地方高校生物技术专业“三层次四结合”实践教学

在地方高校学科专业群构建背景下,构建与实施了专业公共基础课程、专业必修课程、能力拓展互选课程“三层次”和理论与实践、教学与科研、校内与校外、毕业论文与专业实习“四结合”的生物技术专业实践教学体系。该体系优化了课程体系、压缩了学时,独立设课、单独考核、单独计分;体系的实施使得生物技术专业整个实践课程体系更具有全局观念、连贯性,能更大程度地锻炼专业学生的技能、提升学习的主动性和学习效果。

比较教学法在动物生物化学教学改革中的应用

动物生物化学是动物医学专业重要基础课程。为了提高该课程的教学质量,文章从概念,化学结构,反应过程和反应场所等方面举例分析了比较教学法在动物生物化学教学改革中的应用。比较教学法不仅丰富教学形式,增强学生的学习积极性,还培养学生自己独立思考和分析能力,经过多年的实践,收到了良好的效果。

日粮添加茶籽饼粕对肉鸡脂肪代谢、免疫功能和肠道微生物的影响

试验旨在探讨日粮添加茶籽饼粕对肉鸡脂肪代谢、免疫功能和肠道微生物的影响。选取150羽1日龄健康AA肉公鸡,随机分为5个处理组,每处理组5个重复,每重复6羽。对照组饲喂玉米-豆粕型基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加0.50%、0.75%和1.00%的茶籽饼粕,同时设置300 mg/kg金霉素阳性对照组,试验期35 d。测定21和35 d肉鸡血脂含量、体脂含量、血清免疫指标和肠道微生物含量。结果表明,与对照组相比,日粮添加不同剂量的茶籽饼粕可极显著提高21 d肉鸡胸肌肌肉脂肪(IMF)含量(P<0.01)和降低肉鸡腿肌(IMF)含量(P<0.01);添加0.50%茶籽饼粕可显著降低肉鸡盲肠中大肠杆菌含量(P<0.05)。日粮添加茶籽饼粕对肉鸡体脂代谢和肠道微生物菌群具有一定的调控作用。

动物医学专业“3+1”创新型人才培养模式的探讨

动物医学专业"3+1"创新型人才培养模式改革,打破现有的大学生完全在校学习的培养模式,极大增加了学生的学习积极性,强化了学生的临床操作技能,提高了学生的就业能力和综合素质。实现了学校、学生和企业的三赢,初步证实了该模式的科学性和可行性。对同类院校的教学改革具有一定的参考、推广价值。

不结球白菜BcGAPDH的生物信息学分析

采用生物信息学方法对克隆测序的不结球白菜(Brassica campestris ssp.chinensis)Bc GAPDH(3-磷酸甘油醛脱氢酶)蛋白质的理化性质、跨膜区、亲水性、亚细胞定位、所含模体及蛋白质结构进行了预测。理化性质分析表明,该酶含有328个氨基酸,相对分子量为35 161.2,p I值为9.03。TMpred跨膜分析表明,该酶没有跨膜螺旋区,这与Prot Scale预测的该酶为亲水性蛋白质相吻合。用Target P server程序预测该酶定位于线粒体上,结构域分析表明该酶含有多种磷酸化位点,二级结构以α-螺旋和随机卷曲为主。借助SWISS-MODEL软件对该酶进行了三维同源建模。

南平市延平区猪场猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征抗体水平监测及分析

为了解南平市延平区规模化猪场猪瘟(Clssical Swine Fever,CSF)和猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)的免疫水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对2019-2022年收集到的1 926份猪血清进行CSF和PRRS抗体检测。结果发现2019-2022年CSF抗体阳性率总体在95%以上,相比之下,PRRS抗体阳性率存在波动,其阳性率总体也在83%以上;对春秋两季猪群CSF和PRRS抗体阳性率检测显示,CSF和PRRS抗体阳性率在春秋两季差异均不显著(P>0.05),然而2种疫病的抗体阳性率在春季普遍较高。说明猪场除了重点加强PRRS的免疫防控,也要特别注重秋季对CSF和PRRS的免疫防控来减少猪场损失。

