肝胆管结石病并发肝胆管癌CEA表达的研究

作者采用高灵敏度的免疫组化ＳＰ法对９例胆管癌（ＣＣ）、１００例肝胆管结石病（ＨＬ）及１５例正常肝胆组织的癌胚原（ＣＥＡ）表达进行。结果发现正常胆管不表达ＣＥＡ；９例ＣＣ的ＣＥＡ阳性率为１００％，呈阳性度较高的非规则性分布；１００例ＨＬ中伴异型增生的有２７例，其ＣＥＡ阳性率为５９．３％。呈极性分布，表明组织ＣＥＡ的检测将有助于ＨＬ并发ＣＣ的诊断，且对于ＨＬ胆管增生性病变性质的判别具有一定的参考价值．

逆转录病毒载体介导IL-2基因转染人肝细胞的建立及其部分生物学性状

目的 建立ｈＩＬ－２基因修饰的人肝细胞株并探讨对其生物学活性的影响。 方法应用重组逆转录病毒载体ｐＬＮＣＩＬ－２，将ｈＩＬ－２基因导入人肝细胞系Ｌ－０２，观察其形态及克隆形成率的变化，检测细胞培养上清中ｈＩＬ－２的含量，以及进行转染细胞基因组ＤＮＡ ＮｅｏＲ基因片段的ＰＣＲ扩增。结果Ｌ－０２／ＩＬ－２细胞的增殖速度和克隆形成率低于Ｌ－０２／Ｎｅｏ细胞和Ｌ－０２细胞。Ｌ－０２／ＩＬ－２细胞的培养液中ｈＩＬ－２的含量达３２ ０００ ｐｇ／１０６ｃｅｌｌｓ·ｄ，并可持续表达１０ ｗｋ以上。从Ｌ－０２／ＩＬ－２细胞和Ｌ－０２／Ｎｅｏ细胞基因组ＤＮＡ中，均扩增到ＮｅｏＲ基因片段（７９０ ｂｐ）。结论应用重组逆转录病毒载体成功地建立了Ｌ－０２／ＩＬ－２细胞株，为进一步进行肝细胞移植动物实验奠定了基础。

大鼠改良式原位肝移植手术技巧探讨

目的探讨建立稳定大鼠原位肝移植模型的手术操作技巧。方法成年雄性SD大鼠200只,体重200～250g;成年雄性Wistar大鼠60只,体重230～280g,供体体重小于受体约30g。其中SD大鼠为供、受体的同基因肝移植70只(SD-SD组),SD、Wistar分别为供、受体的同种异体肝移植60只(SD-Wistar组)。采用改良二袖套法行大鼠原位肝移植,充分暴露第一肝门,不翻动肝脏先行门静脉灌注;在体一步法离断肝上下腔静脉,不带膈肌环;吻合肝上下腔静脉采用单线连续缝合;双线牵引法安装门静脉袖套。术后充分补液维持大鼠血液动力学稳定。结果供体手术时间(38.2±2.5)min,受体手术时间(45.6±3.5)min,无肝期(15.1±2.2)min,手术成功率93%,1周存活率92%,与传统二袖套法比较差异有统计学意义(P<0.05)。SD-SD组手术成功64只,受体存活时间2～9个月,平均145d;术后约3d肝功能恢复正常,肝组织病理无明显变化。SD-Wistar组手术成功57只,受体存活时间8～20d,平均10.5d;大鼠于术后3～5d出现急性排斥反应,未经处理后均死亡。结论改良式肝移植操作简便,成功率高,可为大鼠原位肝移植实验提供稳定可靠的动物模型。

