糖尿病大鼠的骨膜反应及染料木素的保护作用

目的探讨糖尿病大鼠骨膜反应的动态演变及染料木素(Gen)的保护作用。方法建立速发型链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)糖尿病大鼠模型,随机分为正常组(CON);糖尿病组(DM);Gen低剂量干预组(Gen Low);Gen高剂量干预组(Gen High)(30 mg·kg-1·d-1)。每天1次,灌胃给药(4.0 mg/kg)10周,每组20只。对各组大鼠骨膜作组织病理学分析及组织计量学测定;利用Van Gieson胶原纤维染色法观察胶原纤维沉积变化;墨汁灌注行边缘微血管密度测定。结果 DM组骨膜厚度等均明显小于CON组(P<0.01);微血管密度增大,但渗透性大。Gen High骨膜厚度明显减少(P<0.01)。结论糖尿病先后出现骨膜水肿、增生、退化等骨膜反应。Gen对糖尿病的骨膜反应具有改善保护作用。

染料木黄酮对糖尿病股骨头生长板早闭及骨质疏松的影响

目的探讨染料木黄酮(genistein,Gen)对糖尿病大鼠股骨头生长板退化及骨质疏松的保护作用。方法建立速发型链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)糖尿病大鼠模型,随机分为正常组(CON)、糖尿病组(DM)、Gen干预组(Gen)。每天1次,灌胃给药(4.0 mg/kg),每组20只。15 w后光镜下作组织病理学分析及组织计量学测定;利用Van Gieson胶原纤维染色法观察胶原纤维沉积变化;ELISA测定血清蛋白聚糖和生化检测各组股骨头组织匀浆的醛糖还原酶(AR)活性。结果 CON组骨小梁粗厚、有完整的成骨细胞区。DM组骨小梁稀疏细薄、细胞核固缩;生长板厚度、生长板细胞柱密度均明显小于对照组(P<0.01);生长板钙化区胶原纤维明显增多;AR活性增大(P<0.01);蛋白聚糖含量明显增加(P<0.01)。Gen组骨小梁排列较紧密;生长板较DM组厚、生长板细胞柱密度大(P<0.01)。AR活性降低(P<0.01),蛋白聚糖下调(P<0.01)。结论染料木黄酮可减轻糖尿病生长板的萎缩退化和骨质疏松变化,防止生长板过早闭合。

CGRP介导束缚应激大鼠骨代谢的实验研究

目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)在慢性束缚应激大鼠骨退化中的作用。方法建立束缚应激大鼠模型,随机分为正常组(CON);束缚7 d组(A组);束缚14 d组(B组);束缚21 d组(C组),每组10只。观察股骨软骨下骨组织结构、细胞形态变化;用特异性放射免疫分析方法测定各组大鼠外周血、观察各组降钙素基因相关肽(CGRP)的改变。免疫组化染色检测各组软骨下骨组织CGRP的阳性表达。结果应激后C组大鼠细胞存活率下降(P﹤0.01)。C组外周血及软骨下骨CGRP的阳性细胞表达数均低于正常对照组,含量明显降低(P<0.01)。结论在长期慢性束缚应激过程中低表达的神经肽导致骨代谢失衡,并显示退化状态。

染料木黄酮通过促进VEGF表达改善去势大鼠骨质疏松的作用机制

目的观察染料木黄酮(Genistein Gen)通过促进VEGF表达改善去势大鼠骨质疏松的作用机制。方法建立绝经大鼠模型,6月龄雌性大鼠40只,随机分为对照组,假手术组、去势组、Gen干预6周组、Gen干预12周组。光镜下观察各组股骨头结构,分析大鼠股骨头空缺骨陷窝数的变化。ELISA检测血管内皮生长因子(VEGF),观察VEGFmRNA原位杂交表达强度并分析。结果与对照组相比,去势组骨密度值下降,Tb.Th明显下降(P<0.05)。干预10周组骨密度值明显升高,Tb.Th明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。糖尿病大鼠股骨头随病程发展骨小梁变稀薄。Gen对去卵巢大鼠血清中VEGF的表达无影响。VEGF mRNA在骨髓腔血管内皮细胞表达上升(P<0.05)。结论 Gen可促进血管内皮细胞增殖,促进血管形成,改善去势大鼠骨质疏松抗骨质疏松倾向。

糖尿病合并去势大鼠骨微结构退化的研究

目的探讨糖尿病合并去势大鼠骨微结构的改变。方法 6月龄雌性大鼠40只,随机分为对照组、假手术组、去势组、糖尿病组和糖尿病合并去势组。6 w和15 w后应用Micro-CT测定股骨检测骨密度和骨微结构;利用Van Gieson胶原纤维染色法观察胶原纤维沉积变化;HE染色分析大鼠股骨头骨小梁厚度(Tb.Th)和骨小梁间距(Tb.Sp)变化。结果与对照组相比,去势6 w和15 w组骨β-胶原降解产物水平和Tb.Sp明显升高,骨密度值和Tb.Th明显下降。去势15 w组骨胶原纤维明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。糖尿病组15 w松质骨β-胶原降解产物水平、胶原纤维和Tb.SP明显升高,骨密度值、胶原纤维和Tb.Th明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。糖尿病合并去势组6 w和15 w组松质骨β-胶原降解产物水平、胶原纤维和Tb.Sp明显升高,骨密度值和Tb.Th明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论糖尿病合并去势早期是以去势为主导致的骨质疏松,后期则由糖尿病缓慢的骨分解加持,骨质疏松继续加重。