闽西南地区部分规模化猪场猪伪狂犬野毒感染的血清流行病学调查

为了掌握闽西南地区规模化猪场猪伪狂犬野毒感染状况和流行趋势,应用ELISA方法对2012-2014年闽西南地区的859个规模化猪场22324份血清进行PR野毒感染血清学调查。调查结果显示被调查的猪场血清样品总阳性率为21.8%,场阳性率为57.0%;母猪、公猪、哺乳小猪、保育猪、育肥猪及后备猪的血清样品总阳性率分别为22.0%、23.7%、16.7%、15.6%、19.2%和27.2%,不同阶段的猪群PRVgE抗体阳性率差异显著(P<0.01)。2012年-2014年猪场阳性率分别为46.7%、45.4%和57.0%,血清样品阳性率分别为20.5%、18.4%和25.4%;血清样品阳性率在30%以上的猪场比例逐年上升,分别为14.8%、19.9%和32.2%;不同地区猪场PR野毒感染情况不同。结果表明近年闽西南规模化猪场猪伪狂犬病野毒感染压力依然很大,猪伪狂犬病的控制与净化形势严峻。

胎次、月份及背膘厚度对母猪繁殖性能的影响

为探明不同胎次、产仔月份及背膘厚度对母猪繁殖性能的影响,对福建省某猪场3 972窝长大二元母猪的繁殖记录进行统计,选择不同阶段长大二元母猪508头测定其背膘厚度并记录产仔情况,按胎次、产仔月份及背膘厚度分别对母猪繁殖性能的影响进行分析。结果表明：长大二元母猪3-6胎的产仔性能较好,第1胎总产仔数、初生均重较低,显著低于2-7胎（P〈0.05）,产活仔数显著低于2-6胎（P〈0.05）;总产仔数及产活仔数在2,3,5月份较高,在1,11,12月份较低,产死胎窝数母猪最多在7,8月份;配种背膘厚18-20 mm组的总产仔数、活仔数显著高于背膘厚度≥21 mm组（P〈0.05）;断奶背膘厚16-20 mm组产仔性能较好但与其他组差异不显著（P〉0.05）;产前背膘厚度为20-23 mm组的总产仔数、产活仔数显著高于10-15 mm组（P〈0.05）,背膘厚度≥24 mm的母猪产死胎窝数比例最高为58%;泌乳阶段母猪背膘损失4-6mm之间母猪断奶至下一次发情间隔时间最短,显著少于背膘损失〉6 mm组及〈0 mm组（P〈0.05）。表明胎次、产仔月份、背膘厚度对母猪繁殖性能有较大影响。

银杏叶-桑叶中药发酵制剂防治仔猪病毒性胃肠炎的应用效果研究

为了研究中药发酵制剂防治仔猪病毒性胃肠炎的应用效果,通过产朊假丝酵母、枯草芽孢杆菌等益生菌发酵银杏叶、桑叶等中药材制备中药制剂并研究其体外抑菌、抗病毒和现场防治效果。结果表明,中药发酵制剂对仔猪腹泻病原菌具有中度敏感作用,抑菌圈平均直径达到12.6 mm,并具有一定的抗TGEV活性作用,其治疗指数与传统中药材板蓝根、败酱草基本相当,其中抗吸附作用和抑制病毒复制作用明显。添加5 g/kg中药发酵制剂具有良好的病毒性胃肠炎仔猪治疗效果,其治疗效果与常规药物治疗相当。中药发酵制剂的生产与应用可为防治微生物病原菌引起的仔猪病毒性胃肠炎提供一条有效的途径。

源自猪场环境大肠杆菌耐药性检测及其产ESBLs菌耐药基因特征

为了解猪场周边水和土壤环境中大肠杆菌耐药性及其中产ESBLs菌的耐药基因特征,用纸片扩散法检测了从福建省龙岩市5个规模化猪场周边水和土壤中分离的55株大肠杆菌对12种抗菌药的耐药性,并对其中产ESBLs菌进行了表型筛选;在此基础上,用CTX-M、TEM、SHV及OXA等4种ESBLs基因引物进行PCR检测与分析。结果表明,猪场环境分离的大肠杆菌对青霉素类、环丙沙星、四环素等耐药率较高,其中水源菌耐药率较高。55株大肠杆菌中,19株检出ESBLs基因,ESBLs检出率为34.5%。ESBLs基因型检测结果显示,CTX-M、SHV及TEM的检出率分别为23.6%(13/55),1.8%(1/55)和9.1%(5/55),未检出OXA基因。本试验结果表明,龙岩市猪场环境大肠杆菌对选用抗菌素耐药率较高,其产ESBLs菌的主要ESBLs基因型为CTX-M。