原发性肝癌患者乙型及丙型肝炎病毒感染的检测

目的 调查原发性肝癌患者乙型及丙型肝炎病毒感染情况。 方法 采用免疫组织化学 SP法检测15 7例原发性肝癌患者乙型肝炎病毒 (HBV)及丙型肝炎病毒 (HCV)感染情况 ,每例患者均有血清学检测资料 ,另取 30例良性肝病组织作对照 ,所有数据用卡方检验。 结果 15 7例原发性肝癌患者中 HBV感染阳性率为31.8% (5 0 / 15 7) ,HCV感染阳性率为 5 1.0 % (80 / 15 7) ,其中 10 7例原发性肝细胞癌 HBV、HCV感染阳性率分别为39.3% (42 / 10 7) ,4 5 .8% (49/ 10 7) ,5 0例胆管细胞癌 HBV、 HCV感染阳性率分别为 16 .0 % (8/ 5 0 ) ,6 2 .0 %(31/ 5 0 ) ,原发性肝细胞癌、胆管细胞癌 HBV、HCV重叠感染率分别为 2 7.1% (2 9/ 10 7) ,14 .0 % (7/ 5 0 ) ,良性肝病组HBV、HCV感染阳性率分别为 16 .7% (5 / 30 ) ,30 .0 % (9/ 30 )。原发性肝细胞癌 HBV感染、胆管细胞癌 HCV感染率高于良性肝病组 ,差异均有显著性 (P<0 .0 5 )。原发性肝细胞癌 HBV、HCV血清学检测阳性率分别为 87.8%(94 / 10 7) ,13.1% (14 / 10 7) ,胆管细胞癌 HBV、HCV血清学检测阳性率分别为 6 8.0 % (34/ 5 0 ) ,16 .0 % (8/ 5 0 )。 结论 原发性肝癌与 HBV。

丙肝病毒受体CD81与肝外胆管癌的相关性

目的:探讨肝外胆管癌与丙型肝炎病毒受体CD81的相关性。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶法(SP法)检测62例肝外胆管癌及30例胆道良性病变组织中HCVRNA、CD81mRNA序列片段以及HCVNS5抗原、CD81蛋白的表达。结果:肝外胆管癌组织中HCVRNA和CD81mRNA的阳性率分别为58.1%和72.6%,与对照组相比差异有显著性(#2=22.030,P<0.001;#2=7.453,P<0.01);HCVRNA阳性的肝外胆管癌组织CD81mRNA表达率为55.6%,HCVRNA阴性的CD81mRNA表达率为96.2%,两者差异有显著性(#2=12.503,P<0.001);免疫组化检测均有类似结果。HCVRNA阳性肝外胆管癌的CD81mRNA丢失与否与分化状况有关(#2=14.103,P<0.01);分化Ⅳ级与Ⅰ级的CD81mRNA丢失差异有显著性(P<0.05/3)。结论:肝外胆管癌组织中有HCV基因的高表达;CD81作为HCV感染胆管细胞的受体与肝外胆管癌分化有一定的相关性。

腹腔镜解剖性与非解剖性肝切除术治疗原发性肝癌的近、远期疗效分析

目的分析腹腔镜下解剖性肝切除术(LAH)与非解剖性肝切除术(LNAH)治疗原发性肝细胞癌(HCC)的近、远期疗效。方法回顾性分析107例接受腹腔镜肝切除术且术后病理证实为HCC的患者的临床资料,其中LAH组66例,LNAH组41例。比较两组患者围手术期的相关情况及术后生存率等近、远期疗效。结果LAH组和LNAH组患者的术中出血量[(135.0±249.9)mL vs(117.7±311.3)mL]、住院时间[(18.0±5.0)d vs(16.3±5.4)d]比较,差别无统计学意义(P>0.05);LAH组的手术时间较LNAH组长[(173.0±65.6)min vs(145.3±65.7)]min,P<0.05];LAH组术后1,3,5 a累积无瘤生存率(分别为84.8%,63.2%及52.2%)高于LNAH组(80.5%,39.2%及24.9%,P<0.05);LAH组术后1,3,5 a累积总体生存率(分别为95.5%,78.6%及68.4%)高于LNAH组(92.7%,64.3%及44.2%,P<0.05)。单因素分析显示,脉管瘤栓、肿瘤>5 cm、LNAH及包膜侵犯是影响术后无瘤生存率的危险因素;肿瘤>5 cm、LNAH及包膜侵犯是影响术后总体生存率的危险因素。COX回归模型多因素分析结果显示,肿瘤大小和手术方式是影响无瘤生存率和总体生存率的独立危险因素。结论腹腔镜LAH治疗HCC具有更好的近、远期临床疗效。

