昌黎产区酒类酒球菌（Oenococcus oeni）的遗传多样性及系统发育分析

对我国昌黎产区5家具有代表性酒庄进行酒类酒球菌(Oenococcus oeni)菌株的分离,采用Species-specific聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴定O. oeni,运用荧光标记扩增片段长度多态性(amplified fragment length polymorphism,AFLP)技术进行分子遗传学研究。结果表明:在分离具有表型差异的226株葡萄酒乳酸菌中,通过Species-specific PCR,鉴定出222株O. oeni。对分离的O. oeni菌株进行荧光标记AFLP分析,结果显示,经筛选的荧光标记选择性扩增引物可将222株O. oeni分为221个AFLP遗传型,其相似性系数在74%~98%。在81.7%的相似性水平上,分离菌株存在2个主要的进化类群。分离自同一酒庄的O. oeni菌株种群形成了独特的簇群结构,呈现出遗传发育和分离起源的典型特异性关系,证实了O. oeni资源是葡萄酒"风土"的重要组成之一。本研究证实了昌黎产区存在丰富的O. oeni资源,且不同酒庄分离的O. oeni菌株种群呈现出遗传特异性,这为开发我国具有地域特色的O. oeni资源提供了技术和理论支持。

酒酒球菌(Oenococcus oeni)产胞外聚合物培养基的优化及其抗冷冻干燥性能评价

为了研究酒酒球菌( Oenococcus oeni )产胞外聚合物(extracellular polymeric substances, EPS)在冷冻干燥过程中的保护性能,通过优化培养基提高EPS产量,并通过EPS对细菌冷冻干燥存活率的影响以及观察冷冻干燥过程中酒酒球菌内部及外表面的变化,评价其抗冷冻干燥的性能。正交试验优化可得,在初始pH值4.8、蛋白胨含量20 g/L、葡萄糖含量15 g/L的条件下,能产119.7 mg/100 mL酒酒球菌EPS。EPS作为冷冻干燥保护剂时细菌冷冻干燥后的存活率为70.97%,高于其他常规保护剂,扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)和透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)的图像表明添加冷冻干燥保护剂的实验组细胞形态更加完整,说明EPS有明显的冷冻干燥保护作用。该研究初步探究了酒酒球菌EPS冷冻干燥保护的机制,并为EPS在冷冻干燥保护剂中的应用提供理论基础。