猪伪狂犬病毒Jiangxi-FZ株的分离鉴定及其重要毒力基因分子特征

目的研究伪狂犬病病毒(PRV)新流行毒株重要毒力基因的分子特征。方法本研究从江西省某规模化猪场疑似猪伪狂犬病发病仔猪的脑组织中分离到1株病毒,通过PCR鉴定、病毒分离培养、细胞免疫荧光及易感动物试验证实该病毒为PRV野毒株并命名为PRV Jiangxi-FZ株。并对其重要毒力基因TK、gB、gC、gD及gE的分子特征和遗传进化关系进行分析。结果 Jiangxi-FZ株与其他PRV参考毒株的TK、gB、gC、gD及gE基因在核苷酸和氨基酸水平均具有很高的保守性,尤其是与2012年分离的2株PRV变异株的同源性较高。但在高度保守的基础上,仍存在一些差异,且部分差异具有特征性。遗传进化树分析结果显示,PRV Jiangxi-FZ株与2012年国内不同省份分离的PRV变异株亲缘关系较近,而与Becker等欧美洲毒株亲缘关系相对较远。结论 Jiangxi-FZ株具有当前PRV流行毒株的代表性,属近年来流行的PRV变异毒株。

胎次、分娩季节、品种和杂交方式对母猪繁殖性能的影响

通过对福建某规模化猪场母猪21 185窝繁殖记录进行整理,研究胎次、分娩季节、品种及杂交方式对母猪繁殖性能的影响。结果表明,第1胎母猪的窝产仔数、活仔数、健仔数、初生窝质量、初生均质量显著低于其他胎次(P <0. 05),第4胎母猪最高,第3～6胎繁殖性能较好;母猪窝产仔数、活仔数、健仔数、初生窝质量在春季最优,显著高于其他季节(P <0. 05),秋季母猪繁殖性能最低;二元母猪的繁殖性能最高,杜洛克母猪繁殖性能最低,长白母猪的初生均质量显著低于其他品种(P <0. 05);三元杂交及大白纯繁的繁殖性能较好,杜洛克纯繁及大白×杜洛克的繁殖性能较差。猪场应优化母猪胎次,高温季节做好降温及避免采用繁殖性能不高的杂交组合。

猪圆环病毒2型感染PK-15细胞中外泌体的鉴定及其对细胞增殖和凋亡的影响

旨在分离感染PCV2的PK-15细胞分泌的外泌体,探讨其在PCV2感染淋巴细胞中的作用。提取PCV2感染PK-15细胞上清液中的外泌体,利用透射电镜观察外泌体形态、纳米颗粒跟踪分析测定外泌体粒径、Western blot检测外泌体标记蛋白分子(CD81、TSG101);PKH67标记外泌体后检测细胞对外泌体的摄取;提取PCV2-外泌体基因组,检测PCV2 Rep和Cap基因;利用间接免疫荧光试验检测PCV2-外泌体感染PK-15细胞后PCV2病毒定位;通过绝对定量PCR检测PCV2-外泌体对淋巴细胞的感染率;利用CCK-8法检测淋巴细胞增殖;利用Annexin V-FITC/PI检测淋巴细胞凋亡率。透射电镜和外泌体粒径分析结果显示,PK-15细胞分泌的外泌体为双层膜的囊泡,直径30~200 nm;Western blot结果显示PK-15细胞分泌的外泌体存在特异性标记蛋白CD81和TSG101;外泌体摄取试验结果显示PCV2-外泌体能够被细胞摄取;PCR结果表明PCV2-外泌体基因组中含有PCV2 Rep和Cap基因;间接免疫荧光结果显示,与PCV2直接感染相比,PCV2-外泌体感染的淋巴细胞中,PCV2病毒拷贝显著升高,差异明显(P<0.01),外泌体裂解后感染淋巴细胞能力与PCV2病毒无显著差异;PCV2-外泌体可显著抑制淋巴细胞增殖(P<0.01或P<0.05);PCV2-外泌体显著提高淋巴细胞凋亡率。PCV2感染PK-15细胞的外泌体中携带病毒基因,感染淋巴细胞后使细胞增殖降低和细胞凋亡增加。

