血浆D-二聚体和总同型半胱氨酸水平与不同分型急性脑梗死的关系研究

目的观察急性脑梗死(acute cerebral infarction,ACI)患者血浆D-二聚体(D-dimer,DD)和总同型半胱氨酸(totalhomocysteine,tHcy)水平变化,探讨其在ACI病因学诊断中的临床意义。方法选取2016年4月至2019年4月本院神经内科住院的120例ACI患者纳入ACI组,根据TOAST(The Trial of Org 10172 in Acute Stroke Treatment)病因分型标准将其分为大动脉粥样硬化(large-artery atherosclerosis,LAA)型、小动脉闭塞(small-artery occlusion,SAO)型、心源性栓塞(cardioembolism,CE)型、其他明确病因(stroke of other determined cause,OC)型、不明原因(stroke of undetermined cause,UND)型;另选取本院同期50例健康体检者纳入对照组。检测两组研究对象血浆DD和tHcy水平,并分析其在ACI组和对照组以及不同分型ACI之间的差异。结果 ACI组患者血浆DD和tHcy水平均显著高于对照组(均P < 0.05)。Logistic回归分析显示,血浆DD和tHcy水平均与ACI具有相关性(均P < 0.05)。LAA型、CE型、SAO型患者血浆DD和tHcy水平均显著高于对照组(均P < 0.05),其中CE型患者DD水平显著高于其他分型患者(均P < 0.05),LAA型患者tHcy水平显著高于其他分型患者(均P < 0.05),由于OC型和UND型患者数较少,故未进行分析。Logistic回归分析显示,DD和tHcy水平均与TOAST分型具有相关性(均P < 0.05),且DD水平与CE型的相关性最强(OR = 7.660,95%CI :4.043 ~ 14.512),tHcy水平与LAA型的相关性最强(OR = 5.078,95%CI :2.939 ~ 8.774)。结论血浆DD和tHcy水平可能是导致ACI发生的独立危险因素,且其在不同TOAST分型ACI患者中的表达水平存在差异,CE型患者DD水平升高最明显,LAA型患者tHcy水平升高最明显,这对ACI的病因学诊断具有重要的提示作用。

重组腺病毒缺氧诱导因子-1α体外靶向性转染大鼠缺氧脑微血管内皮细胞的研究

目的探讨重组腺病毒缺氧诱导因子-1α(AdHIF-α1)在大鼠缺氧脑微血管内皮细胞(BMEC)中的转染情况,为AdHIF-1α治疗缺氧的BMEC提供理论基础。方法建立大鼠BMEC的体外分离培养及鉴定,并用含100μmol/L二氯化钴(CoCl2)的维持培养液培养,制成BMEC缺氧模型;然后将AdHIF-1α转染入缺氧的BMEC中,在荧光显微镜下观察荧光蛋白的转染情况。结果AdHIF-lα转染入缺氧的BMEC后,分别在12 h、24 h、48 h、72 h于荧光显微镜下观察AdHIF-lα的转染情况,结果显示,12 h开始出现少许荧光,光密度值(A值)0.13±0.01;24 h荧光表达有所增强,A值0.46±0.03;48 h荧光表达最明显,A值0.97±0.05;72 h可见荧光减弱,A值0.38±0.02;不同时间点比较差异有统计学意义,两两比较结果显示,相邻时间点A值比较差异均有统计学意义(q=25.88、40.00、46.28,均P<0.01)。结论重组腺病毒缺氧诱导因子-1α能成功转染至缺氧的BMEC。

节律基因NPAS2在肺腺癌中的临床意义

目的探究NPAS2基因在肺腺癌(LUAD)中的表达及其与相关临床参数的关联,分析其对患者总生存期(OS)的影响及在LUAD预后中的预测价值。方法从癌症基因组图谱数据库(TCGA)中下载LUAD转录组测序及临床资料数据,分析LUAD肿瘤组织与正常肺组织中NPAS2的表达差异。收集LUAD患者肿瘤组织及正常肺组织应用蛋白免疫印迹法(WB)检测NPAS2蛋白表达,并分析TCGA数据库中NPAS2表达与LUAD患者肿瘤分期及OS的关联。通过基因集富集分析(GSEA)挖掘NPAS2潜在的致癌机制。结果TCGA差异分析显示NPAS2 mRNA在LUAD肿瘤组织1.83(1.01,3.01)中的表达水平高于正常肺组织,0.74(0.49,1.15),差异有统计学意义(Z=7.21,P<0.05);配对分析显示NPAS2 mRNA在LUAD组织1.82(1.37,3.08)中的表达也高于配对的正常肺组织0.76(0.51,1.16),差异有统计学意义(Z=5.63,P<0.05)。WB结果显示,NPAS2蛋白在LUAD 0.62(0.40,1.36)中的表达水平高于正常肺组织0.14(0.08,0.58),差异有统计学意义(Z=2.71,P<0.05)。在亚组分析中,与T1~2组相比,T3~4组中NPAS2 mRNA高表达的比例更高1.81(1.01,2.92)比2.10(1.29,3.71)(Z=2.12,P<0.05);在预后分析中,NPAS2高表达组患者的预后相对较差,与NPAS2 mRNA低表达组比较差异有统计学意义(χ^(2)=9.66,P<0.05),Kaplan-Meier plotter数据库显示NPAS2 mRNA高表达LUAD患者预后更差(HR=2.19,P<0.05),Cox比例风险模型进行多因素分析表明更高的TNM分期(HR=2.12,P<0.05)及NPAS2 mRNA高表达(HR=1.21,P<0.05)预后更差,与NPAS2低表达患者相比,NPAS2高表达患者OS更短(P<0.05);GSEA基因富集结果显示NPAS2高表达时,肿瘤、小细胞肺癌、细胞外基质受体相互作用、凋亡、白细胞跨内皮迁移、ERBB等通路相关基因显著富集。结论NPAS2在LUAD中高表达,并与肿瘤局部浸润和OS相关,可以作为LUAD独立的预后预测因子。