肝细胞生长因子基因转染缺氧培养骨髓间充质干细胞凋亡相关蛋白的影响

背景:研究已证实肝细胞生长因子基因转染可提高骨髓间充质干细胞移植效果,但其具体机制尚未完全明确。目的:探讨肝细胞生长因子基因转染对缺氧、无血清培养骨髓间充质干细胞c-Met、Bax、Bcl-2、Caspase-3表达及细胞迁移的影响。方法:1贴壁法体外分离、扩增培养骨髓间充质干细胞。用x-gal染色法检测含肝细胞生长因子基因的重组腺病毒对骨髓间充质干细胞的感染率。2在缺氧、无血清条件下培养0,3,6,9,12 h,采用RT-PCR及Western blot测定骨髓间充质干细胞Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达。3骨髓间充质干细胞缺氧、无血清培养6 h,采用RT-PCR及Western blot测定HGF、c-Met、Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达。4细胞迁移划痕法观察缺氧、无血清培养6 h后肝细胞生长因子转染对骨髓间充质干细胞迁移的影响。结果与结论:1重组腺病毒对骨髓间充质干细胞的转染率与病毒感染复数具有量效关系,病毒感染复数为150时细胞的感染率达96.4%。2随着缺氧时间的延长骨髓间充质干细胞Bax、Bcl-2表达逐渐升高(P<0.05),缺氧6 h时Bax/Bcl-2比值、Caspase-3蛋白达到最小(P<0.05)。3缺氧及无血清培养6 h后,与对照组及空载体组相比,Ad-HGF组HGF、c-Met、Bcl-2表达增高,而Bax、Caspase-3表达下降(P<0.05),对照组与空载体组差异无显著性意义(P>0.05)。4Ad-HGF组骨髓间充质干细胞在缺氧培养6 h后,迁移率比对照组及空载体组高(P<0.05)。结果表明肝细胞生长因子基因转染上调缺氧、无血清培养骨髓间充质干细胞c-Met、Bcl-2表达,下调Bax、Caspase-3表达,增强骨髓间充质干细胞迁移能力。

肾上腺髓质素对缺氧培养骨髓间充质干细胞表达凋亡相关蛋白的影响

背景:肾上腺髓质素基因转染能增强骨髓间充质干细胞在缺血、缺氧环境下的抗凋亡能力,但其机制尚未完全明确。目的:观察肾上腺髓质素对骨髓间充质干细胞缺血、缺氧时Bax、Bcl-2和Caspase-3等凋亡相关调节蛋白表达的影响。方法:贴壁法分离、培养、纯化SD大鼠骨髓间充质干细胞,缺氧、无血清培养0,3,6,9,12 h后用Western blot测定Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达以确定最佳缺氧时间。采用缺氧6 h为时间点,根据缺氧、无血清培养前是否进行肾上腺髓质素预处理分为对照组(未加入肾上腺髓质素)及肾上腺髓质素不同质量浓度组(1,10,100μg/L),然后采用Western blot测定Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达。结果与结论:1无血清培养条件下缺氧0,3,6,9,12 h后骨髓间充质干细胞Bax、Bcl-2表达均增加(P<0.05),缺氧6 h时Bax/Bcl-2比值、caspase-3蛋白达到最小(P<0.05)。2缺氧6 h时,与1,10μg/L肾上腺髓质素组相比,100μg/L肾上腺髓质素组表达Bax蛋白、Caspase-3蛋白最低,Bax/Bcl-2比值最低,而表达Bcl-2蛋白最高(P<0.05)。结果表明肾上腺髓质素能降低无血清、缺氧条件下骨髓间充质干细胞Bax/Bcl-2比值、Caspase-3蛋白表达,该效应存在剂量依赖性。

急性冠状动脉综合征患者经皮冠状动脉介入治疗术前胆红素水平与对比剂急性肾损害的关系

目的探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术前总胆红素水平与对比剂急性肾损害(CI-AKI)的关系。方法收集168例行PCI治疗ACS患者的一般资料、手术过程、造影结果、术前及术后肾功能等。根据是否发生CI-AKI分为CI-AKI(n=15)及非CI-AKI组(n=153),比较组间胆红素、肾功能水平;根据总胆红素水平分为高胆红素(总胆红素≥17.1μmol/L,n=52)和胆红素正常组(总胆红素<17.1μmol/L,n=116);按总胆红素三分位分为胆红素低(n=55)、中(n=57)、高(n=56)组,比较各组CI-AKI的发生率。Logistic回归分析胆红素水平与CI-AKI的关系。结果CI-AKI组术前总胆红素水平低于非CI-AKI组[(12.07±4.68)比(15.95±6.75)μmol/L,P=0.003]。高胆红素组CI-AKI发生率低于胆红素正常组(1.92%比12.07%,P=0.033),胆红素三分位组CI-AKI发生率依次为低分位组12.73%>中分位组8.77%>高分位组5.36%,但差异无统计学意义(P=0.395)。校正年龄、性别等因素后,术前高总胆红素水平降低CI-AKI的发生风险(OR=0.105,95%CI0.013～0.818,P=0.031)。结论在行PCI的ACS患者中,术前高总胆红素水平可降低CI-AKI的发生风险。