日粮添加茶籽饼粕对肉鸡屠宰性能、血液生化指标和十二指肠黏膜免疫功能的影响

研究旨在探讨日粮添加茶籽饼粕对肉鸡屠宰性能、血液生化指标和十二指肠黏膜免疫功能的影响。选取1日龄健康AA肉公鸡150只,随机分为5个处理,每个处理5个重复,每个重复6只。对照组饲喂玉米-豆粕型基础日粮,试验组日粮在基础日粮中分别添加0.50%、0.75%和1.00%的茶籽饼粕,同时设置300 mg/kg金霉素对照组,试验期为35 d。测定21和35日龄肉鸡的屠宰性能、血液生化指标和十二指肠黏膜免疫指标。结果表明,与对照组相比,日粮添加0.50%茶籽饼粕对21和35日龄肉鸡屠宰性能没有显著影响(P>0.05),可显著提高21日龄血清白蛋白含量(P<0.05)、十二指肠黏膜中Ig G含量(P<0.01);日粮添加0.50%茶籽饼粕降低35日龄肉鸡十二指肠黏膜中IL-2、TNF-α和SIg A含量(P<0.05或P<0.01),但与金霉素组差异不显著(P>0.05)。提示肉鸡饲养早期可以添加茶籽饼粕,添加剂量应控制在0.50%以下。

动物科学专业《家畜育种学》教学改革与实践

为适应地方高等院校培养应用型人才的需要,对动物科学专业《家畜育种学》课程进行教学改革,寻求适合动物科学专业发展特色的教学方法及模式,提高学生学习能力及学习兴趣,增强学生的实践能力,为学生将来从事本行业工作打好坚实的专业基础。

紫甘薯叶超声波提取工艺优化及其对小鼠肝脏保护作用研究

优化紫甘薯叶的超声波提取工艺,考察提取物对CCl_4诱导急性肝损伤小鼠的保护作用。采用3因素(乙醇浓度、超声功率、超声时间)3水平正交试验,以紫甘薯叶提取物清除羟基自由基能力为考察指标,优化紫甘薯叶超声波提取工艺参数,并用CCl_4建立急性肝损伤模型,考察不同剂量的紫甘薯叶超声波提取物(0.1 g/kg、0.3 g/kg)对肝损伤的影响,探讨紫甘薯叶超声波提取物的肝脏保护作用。结果表明,紫甘薯叶超声波提取最优提取工艺为:乙醇浓度70%,超声功率400 W,超声时间17 min。与模型组相比,紫甘薯叶超声波提取物能降低急性肝损伤小鼠血清中ALT活性及肝组织MDA含量,提高肝组织SOD活性和GSH水平,明显减轻肝损伤小鼠肝组织的损伤程度,表明紫甘薯叶超声波提取物对CCl_4诱导急性肝损伤小鼠具有保护作用。

夏枯草水提物对肝损伤小鼠的保护作用

【目的】研究夏枯草水提物对CCl4所致慢性肝损伤小鼠的保护作用。【方法】制备1g/mL(以生药计)的夏枯草水提物,用不同剂量的夏枯草水提物(0.5,1,2g/kg)每日灌胃小鼠,共5周,设立空白组和模型组,每日灌胃相同体积的生理盐水。除空白组注射植物油外,其余4组小鼠按5mL/kg剂量腹腔注射体积分数1%CCl4植物油溶液,每周2次共3周,建立慢性肝损伤模型。于末次灌胃16h后采血,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性和丙二醛(MDA)浓度,并取肝脏样品制备肝组织匀浆,测定其中乳酸脱氢酶(LDH)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和总抗氧化能力(T-AOC),同时制备肝脏病理切片,观察肝组织病理组织学变化。【结果】与模型组相比,夏枯草水提物可明显降低血清ALT和AST活性、MDA浓度,提高肝组织匀浆中CAT、SOD活性以及T-AOC,降低LDH活性。显微观察结果显示,模型组小鼠肝小叶结构严重破坏,未见肝索和肝窦,肝细胞普遍变性;而夏枯草水提物各剂量组小鼠肝组织病灶逐渐缩小,病灶区部分肝细胞变性现象逐渐好转,肝索、肝窦结构逐渐出现。【结论】夏枯草水提物对CCl4所致慢性肝损伤具有明显的保护作用,其作用机制可能与抗氧化作用有关。

