miR-152和miR-448靶向于Rictor并抑制结直肠癌细胞增殖

目的筛选靶向于Rictor mRNA表达的miRNAs并研究其在结直肠癌中的调控作用。方法采用软件预测筛选可能靶向于Rictor mRNA表达的miRNAs,用所预测的miRNAs转染KM12SM细胞株,利用qRT-qPCR和Western blotting进一步确定对Rictor表达具显著调控作用的miRNAs。在此基础上,利用双荧光素酶报告系统进一步确定可结合到Rictor mRNA的3'UTR区对其转录后进行调节的miRNAs。利用细胞存活检测和克隆形成实验进一步确证所筛选miRNAs对细胞存活和克隆形成的影响。结果 miR-152和miR-448对Rictor表达均具显著抑制作用(P<0.01,P<0.05),且miR-152和miR-448可结合到Rictor mRNA的3'UTR区,显著抑制荧光素酶活性(P<0.01,P<0.05),对其进行转录后进行调节,miR-152和miR-448过表达均可显著抑制结直肠癌细胞株KM12SM的生长和增殖。结论 miR-152和miR-448可能通过靶向于Rictor mRNA进而抑制其蛋白表达,最终负调控结直肠癌的生长和克隆形成。