暂时性体外胫后动脉旁路术的解剖学研究

目的 为暂时性体外胫后动脉旁路术提供解剖学依据.方法 对5例成人尸体10侧下肢标本的胫后动脉、胫前动脉、腓动脉及其分支进行解剖学观测.结果 本组研究未发现胫后动脉缺如,全长（291±31）mum,显露部下端外径（2.8±0.5） mm.胫后动脉在小腿内侧发出穿支皮动脉存在率100％,平均发出（4±2）支,动脉外径（1.5±0.5） mm,发自中上1/3的穿支皮动脉长度最长（6.5±3.5） cm.结论 胫后动脉及小腿内侧穿支皮动脉在小腿走行恒定,变异率小,管径粗大,易于操作,供区影响小,是暂时性体外胫后动脉旁路手术的理想选择.

吉非替尼对兔膝骨性关节炎的病理特征及相关因子的影响

目的探究吉非替尼对兔膝骨性关节炎的病理特征及相关因子的影响。方法选取雌性新西兰大白兔60只,采用随机分组法将大白兔分为空白对照组、模型组、低剂量吉非替尼组和高剂量吉非替尼组各15只。除15只空白对照组,其他各组大白兔制成骨性关节炎(OA)模型,造模1周后,低剂量吉非替尼组使用4×10-1 mg/kg吉非替尼处理,高剂量吉非替尼组使用8×10-1 mg/kg吉非替尼处理。分别使用蛋白质印记法检测各组大白兔自噬蛋白Beclin1、LC3、p62表达情况;采用免疫荧光检测LC3含量;使用Elisa试剂盒检测大白兔相关炎症因子IL-1β、Il-6、TNF-α水平;检测软骨降解酶MMP-13及Adamts5表达水平;HE染色观察各组大白兔软骨形态。结果相比空白对照组,模型组Beclin1、LC3、p62水平无显著变化(P>0.05),IL-1β、Il-6、TNF-α水平显著升高,MMP-13及Adamts5表达水平显著降低(P>0.05);相比模型组,低剂量吉非替尼组Beclin1、LC3、MMP-13及Adamts5表达水平显著升高,p62、IL-1β、Il-6、TNF-α水平显著降低(P>0.05);相比低剂量吉非替尼组,高剂量吉非替尼组Beclin1、LC3、MMP-13及Adamts5表达水平显著升高,p62、IL-1β、Il-6、TNF-α水平显著降低(P>0.05)。结论吉非替尼可有效治疗骨性关节炎,且在一定剂量范围内呈剂量依赖性,其作用机制与提高自噬能力、降低炎症反应相关。

吉非替尼通过调控表皮生长因子受体影响兔膝骨关节炎软骨损伤作用的机制

目的研究吉非替尼通过调控表皮生长因子受体(EGFR)影响兔膝骨关节炎模型软骨损伤作用机制。方法将30只新西兰兔随机分为假手术组、模型组、吉非替尼组,模型组与吉非替尼组均采用Hulth-Telhag方式制成膝骨关节炎模型,假手术组仅剪开关节全不做任何处理,造模成功后吉非替尼组给予吉非替尼灌胃给药85 mg/kg,1次/天,其他组给予等量的生理盐水,连续给药4周。停药1周后苏木精-伊红(HE)染色观察软骨病理组织情况及Mankin′s评分,原位末端标记法(TUNEL)染色观察软骨细胞凋亡情况,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测兔关节液中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。免疫组化法检测软骨组织中骨代谢标志物Ⅱ型胶原蛋白(Col-Ⅱ)、基质金属蛋白酶13(MMP-13)阳性表达情况,蛋白质印迹法(Western blotting)检测软骨组织中EGFR、丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)蛋白的表达情况。结果与假手术组相比,模型组关节软骨层明显变薄,并且有溃裂和裂隙情况存在,同时软骨柱状排列消失,结构遭到严重损坏,软骨细胞明显减少,与模型组相比,吉非替尼组软骨病理损伤情况更严重,且三组Mankin′s评分[(0.32±0.13)分、(7.38±0.28)分、(8.65±0.27)分]关系为假手术组<模型组<吉非替尼组(均P<0.05);三组间软骨凋亡率[(4.12±0.38)%、(29.83±3.05)%、(37.61±3.72)%]、IL-1β[(541.23±27.28)ng/L、(738.61±68.37)ng/L、(825.42±75.19)ng/L]、TNF-α[(49.31±7.28)ng/L、(82.62±25.42)ng/L、(95.05±32.56)ng/L]水平之间的关系均为假手术组<模型组<吉非替尼组(均P<0.05);COL-Ⅱ阳性表达率间的关系为吉非替尼组<模型组<假手术组(均P<0.05),MMP-13阳性表达率间的关系为假手术组<模型组<吉非替尼组(均P<0.05);蛋白质印迹法结果显示,吉非替尼组中EGFR蛋白磷酸化水平显著低于模型组,模型组又显著低于假手术组,同时吉非替尼组中p38MAPK蛋白磷酸化水平显著高于模型组,模型组又显著高于假手术组(均P<0.05)。结论吉非替尼通过抑制EGFR磷酸化活化p38MAPK信号途径,促进MMP-13蛋白表达,降解COL-Ⅱ,同时促进软骨处炎症细胞因子水平,从而加重软骨损伤。