艾叶水煮醇提液对肉兔生长性能的影响

为比较不同剂量艾叶水煮醇提液对肉兔生长性能的影响,采用24只断奶质量相当的哈尔滨白兔,研究不同剂量艾叶水煮醇提液对肉兔采食量、日增质量、料肉比等生长性能的影响。为探讨其作用机理测定了每只肉兔免疫球蛋白Ig G的含量,并比较各组肉兔空肠绒毛形态特征。与对照组相比,剂量为3.0 m L/只的末质量、平均日增质量、料肉比差异均极显著(P<0.01),用药10、20、30 d时免疫球蛋白差异显著(P<0.05),空肠绒毛高度差异显著(P<0.01)。结果表明,每只肉兔每天的艾叶水煮醇提液最佳饲喂剂量为3.0 m L。

胞内劳森菌SYBR GreenⅠreal-time PCR检测方法的建立

【目的】建立检测胞内劳森菌的SYBR GreenⅠreal-time PCR方法,为猪增生性肠炎的准确诊断奠定基础。【方法】针对胞内劳森菌16SrDNA序列设计引物,扩增16SrDNA,构建pT-LI-16S重组质粒。以pT-LI-16S为模板建立检测胞内劳森菌的SYBR GreenⅠreal-time PCR方法,检测其特异性、敏感性和重复性,并用该方法对51份疑似增生性肠炎病例进行检测。【结果】建立的SYBR GreenⅠreal-time PCR方法特异性强,与大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和副猪嗜血杆菌等无交叉反应;在标准质粒含量为1.0×10^2-1.0×10^8拷贝/μL时,质粒含量与循环阈值（Ct）之间具有良好的线性关系（R^2=0.992）,最小可检测到10拷贝/μL的重组质粒;重复性检测显示其批内变异系数小于2%。该方法对粪便及小肠组织中胞内劳森菌的检出率分别为46.9%和84.2%,高于普通PCR的检出率（分别为40.7%和78.9%）。【结论】建立的SYBR GreenⅠreal-time PCR方法特异性强、敏感性高、重复性好,能对胞内劳森菌进行快速检测及定量分析,可用于猪增生性肠炎的诊断。

银杏叶提取物对热应激致鸡心肌细胞氧化损伤的保护作用研究

本试验旨在研究银杏叶提取物(Ginko biloba extract,GBE)对热应激致鸡心肌细胞氧化损伤的保护作用。取12日龄AA肉鸡心脏制备鸡原代心肌细胞,向原代心肌细胞培养板中分别加入0、5、10、50、100、150 mg/mL GBE,CCK-8试剂盒检测心肌细胞存活率;将原代心肌细胞以1×104个/孔接种于96孔板,培养48h,分别加入0、5、10、50、100、200、500、1 000μg/mL GBE,Hoechst 33258检测心肌细胞凋亡率,确定最适GBE浓度。42℃热应激处理(0、0.5、1、2和4h)建立心肌细胞损伤模型,ELISA试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、细胞丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量,以及超氧化物歧化酶(SOD)活性;Western blotting检测Hsp72蛋白表达。结果显示,高浓度GBE具有细胞毒性,50、100、150mg/mL GBE能极显著抑制细胞生长(P<0.01),50μg/mL GBE能够极显著提高细胞增殖率(P<0.01)。热应激后细胞发生凋亡,细胞内MDA、LDH含量增加,SOD活性、GSHPx含量减少,产生氧化损伤;GBE可以降低热应激时细胞LDH和MDA的含量,增加SOD活性和GSH-Px的含量,热应激2、4h,GBE处理效果明显。此外,GBE可增加心肌细胞中Hsp72蛋白的表达。综上所述,GBE能降低热应激状态下心肌细胞的氧化损伤,其机制可能与提高抗氧化酶活性及提高Hsp72的表达有关。