抗猪附红细胞体药物体内筛选模型的建立与应用

为实现抗猪附红细胞体药物的高通量筛选,拟建立小鼠最优感染模型及应用其进行药物敏感性研究。采用三因素三水平的正交试验法,通过对感染率、菌血症峰期及临床症状考察,确定最佳感染方法、感染途径和接种剂量。而后应用感染模型对土霉素、四环素、贝尼尔、青蒿素、咪唑苯脲等10种抗生素和抗原虫药进行药物敏感性测试。方差分析结果显示,以0.1mL剂量尾静脉接种猪EH提纯液,能够使处于免疫抑制状态的昆明小鼠在3d时达到菌血症峰期。药物敏感性测试反映贝尼尔、咪唑苯脲和青蒿素对猪附红细胞体作用最强。因此,用此模型可进行体内抗猪附红细胞体药物的高通量筛选。

鸡源、猪源大肠杆菌氟苯尼考耐药基因flor的克隆与序列分析

为监测大肠杆菌的耐药性,了解不同动物源大肠杆菌氟苯尼考耐药基因flor的差异及其对大肠杆菌耐药性影响,对从保定及其周边地区分离的23株鸡源、14株猪源大肠杆菌进行耐药性测定,并对其氟苯尼考耐药基因flor进行了变异性分析。结果表明,氟苯尼考耐药菌株检出率分别为62%和58%,不同动物源flor基因同源性为99.8%,与GenBank报道的flor基因比较存在3个氨基酸替代,鸡源flor基因在开放阅读框的第439,479,683等位存在点突变,猪源flor基因在开放阅读框的第439,683,1100等位出现点突变。

猪源大肠杆菌耐氟苯尼考基因的检测及序列分析

本研究对从保定及其周边地区分离的14株猪源大肠杆菌进行了氟苯尼考耐药性测定,并对氟苯尼考耐药基因flor进行了克隆与测序,构建了具有氟苯尼考抗性的基因工程菌R-JMl09。结果表明,14株猪源大肠杆菌中有8株对氟苯尼考耐药,其MIC均大于128 mg/L,克隆的flor基因与GenBank已报道的flor基因序列只存在3个氨基酸替代(147 V→M,228 F→Y,367 G→D)。转入抗性质粒的基因工程菌R-JM l09对氟苯尼考产生耐药。

甲砜霉素羟丙基-β-环糊精包合物的制备与鉴定

采用水溶液搅拌法制备甲砜霉素-羟丙基-β-环糊精包合物,通过正交试验优化工艺。得到包合反应最佳条件为:包合温度为50℃,包合时间为1 h,羟丙基-β-环糊精与甲砜霉素摩尔比为1∶1。并经X-线衍射、红外光谱分析法进行验证,证明甲砜霉素与羟丙基-β-环糊精已形成包合物。溶解度试验证明采用水溶液搅拌法形成包合物溶解度增大了约13倍,显著提高了甲砜霉素的溶解度。

硫酸头孢喹肟乳膏剂临床疗效试验

为更好地防治奶牛乳房炎,河北农业大学动物科技学院自主研发了硫酸头孢喹肟乳膏剂,并对其临床疗效进行了考察。对河北4个地区临床分离的乳房炎致病菌进行鉴定,而后使用自制的乳膏进行体外抑菌试验和临床疗效试验。结果表明,分离的病原菌主要是链球菌、葡萄球菌和大肠杆菌,共占总菌株的95.11%;乳膏组对临床分离的致病菌抑菌效果优于青、链霉素对照组;乳膏在4个地区的治愈率和有效率均较高,分别为93.68%和98.95%;而青、链霉素对照组则分别只有57.84%,84.31%。因此,自主研发的硫酸头孢喹肟乳膏剂用于治疗临床奶牛乳房炎效果理想,为下一步的推广奠定良好的基础。

硫酸头孢喹肟乳膏剂的质量控制

对硫酸头孢喹肟乳膏剂进行质量控制。取处方对应量的乳化剂水相和油相,在水浴分别加热至80℃使其溶化,而后将两相溶液混合,待温度降低至40℃时,加入硫酸头孢喹肟溶液,冷却制得乳膏剂,对其外观性状、药物含量、稳定性、刺激性等各方面进行质量控制。结果表明:硫酸头孢喹肟乳膏剂外观性状及稳定性均较优,无皮肤刺激性,测得其含量为99.40%,平均回收率为98.72%。本乳膏剂处方工艺设计合理,质量控制方法可行。

硫酸头孢喹肟混悬剂的质量检验及体外抑菌实验

对自制的硫酸头孢喹肟混悬剂进行质量检验和体外抑菌实验。按照筛选出的配方,应用分散法制备硫酸头孢喹肟混悬型制剂,检验混悬剂的质量并针对临床分离的奶牛乳房炎混合菌株进行体外抑菌实验。结果表明:制得的硫酸头孢喹肟混悬剂符合国家质量标准要求,体外抑菌实验效果明显。