应用微载体Cytodex3高密度培养L-02人肝细胞系

目的 探讨用微载体进行 L - 0 2人肝细胞系高密度培养的方法 ,以期为生物人工肝提供有应用价值的生物材料。 方法 在限制贴壁的条件下 ,采用 Cytodex3为材料进行 L- 0 2人肝细胞的微载体培养 ,诱导肝细胞聚集体的形成 ,定期进行细胞计数及培养上清白蛋白、尿素、谷草转氨酶 (AST)、乳酸脱氢酶 (L DH )等生化指标的检测 ,并在光镜和透射电镜下观察生长情况。 结果 培养至第 6天时 ,所有的微载体均包满细胞 ,并形成微载体诱导的肝细胞聚集体 ,细胞数量达最高峰为 (17.1± 0 .76 )× 10 7/瓶 ,同时白蛋白和尿素的合成亦最高 ,浓度分别为5 3.81± 1.6 4m g/ L 和 5 .35± 0 .13m mol/ L。 结论 Cytodex3培养的 L- 0 2人肝细胞可形成高密度的肝细胞聚集体 ,具有一定的生物合成和代谢功能。

胰十二指肠切除术的技术改进

目的 探讨改进胰十二指肠切除术 ,预防术后并发症 ,提高手术疗效的方法。 方法 采用保留幽门、胰管空肠粘膜吻合 +胰肠遮盖套入式吻合、胰管支撑外引流充分切除胰钩突的术式 ,并观察其疗效。 结果 全组未发生胰瘘及胰断面出血。保留幽门胰十二指肠切除术 (PPPD)者有 1例术后发生胃潴留 ,其余胃排空正常。 结论 PPPD只要操作得当 ,可避免术后胃潴留。胰肠遮盖套入式吻合操作简便 ,可防止术后胰瘘、胰断面出血等并发症。

3种脂质体-抗肿瘤药复合物的制备及急性毒性

目的 筛选较理想的脂质体 -抗肿瘤制品 ,进而应用于 期临床肿瘤患者的治疗。 方法 制备脂质体 ,并包封 3种抗肿瘤药物 (表阿霉素、顺铂和高三尖杉酯碱 ) ,形成脂质体 -抗肿瘤药复合物 ,检测其理化性质、包封率及毒性反应。 结果 脂质体直径为 0 .1～ 0 .4μm的单层膜囊泡 ;3种药物包封率分别为 91.2 8% ,47.7%和47.6 2 %。体外培养细胞经包封药物作用后 2 4h存活率分别为 6 0 % ,70 %和 70 % ,明显高于单纯药物作用。经小鼠尾静脉注射后 L D5 0 值高于无脂质体包封的原药。 结论 制备的脂质体 -抗肿瘤药复合物为较理想的制品 。

成人正常肝细胞的持续旋转培养

目的 探讨维持培养成人肝细胞较长时间高活性的方法。 方法 采用限制贴壁、培养液中加入细胞生长因子和激素、持续轻微旋转的方法培养肝细胞。定期进行活细胞计数及培养上清液中人白蛋白浓度检测 ,并在光镜和透射电镜下观察细胞生长情况。 结果 肝细胞有一定程度的增殖 ,从第 2天至第 14天活细胞密度可维持在 4.0× 10 5 / m l以上 ,分泌白蛋白可维持较高功能状态至 2 0天左右 ,均明显优于对照方法 ;光镜观察旋转的细胞聚集体可基本保持形状至 2 0天 ,电镜亦显示培养至 15天的悬浮聚集体肝细胞仍具有正常肝细胞超微结构特征。 结论 应用该法能较长时间保持成人肝细胞的高活性状态 ,可用于生物人工肝系统所需的细胞供体培养。

