生物信息学分析神经元钙蛋白1(CALN1)在胶质瘤中表达的临床意义及其与免疫细胞浸润的相关性

目的 采用生物信息学方法分析神经元钙蛋白1(CALN1)在胶质瘤中表达的临床意义及其在肿瘤免疫细胞浸润中的作用。方法 利用仙桃学术在线分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库中CALN1基因在胶质瘤中的表达情况,采用Kaplan-Meier生存分析法评价其预后价值,利用受试者工作特征(ROC)曲线评价其临床诊断效能,采用基因集富集分析(GSEA)探究CALN1在胶质瘤中的潜在作用机制,探讨CALN1 mRNA与胶质瘤免疫细胞浸润的关系。结果 胶质瘤中CALN1表达显著降低,且其表达水平与肿瘤分级负相关。与对照组比,CALN1在异柠檬酸脱氢酶突变型和染色体1p/19q共缺失胶质瘤中表达水平显著升高。CALN1低表达的胶质瘤患者预后较差,整体存活率、疾病相关存活率和无进展间隔期显著降低。ROC曲线分析显示CALN1表达水平具有较好的临床诊断价值。GSEA基因富集结果提示CALN1表达水平与有丝分裂和中性粒细胞脱颗粒负相关。免疫浸润分析显示CALN1低表达组中2型辅助T(Th2)细胞、巨噬细胞和中性粒细胞显著升高。结论 胶质瘤中CALN1表达水平与预后正相关,其表达异常降低可导致具有促肿瘤作用的免疫细胞浸润。CALN1可作为胶质瘤预后判断的潜在标志物和治疗靶点。

嵌合抗原受体巨噬细胞(CAR-M)疗法在炎症相关抑郁症治疗中的应用

经典的嵌合抗原受体巨噬细胞(CAR-M)发挥促炎作用实现抗肿瘤免疫,但是通过改造CAR的结构设计也可以使其有类似M2的抗炎功能,从而治疗炎症性疾病。目前靶向M1型小胶质细胞的CAR-M疗法能够有效减少神经炎症,用于治疗炎症相关抑郁症。随着关于CAR-M抗炎作用的研究不断发展,CAR-M细胞疗法为治疗炎症相关疾病提供了新的思路。

组蛋白H2A去泛素化酶BAP1对恶性胶质瘤细胞发生发展的作用及临床应用价值研究

目的探索乳腺癌/卵巢癌易感基因1相关蛋白1(breast/ovarian cancer susceptibility gene 1 associated protein 1,BAP1)对人源恶性胶质瘤发生、发展的作用与BAP1作为恶性胶质瘤临床诊断标志物的可行性。方法基于基因表达综合数据库(gene expression omnibus,GEO)的子数据集GSE4290,GSE90598,分析BAP1在正常组织及胶质瘤组织中的差异性表达情况;受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析BAP1对恶性胶质瘤的早期诊断价值;选取自主收集的非配对28例恶性胶质瘤患者的原发灶组织、5例颅脑外伤患者内减压术切除的非瘤脑组织,采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测BAP1的表达水平;利用靶向BAP1的特异性小干扰RNAs(small interfering RNAs,siRNAs)瞬时转染U251细胞系,进一步检测其干涉效率;基于流式细胞仪分析BAP1下调的U251细胞系,其细胞周期、凋亡的变化情况。结果生物信息学结果显示,BAP1在恶性胶质瘤组织中的表达水平均低于正常脑组织(GSE4290:1209±18.49 vs 1476±53.90;GSE90598:5.19±0.10 vs 5.65±0.21),差异具有统计学意义(t=5.115,2.267,均P<0.05)。ROC曲线显示,BAP1可高效区分恶性胶质瘤组织与正常脑组织(GSE4290:AUC=0.78;GSE90598:AUC=0.75,均P<0.05)。临床标本结果显示,BAP1在恶性胶质瘤原发灶组织中的表达水平显著低于非瘤脑组织(0.27±0.04 vs 1.06±0.07),差异具有统计学意义(t=10.22,P<0.001)。在U251细胞系中下调BAP1的表达,其细胞周期中S期细胞比例明显增多,由17.59%分别增至27.21%(siBAP1-1)和25.79%(siBAP1-2),差异具有统计学意义(t=6.576,6.642,均P<0.01),而细胞凋亡水平则有所下降,由10.17%分别降至2.70%(siBAP-1)和3.00%(siBAP-2),差异具有统计学意义(t=10.31,9.428,均P<0.01)。结论组蛋白H2A去泛素化酶BAP1能够通过抑制恶性胶质瘤细胞周期快速进展并促进其凋亡,进而发挥肿瘤抑癌基因的功能,可作为潜在的恶性胶质瘤临床诊断标志物。

