糖尿病神经干细胞糖脂损伤模型的建立及ZCL278对其的影响

目的拟建立一种模拟高脂高糖引起的小鼠胚胎海马颗粒下区神经干细胞(neural stem cell,NSC)损伤的体外模型,探索CDC42在高脂高糖相关NSC损伤中的作用。方法培养胚胎小鼠NSC,利用Sox2与Nestin免疫荧光染色明确培养细胞的干性与纯度。采用不同浓度葡萄糖及氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)分别培养和共培养神经干细胞,利用CCK8检测细胞活力,明确影响NSCs增殖的适宜糖、脂浓度,并采用高脂高糖共培养(HHM)或普通培养基(RM),CCK8法检测其对NSCs增殖、划痕实验及Transwell迁移实验检测其对NSCs迁移能力的影响。提取10周龄db/db动物,db+动物海马组织匀浆与不同条件体外培养NSC的蛋白匀浆,Western blot法检测CDC42表达量。并在体外实验中采用10μmol/L ZCL278(CDC42特异性抑制剂)与高脂高糖共培养,检测干预CDC42对高脂高糖引起的NSC增殖障碍的治疗作用。结果10~40 mmol/L的葡萄糖与25~35μg/mL的ox-LDL均可造成体外培养神经干细胞的增殖障碍。最终选定10 mmol/L葡萄糖+25μmol/L oxLDL作为HHM相关NSC损伤的模型,该浓度可在72 h内持续抑制神经干细胞的增殖,划痕实验与Transwell迁移实验也显示,同一浓度的糖脂损伤显著抑制了NSC的迁移能力。糖尿病小鼠海马及NSC内CDC42表达增加。在体外使用CDC42的特异性抑制剂ZCL278可升高HHM培养的NSCss细胞活力,提示其可部分逆转HHM相关NSCs增殖障碍。结论10 mmol/L葡萄糖+25 mmol/L ox-LDL可模拟糖尿病动物神经干细胞的糖脂损伤,影响神经干细胞的增殖与迁移;CDC42的高表达参与了高脂高糖引起的神经干细胞增殖障碍;体外给予CDC42的特异性抑制剂ZCL278可部分逆转高脂高糖引起的神经干细胞增殖障碍。本研究结果可为糖脂代谢异常相关的NSC增殖迁移障碍提供体外模型,CDC42特异性抑制剂ZCL278可部分逆转高脂高糖相关的NSC增殖障碍。

动脉血管离子通道在失重致心血管功能失调中的研究进展

失重可致心血管功能失调,表现为立位耐力不良和运动能力下降。在失重环境所致体液头向分布的影响下,沿动脉血管跨壁压力的重新分布可促使血管重塑。动脉血管离子通道是调节动脉血管收缩或血管舒张的关键因素。失重及模拟失重,对动脉上电压依赖性钙离子通道、大电导钙离子激活钾离子通道、电压依赖性钾离子通道和钙释放离子通道的功能及表达产生影响,且这种影响在不同部位的动脉表现特征也不尽相同。本文通过综述动脉血管离子通道在失重致心血管功能失调中的研究进展,为进一步开展航天医学防护研究提供理论参考。

病毒感染调控巨噬细胞极化分子机制的研究进展

固有免疫是机体抵御病原微生物入侵的第一道防线。巨噬细胞(macrophages, Mφ)在机体中分布广泛并具有十分活跃的生物学功能,在宿主抗病毒固有免疫应答过程中发挥重要作用。既往研究集中于Mφ的吞噬功能及抗原提呈作用,而近年来研究发现,不同活化模式的Mφ对病毒感染后机体的炎症反应具有双重调控作用,Mφ的极化状态与病毒感染性疾病的发生和转归关系密切。病毒感染急性期,Mφ向M1方向极化,M1型Mφ可促进炎症反应,辅助机体清除病原体,但其过度活化可引起细胞因子风暴,加重组织的免疫病理损伤;随着病毒感染相关疾病的进展,Mφ向M2方向极化,M2型Mφ可通过分泌多种抑炎因子发挥免疫调控作用,参与组织修复,亦与感染慢性化密切相关。不同种类的病毒感染机体后可以诱导Mφ向不同方向极化,但其具体调控机制目前尚不清楚。现就Mφ极化在病毒感染过程中的作用及其调控机制作一概述,为相关疾病的发病机制研究奠定理论基础,并为治疗策略的研发提供新的思路。