长链非编码前列腺癌相关转录因子6靶向微小RNA-139-3p对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)前列腺癌相关转录因子6(PCAT6)对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响和分子机制。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测20例骨肉瘤组织和与其对应的癌旁组织中PCAT6和微小RNA-139-3p(miR-139-3p)的表达水平。双荧光素酶报告基因实验和RT-qPCR验证PCAT6对miR-139-3p的靶向调控关系。将PCAT6小干扰RNA(si-PCAT6)、miR-139-3p模拟物(miR-139-3p mimics)分别转染骨肉瘤细胞SAOS2,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测SAOS2细胞增殖活力,流式细胞术检测SAOS2细胞凋亡,蛋白质印迹法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、细胞周期素D1(Cyclin D1)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和P21、的表达水平。将si-PCAT6和miR-139-3p抑制物(anti-miR-139-3p)共转染至SAOS2细胞,采用上述方法检测细胞增殖、迁移侵袭能力以及凋亡变化。结果与瘤旁组织相比,骨肉瘤组织中PCAT6的表达水平[(2.76±0.27)比(1.01±0.09)]显著升高,miR-139-3p的表达水平[(0.51±0.05)比(1.00±0.08)]显著降低(P<0.05)。miR-139-3p是PCAT6的靶基因,PCAT6靶向负性调控miR-139-3p表达。抑制PCAT6表达或过表达miR-139-3p均可下调SAOS2细胞CyclinD1和Bcl-2蛋白表达,上调p21和Bax蛋白表达,降低细胞活力,促进细胞凋亡(P<0.05)。抑制miR-139-3p表达可逆转si-PCAT6对骨肉瘤SAOS2细胞增殖抑制和凋亡的影响(P<0.05)。结论lncRNA PCAT6在骨肉瘤组织中表达上调,抑制miR-139-3p通过靶向miR-139-3p抑制骨肉瘤细胞增殖,诱导骨肉瘤细胞凋亡。

miR-1275/SIRT2信号轴在骨关节炎软骨细胞增殖凋亡中的作用

目的:探讨微小RNA(miR)-1275对骨关节炎(OA)软骨细胞增殖凋亡的影响及其机制。方法:采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测人正常软骨细胞和OA软骨细胞中miR-1275的表达情况。将体外培养的OA软骨细胞分为模拟物对照组、模拟物组、抑制剂对照组和抑制剂组,将miR-1275模拟物、miR-1275抑制剂及其阴性对照转染至OA软骨细胞,采用qPCR检测miR-1275的表达水平,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting检测沉默信息调节因子2(SIRT2)、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白的表达,生物信息学软件预测、双荧光素酶报告基因实验检验miR-1275和SIRT2的靶向关系。结果:与人正常软骨细胞比较,人OA软骨细胞中miR-1275表达水平明显升高(P<0.05)。与模拟物对照组比较,模拟物组细胞中miR-1275表达水平和细胞凋亡率、Bax、CleavedCaspase-3蛋白水平明显升高,细胞增殖活力与SIRT2蛋白水平明显降低(P<0.05);而抑制剂组细胞中miR-1275表达水平和细胞凋亡率、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白水平明显低于抑制剂对照组,细胞增殖活力与中SIRT2蛋白水平明显高于抑制剂对照组(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示SIRT2是miR-1275的靶基因。结论:miR-1275在人OA软骨细胞中高表达,并发挥着抑制软骨细胞增殖和促进细胞凋亡的作用,其作用机制可能与靶向调控SIRT2表达有关。

双腕离断再植成功1例

1病例报告患者,男,51岁,主因机器割伤致双腕离断并左足出血1.5 h急诊入院(图1~2)。查体:左手自腕部完全离断,断端不齐,骨外露,创面污染重;右手自前臂远端离断,仅少许皮肤软组织相连,创缘不齐,挫伤污染重,离断肢体苍白,无血运,左足内侧见约8 cm伤口,创缘不齐,挫伤污染重,出血活跃,感觉及运动查体不配合,X线见图3~4。