序列(TP)循环,再通过辅助探针AP1和AP2,使得捕获探针、辅助探针AP1和AP2三者通过DNA纳米长距自组装技术进行级联杂交,从而在电极表面形成"三明治"DNA双链形态的miR-135b电化学传感器,并用其检测骨肉瘤、良性骨肿瘤及健康对照组人群血清中的miR-135b。结果成功构建了一种基于"多重信号放大策略"的miR-135b电化学传感器,其检测峰电流值与miR-135b浓度的对数在1.0~1.0×10~4 pmol/L范围内成正比,检出限(S/N=3)为0.52 pmol/L,具备良好的稳定性、重现性和特异性,在检测人血清时具有良好的灵敏性。结论成功构建了一种基于"多重信号放大策略"的miR-135b电化学传感器,其检测限低,准确性好,作为骨肉瘤患者的大规模筛查和连续动态检测具有重大的现实意义。