“混合式”教学在医学免疫学教学中的应用探析

医学免疫学是基础医学的一个重要分支,是联系基础研究与临床转化的关键纽带。传统医学免疫学的授课模式并不能很好地解决其理论概念抽象、逻辑性强与学习难度较高等教学难点,导致学生在课程学习过程中始终处于相对枯燥、自主性薄弱和效率不高的消极状态。随着以“互联网”为核心的现代信息技术的高速发展与广泛普及,高等医学教育正逐渐向“线上+线下”相结合的“混合式”教学模式转型。“混合式”教学突出“以学生为中心”的核心理念,充分融合现代信息技术;在向学生传授基本专业知识的同时,着力培养学生的自主学习能力,对医学免疫学教学质量的提高和学生学习技能、习惯、态度及社交能力等的养成均大有裨益。本文对“混合式”医学免疫学课程教学的可行性、必要性和开展现状进行了探讨,阐述了“混合式”医学免疫学教学的核心理念、课程目标、实践应用、潜在问题与优化建议,以期为“混合式”医学免疫学的教学研究和深入实践提供必要借鉴。

自身炎症性疾病的遗传和表观遗传调控

自身炎症性疾病(AID)具有反复发热的共性,能够产生过量高反应性固有免疫细胞,引起全身或器官特异性的炎症。AID的主要诱因来自骨髓的固有免疫细胞过度产生大量炎症因子,但其具体发病机制仍不明确。不仅已发现的遗传因素参与调控AID,表观遗传调控机制(包括甲基化、组蛋白修饰、非编码调控、染色质重塑)也参与调节疾病的发生。我们主要总结了遗传和表观遗传调控机制在AID发生和发展中的作用与意义。

将生殖医学实践融入医学遗传学教学初探

医学遗传学是21世纪生命科学的带头学科之一,随着医学遗传学研究的深入,一些新的研究成果也应用于临床,推动着生殖医学诊疗水平的提高。本文就如何将生殖医学实践融入医学遗传学教学,以21三体综合征与无创产前检测技术、亨廷顿舞蹈病与产前遗传学诊断以及线粒体遗传病与"三亲婴儿"为例进行了探讨,以期真正发挥医学遗传学在基础课程和临床实践之间的桥梁作用。

Notch通过抑制信号调节蛋白α(SIRPα)调控巨噬细胞M1型极化作用

目的研究缺刻基因(Notch)信号通过信号调节蛋白α(SIRPα)调控巨噬细胞极化的作用。方法将小鼠RAW264.7细胞分别给予脂多糖(LPS)与γ干扰素(IFN-γ)或者白细胞介素4(IL-4)刺激极化为M1/M2后,通过实时定量PCR检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-12、IL-10、甘露糖受体(MR)及SIRPα的mRNA水平,Western blot法检测SIRPα的蛋白表达水平;通过基因转染方法激活Notch信号或利用γ分泌酶抑制剂(GSI)阻断Notch信号后,Western blot法检测巨噬细胞SIRPα表达变化;利用小鼠基因组DNA扩增SIRPα启动子区(-2615-+123),通过报告基因实验观察Notch信号激活对SIRPα的调控作用。结果M1型巨噬细胞SIRPα表达降低,M2型巨噬细胞SIRPα表达增加;Notch信号激活可抑制巨噬细胞SIRPα的表达,而GSI抑制Notch信号可增加巨噬细胞上SIRPα的表达;进一步报告基因实验证实Notch激活可显著抑制由SIRPα启动子片段驱动的荧光素酶表达。结论Notch信号通过抑制SIRPα表达参与调控巨噬细胞M1型极化作用。

