沉默放射抗拒鼻咽癌细胞Annexin A2基因表达对裸鼠鼻咽癌移植瘤放射敏感性的影响

目的探讨沉默Annexin A2基因对放射抗拒鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响。方法选择36只SPF级BALB/c裸鼠,雄性,6周龄,体质量18~22 g。按随机数字表法分为对照组[CNE-2(R743)组]、单纯照射组[CNE-2(R743)/R组]、转染对照组(sh R-C组)、转染对照联合照射组(sh R-C/R组)、转染组(sh R-ANXA2组)及转染联合照射组(sh R-ANXA2/R组),每组6只。用p Gene Clip空载体及p Gene Clip-ANXA2-sh RNA载体转染CNE-2(R743)细胞构建移植瘤动物模型,用6 MV X射线在室温下行单次照射动物,总吸收剂量为10 Gy,剂量率为每分钟400 c Gy,照射野面积为20 cm×20 cm。观察各组裸鼠移植瘤照射后的生长情况、移植瘤体积变化情况,免疫组织化学检测移植瘤组织中Annexin A2的表达,Western blot检测移植瘤组织中Ku70和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果 10 Gy X射线照射后3周,sh R-ANXA2/R组(168.46%±129.00%)裸鼠肿瘤生长速度最慢,与CNE-2(R743)/R组(462.26%±195.60%)和sh R-C/R组(407.99%±116.60%)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。沉默Annexin A2的sh R-ANXA2/R组(2.68%±1.29%)的相对生长速率较CNE-2(R743)/R组(5.62%±1.96%)和sh R-C/R组(5.08%±1.17%)降低(P<0.05),生长抑制率增加。sh R-ANXA2/R组的q值为1.06,提示有放射增敏作用。免疫组织化学结果显示,sh R-ANXA2组移植瘤中Annexin A2的表达较CNE-2(R743)组和sh R-C组低。各组裸鼠移植瘤组织中Ku70蛋白的表达未见明显变化(P>0.05)。sh R-ANXA2/R组(2.97±0.44)的PCNA蛋白表达水平较CNE-2(R743)/R组(2.04±0.63)和sh R-C/R组(1.26±0.38)明显升高(P<0.05)。结论沉默Annxin A2基因可以提高裸鼠体内鼻咽癌移植瘤的放射敏感性。