三维重建仿真肝切除系统指导肿瘤右半肝切除手术中的临床应用

目的评价三维重建及仿真肝切除系统用于肿瘤右半肝切除的临床价值。方法回顾性分析2017年1月至2018年5月福建医科大学附属协和医院收治的原发性肝癌行右半肝手术24例患者的临床资料。将病例随机分2组,三维重建组14例,对照组10例。观察手术时间、术中出血量、术后肝功能不全、术后并发症和术后住院时间。结果两组手术顺利,术中无大出血等并发症。术后三维重建组均无发生肝功不全、肝衰竭、胆汁漏等并发症;对照组中仅1例发生术后一过性肝功能不全。患者手术时间三维重建组为(54.9±5.7)min,对照组为(73.7±7.3)min;术中出血量三维重建组为(124.3±25.2)mL,对照组为(248.0±65.9)mL;术后ALT三维重建组为(124.3±25.2)U/L,对照组为(411.1±95.7)U/L;术后住院时间三维重建组为(6.6±2.2)d,对照组为(8.5±1.9)d,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论三维重建及仿真肝切除系统可以准确重建肝内脉管走行及其与肿瘤的三维关系,精确计算剩余肝脏体积和肿瘤体积,为肿瘤右半肝切除手术方案的制定提供了可靠依据,降低了术中和术后并发症的发生,缩短了患者的术后住院时间。对肿瘤右半肝切除的应用具有重要的临床价值。

加速康复外科护理在原发性肝癌患者肝切除围手术期中的应用效果

肝切除术作为最有效治疗肝脏肿瘤的方法之一,目前仍是首选治疗方式[1].但是,肝切除术后出现会出血、胆漏、肺部感染、切口愈合不良等并发症,这是影响患者康复的主要因素,术后疼痛、营养不良、胃肠蠕动缓慢等因素也影响患者的术后康复.加强围手术期管理,减轻和减少围手术期患者生理和心理应激术后并发症,是近年来肝切除术后加快康复的重点.加快康复外科(enhanced recovery after surgery,ERAS)[2]是指采取一系列优化措施来减少围手术期应激反应及并发症.近年来,ERAS已经在泌尿外科、胸外科、胃肠外科等手术中较为广泛地应用,并逐步推广运用于肝脏手术[3].

原发性肝细胞癌细胞凋亡相关蛋白bcl-2和bak的表达及意义

目的 探讨细胞凋亡相关蛋白bcl-2和bak与肝癌的关系及其意义。方法 采用免疫组化S-P方法,检测22例肝癌、22例肝癌伴肝硬变、20例肝硬变和10例正常肝组织中bcl-2及其相关蛋白bak的表达。结果bcl-2蛋白在肝癌中表达阳性率为50.O％(22/44),而正常肝组织为60.0％(6/10),差异有显著性(P<0.05)。在肝癌组织中bak蛋白表达阳性率为88.6％(39/44),而肝硬变组织为95.0％(19/20),差异无显著性(P>0.05)。结论bcl-2在肝癌和肝硬变组织呈中等表达,而bak在肝癌和肝硬变均呈高表达。

达芬奇机器人手术系统在肝切除手术中的应用

目的:探讨达芬奇机器人手术系统在肝切除手术中应用的可行性、安全性和优势。方法:回顾性分析2016年3月~2019年3月福建医科大学附属协和医院应用达芬奇机器人手术系统和腹腔镜手术系统对182例肝脏疾病患者进行肝切除治疗的临床资料。结果:所有患者手术均获成功,机器人组(80例)行半肝切除9例,肝叶切除25例,肝段和局部切除46例,其中2例中转开腹,手术时间为(126±5)min,失血量为(128±15)ml,10例术中进行输血;术后无腹腔内出血并发症,2例出现胆汁漏,1例出现肝周积液,5例出现腹水,2例出现肺炎;术后平均住院时间为9d。腹腔镜组(102例)行半肝切除25例,肝叶切除23例,肝段和局部切除54例,其中3例中转开腹,平均手术时间为(133±5)min,平均失血量为(149±10)ml,15例术中进行输血;术后2例出现腹腔内出血,3例出现胆汁漏,2例出现肝周积液,9例出现腹水,6例出现肺炎;术后平均住院时间为10d。两组术中和术后指标相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。但在手术过程中,处理肝断面肝静脉破口或门静脉破口用Prolene线进行缝合修补时,机器人组比腹腔镜组所需时间明显缩短[(1.2±0.04)min Vs (3.2±0.03)min,P<0.0001;(1.8±0.03)min Vs (3.6±0.05)min,P<0.0001]。同样,在处理肝静脉断端或胆管残端进行缝合时,机器人组比腹腔镜组所需时间亦明显缩短[(1.5±0.03)min Vs (3.0±0.03)min,P<0.0001;(2.2±0.03)min Vs (3.6±0.02)min,P<0.0001]。在解剖游离左/右肝蒂等第一肝门结构时,机器人组比腹腔镜组所需时间更短[(4.1±0.08)min Vs (4.3±0.05)min,P=0.025]。结论:达芬奇机器人在肝切除手术方面与腹腔镜肝切除具有相似的安全性和有效性,且手术相关并发症发生率相近。

