3'-Me-DAB诱导大鼠肝癌发生过程中p53及相关基因mRNA的定量分析

背景与目的:有关肝癌中p53基因突变及p53蛋白表达异常已有报道,但其在mRNA水平上的变化尚不清楚。为了解在肝癌发生、发展和预后过程中p53、谷胱甘肽转硫酶P(glutathioneS-transferaseP,GST-P)、甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)和白蛋白mRNA水平的变化,本研究定量分析癌前病变和癌灶中GST-P、AFP和白蛋白mRNA的量。方法:在3'-甲基-4-二甲胺偶氮苯(3'-methyl-4-dimethylaminoazobenzene,3'-Me-DAB)诱发F344大鼠肝癌过程中,用激光捕获显微取样仪(LCM)准确获得大鼠肝脏中微小癌灶或癌前病变组织后,采用LightCyclerTMV3System实时(real-time)RT-PCR定量分析这些病灶组织中mRNA水平。结果:在实验的第6、12和24周,癌前病变组织中p53mRNA量均显著高于正常组织(P≤0.001)。从第6周到第24周,癌前病变组织中p53mRNA逐渐降低(P<0.01)。癌组织中p53mRNA含量高于正常组织,低于同期癌前病变组织(P=0.028和0.0136)。第24周的癌前病变组织或癌组织中细胞核呈p53强染色。各实验期,癌前病变中GST-PmRNA量明显高于正常组织和癌组织(P<0.001)。癌组织中AFPmRNA的表达量显著高于癌前病变组织和正常组织(P<0.001),白蛋白mRNA的表达量显著低于这两种组织(P<0.01)。GST-P和AFP分别在癌前病变组织和癌组织中呈灶状强表达。结论:GST-