长链非编码RNA对神经干细胞的调控作用及其机制

长链非编码RNA(LncRNA)作为一种重要的细胞功能调控因子引起越来越多广泛的关注。它是一种长度在200—100000 nt之间的RNA分子,位于细胞核或细胞质内,不编码蛋白质。在基因组转录产物中,lncRNA所占数量比例远远超过编码RNA的比例,与DNA、RNA、蛋白质相互作用参与细胞内多种调控过程,在生命活动调控网络中有极其重要的作用。IncRNA目前是遗传学研究的热点之一。

专题文献精读结合实验设计教学新模式的探索与应用

目的探讨专题文献精读结合实验设计教学新模式在微生物遗传学中的教学效果和推广应用。方法教学中引入了专题文献精读结合实验设计的新教学模式,并对此教学模式从专题文献选择、教学组织过程、实验设计实施、教学效果分析等方面进行了全面的探讨和评估。结果这一教学模式显著提高了学生的文献阅读能力和自学能力,课程满意度高达100%。结论该教学模式的运用有机地将经典理论知识、前沿进展和实际应用相结合,极大地提升了教学效果,激发了学生的学习热情,加强科学素养的养成。同时,也为相关学科教学的改革与探索提供了宝贵的经验和实践基础。

实体瘤的嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞治疗进展

基于嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞的过继治疗成为治疗肿瘤的新策略,CAR-T细胞对肿瘤的杀伤作用无严格的主要组织相容性复合体(MHC)限制性,并且已在血液肿瘤的治疗中,取得了重大的进展.然而针对实体瘤的治疗中,CAR-T细胞疗法具有易脱靶性以及治疗效率低下的问题.合成生物学的迅猛发展极大的提高了CAR-T细胞设计者们的热情,我们围绕CAR-T细胞治疗实体瘤的掣肘现状、合成生物学武装的新型CAR-T细胞的前沿进展进行讨论;并详细介绍目前应用范围较广的几种实体瘤靶点的临床前研究以及临床试验情况.

小鼠脊髓损伤急性期不同来源巨噬细胞活化和功能比较分析

目的:研究小鼠脊髓损伤(SCI)急性期损伤区巨噬细胞表型和功能异质性。方法:将6~8周C57BL/6J雄鼠随机分为正常(normal)组和脊髓损伤(SCI)组,SCI组利用改造的Dumont系结镊建立标准脊髓钳夹损伤模型。在SCI急性期(1、3和7 d),利用流式细胞术检测脊髓损伤区中免疫细胞亚群的比例变化;培养原代小胶质细胞(MG)和骨髓来源巨噬细胞(BMDM),利用流式细胞术比较其增殖和吞噬功能差异;利用real time RT-PCR比较其免疫应答差异。结果:在小鼠SCI急性期,脊髓损伤区周围中性粒细胞比例短暂升高,损伤后第3 d恢复至正常水平;高表达CX3CR1的MG和高表达Ly6C的BMDM比例在损伤第1 d大量增加,在第3 d时达到峰值,之后在第7 d时呈现下降的趋势;在体外实验中,原代培养的MG比BMDM具有更强的增殖、吞噬能力;然而,在LPS 100 ng/ml和IFN-γ20 ng/ml细胞因子刺激下,BMDM比MG分泌较多的促炎作用的分子:iNOS、TNF-α和IL-1β;在IL-420 ng/ml细胞因子的作用下,BMDM比MG分泌较少的抗炎作用分子Arg1、Mcr1和YM1。结论:在小鼠SCI急性期,脊髓损伤区中存在两种来源不同的巨噬细胞,即中枢MG和外周招募而来的BMDM,并且MG增加的速度和数量显著快于和多于BMDM。体外实验中,发现MG比BMDM具有更强的增殖、吞噬能力;在相同炎性细胞因子的刺激下,MG分泌更多的抗炎细胞因子和较少的促炎细胞因子。