催产素发挥镇痛作用的机制

催产素（oxytocin,OXT）,又称缩宫素,主要由下丘脑室旁核（paraventricular nucleus,PVN）和视上核（supraoptic nucleus,SON）的神经细胞合成,可经下丘脑-垂体轴的神经纤维输送到垂体后叶,然后分泌释放入血液,也可通过神经纤维分泌到神经系统的其它部位。OXT广泛分布在外周组织（如子宫、胎盘、乳腺等）和中枢神经系统（如中脑导水管周围灰质、中缝背核、脊髓等）中.

奥沙利铂对大鼠下丘脑及外周血中Ghrelin表达的影响

目的:研究化疗药物奥沙利铂对大鼠下丘脑中神经肽Ghrelin表达水平的影响。方法:SD大鼠分为对照组和奥沙利铂处理组,观察各组大鼠摄食量变化。real-timeRT-PCR检测各组大鼠下丘脑中GhrelinmRNA表达变化,免疫组化和WesternBlot方法检测大鼠下丘脑中Ghrelin蛋白的表达水平。结果:奥沙利铂化疗后,大鼠第2~4d摄食量减少。奥沙利铂化疗后大鼠血浆酰化Ghrelin浓度显著下降。化疗后第3d大鼠血浆酰化ghrelin为52.5±2.1pmol/l,显著低于NS对照组86.5±4.7pmol/l(P<0.05)。奥沙利铂化疗后大鼠下丘脑内GhrelinmRNA及蛋白表达水平在第1、3d和5d均下降,其中第3d下降最显著。结论:奥沙利铂化疗可降低大鼠食欲,降低Ghrelin在下丘脑中的表达。

负载地塞米松DNA水凝胶改善镁周围成骨微环境研究

目的研究负载地塞米松(dexamethasone,Dex)DNA水凝胶对镁周围成骨微环境的影响。方法研究于2019年5月至2021年5月在军事口腔医学国家重点实验室进行。将108个阳极氧化处理后的镁片按照不同表面处理方式随机分为3组,每组36个,分别记为空白对照组(未涂布任何物质)、水凝胶组(涂布DNA水凝胶)、Dex水凝胶组(涂布负载Dex的DNA水凝胶)。扫描电镜观察每组试样表面结构,同时检测培养液浸泡试样后pH值的变化及镁离子累积释放浓度;将小鼠巨噬细胞RAW264.7与试样间接共培养,应用CCK-8法测定细胞活力;应用实时荧光定量PCR检测巨噬细胞极化相关基因精氨酸酶-1(arginase-1,Arg-1)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、诱导型一氧化氮合成酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达,再利用流式细胞术检测极化标志物CD206和趋化因子受体7(chemokine receptor 7,CCR7)相对荧光强度;最后应用ELISA检测白介素-10(interleukin-10,IL-10)和TNF-α的分泌量。结果扫描电镜观察显示,空白对照组表面呈现较为均匀致密的氧化层,水凝胶组和Dex水凝胶组表面被网状结构的水凝胶涂层所覆盖。水凝胶组和Dex水凝胶组p H值的升高幅度及镁离子累积释放浓度均小于空白对照组。细胞活力检测结果显示,水凝胶组及Dex水凝胶组的光密度值均高于空白对照组(均P<0.05)。实时荧光定量PCR和流式细胞术检测结果显示,Dex水凝胶组M2极化相关标志物Arg-1、TGF-β、CD206表达均高于空白对照组和水凝胶组,而水凝胶组仅TGF-β、CD206表达高于空白对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);Dex水凝胶组M1极化相关标志物iNOS、TNF-α、CCR7表达均低于空白对照组,其中iNOS、CCR7的表达还低于水凝胶组,而水凝胶组仅TNF-α表达低于空白对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。ELISA检测发现水凝胶组和Dex水凝胶组相比空白对照组IL-10分泌量均增加,且炎症因子TNF-α的分泌量均减少;Dex水凝胶组相比水凝胶组IL-10的分泌量增加,TNF-α的分泌量减少,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论负载Dex的DNA水凝胶涂层镁片可能会诱导其周围的巨噬细胞发生M2极化,改善成骨微环境。