促凋亡基因bax在肝细胞癌的表达及其临床意义

目的 :研究促凋亡基因bax在肝细胞癌 (HCC)的表达及其临床意义。方法 :应用免疫组化SP方法 ,检测 4 4例原发性肝细胞癌 (包括其中 2 2例肝癌伴肝硬化 )、肝硬变 2 0例和正常肝组织中bax蛋白的表达。结果 :bax阳性率在HCC为 2 .2 7% (1/ 4 4 )、肝硬变为 30 % (6 / 2 0 )和 10例正常肝组织为 5 0 % (5 / 10 )。结论 :肝癌与肝硬化之间以及肝癌与正常肝组织间均有显著差别P <0 .0 5 ,bax参与细胞凋亡的调节作用。

反义寡核苷酸对内皮细胞E选择素和胞间粘附分子1表达的抑制作用

目的 探讨反义寡核苷酸 (ASODN)对内皮细胞表达 E选择素和胞间粘附分子 1(ICAM- 1)的抑制作用。 方法 应用脂质体分别将 E选择素和 ICAM- 1ASODN转染内皮细胞 ,随后加入肿瘤坏死因子 α(TNF- α)诱导 ,并通过流式细胞技术测定内皮细胞膜 E选择素和 ICAM- 1蛋白的表达 ,RT- PCR半定量法测定 E选择素和ICAM- 1m RNA的量。 结果 裸 ASODN和脂质体 - ASODN均降低了内皮细胞 E选择素和 ICAM- 1分子及其m RNA的表达 ,脂质体 - ASODN尽管浓度低 ,作用更为明显。 结论

联合肝切除及肝十二指肠韧带骨骼化清扫治疗肝门部胆管癌10例

肝门部胆管癌手术切除是胆道外科颇具挑战性的问题，由于其特殊的中位、复杂的毗邻关系和独特的生物学特性，曾一度被视为无法切除的肿瘤，以往切除率仅为10％左右，近年来，外科治疗已取得长足的进步，根治性切除明显提高了疗效。我们自1996年以来手术治疗10例该病患者，观察报告如下。

胰十二指肠切除术15例手术改进的体会

目的 探讨改进胰十二指肠切除术 (PD) ,预防术后并发症 ,提高手术疗效的方法。方法 采用保留幽门、胰管空肠黏膜吻合、胰肠遮盖套入式端端吻合 ,胰管支撑外引流等术式、观察其疗效。结果 全组未发生胰瘘及胰断面出血。保留幽门的胰十二指肠切除术 (PPPD)组有 1例术后发生胃潴留 ,其余胃功能正常。结论 PPPD只要操作得法 ,可避免术后胃潴留 ,胰肠遮盖套入式端端吻合操作简便 ,可有效防止术后胰瘘。

凋亡相关基因bak在原发性肝癌中的表达及临床意义

目的 探讨细胞凋亡相关蛋白 bak在原发性肝癌 (Hcc)中的表达及其临床意义。方法 采用免疫组化 SP方法 ,检测 2 2例 Hcc、 2 2例 Hcc伴肝硬变、 2 0例肝硬变和 10例正常肝组织中 bak蛋白的表达。结果 bak蛋白阳性率 ,Hcc为 88.6 3% (39/ 4 4) ,肝硬变为 95 % (19/ 2 0 ) ,两者无显著差别 (P>0 .0 5 ) ,正常肝组织 4 0 % (4/ 10 )。结论 bak蛋白于 Hcc、肝硬变均呈高表达 。