营养支持治疗方案的研究进展

营养支持是20世纪医学的重要成就之一,自其发展以来,肠外肠内营养支持治疗挽救了无数肠功能衰竭患者的生命,让外科领域得以不断挑战极限、创造奇迹。临床上常通过营养支持来维护细胞正常代谢、支持组织器官功能、调节免疫系统功能、参与机体生理功能、修复组织器官机构,从而维持氮平衡、保持瘦肉体。因此,如何制定有效的营养支持治疗方案十分重要。本文将对营养支持治疗方案制定的整个流程及如何选择科学的治疗方法进行介绍,为恶性疾病或消耗性疾病患者的营养支持治疗提供理论依据。

内皮祖细胞来源外泌体在血管生成中作用的研究进展

内皮祖细胞最早在外周血中被发现,随着内皮祖细胞的相关研究不断丰富,发现内皮祖细胞也通过释放外泌体参与到了血管再生过程中。在缺血/再灌注损伤等疾病中,内皮祖细胞外泌体中的microRNA分子起到促进血管再生,以降低缺血/缺氧微环境带来的损伤风险并促进组织再生修复的作用。因此,内皮祖细胞外泌体已经被看作是血管再生的重要因素。本文就近年来内皮祖细胞来源外泌体在血管生成中作用的研究进展做一综述,以期为血管损伤相关疾病的治疗提供新思路。

嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞在自身免疫性疾病中应用的研究进展

嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞是一种通过基因编辑技术表达多功能合成受体的T细胞。CAR-T细胞在治疗肿瘤尤其是B淋巴母细胞白血病等血液系统恶性肿瘤中取得了巨大的成功,虽然在实体肿瘤的治疗中存在治疗效果有限、易复发等问题,CAR-T细胞治疗也已成为肿瘤治疗的前沿热点。随着CAR-T细胞技术的不断发展,这种细胞特异性疗法给自身免疫性疾病的治疗提供了新的思路,已在部分自身免疫性疾病的治疗中获得了初步成功。

miR-34b-5p在骨髓来源巨噬细胞极化中作用的研究

目的研究miR-34b-5p在骨髓来源巨噬细胞（bone marrow derived macrophages ，BMDM）极化中的作用。方法分离小鼠的骨髓细胞，在体外用巨噬细胞集落刺激因子诱导其分化为BMDM，进行PBS（对照）、M1[脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）、干扰素（interferon，IFN）-γ]或M2 [白细胞介素4（interleukin-4，IL-4）]极化处理24 h，实时定量PCR检测BMDM的miR-34b-5p表达；BMDM分别转染miR-34b-5p模拟物、阴性对照模拟物、miR-34b-5p抑制物以及阴性对照抑制物，培养24 h后再进行对照、M1或M2极化处理24 h，实时定量PCR、流式细胞术和酶联免疫吸附试验检测诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和IL-6的表达变化。结果与对照组相比，M1极化的BMDMmiR-34b-5p表达水平升高（P〈0.05），M2极化的BMDM miR-34b-5p表达水平无明显变化（P〉0.05）；mRNA相对定量结果显示，在对照、M1和M2极化的BMDM中，与对照模拟物组相比，过表达miR-34b-5p组的iNOS、TNF-α和IL-6表达升高（均P〈0.05），与对照抑制物组相比，miR-34b-5p表达抑制组的iNOS、TNF-α和IL-6表达下降（均P〈0.05）；蛋白定量结果显示，与对照模拟物组相比，在PBS对照和M2极化的BMDM中，过表达miR-34b-5p组的iNOS、TNF-α和IL-6表达没有变化（均P〉0.05），PBS在M1极化的BMDM中，过表达miR-34b-5p组的iNOS、TNF-α和IL-6表达升高（均P〈0.05）。结论M1极化的BMDM高表达miR-34b-5p，且miR-34b-5p促进BMDM的M1型极化。