WTAP通过上调糖酵解抑制结直肠癌细胞分化

目的阐明Wilms肿瘤抑制因子1相关蛋白(WTAP)在结直肠癌细胞分化过程中的生物学功能,探索WTAP影响结直肠癌细胞分化的分子机制。方法利用细胞分化模型,检测WTAP在结直肠癌细胞分化过程中的表达模式;构建WTAP过表达、敲降稳转细胞株,通过qRT-PCR和Western blotting方法检测细胞分化指标,分析WTAP对结直肠癌细胞分化状态的影响;通过转录组学方法探索WTAP影响结直肠癌细胞分化的分子机制。结果细胞分化模型显示WTAP的表达水平随着结直肠癌细胞分化显著下调;WTAP过表达可抑制结直肠癌细胞分化,而敲降WTAP则可加速结直肠癌细胞分化进程;转录组学结果提示结直肠癌细胞分化进程中糖酵解途径显著异常,进一步分子生物学验证发现,WTAP可促进结直肠癌细胞糖酵解相关酶的表达。结论WTAP通过促进结直肠癌细胞糖酵解从而抑制细胞分化进程。

线上学习平台联合翻转课堂在基本操作实验教学中的探讨

目的探讨基于线上学习平台联合翻转课堂教学法在临床基本操作实验教学中的应用和效果。方法于2021年3—6月将空军军医大学2017级120名临床医学专业五年制本科生随机分成两组,分别作为对照组与试验组,其中,传统教学模式下的课堂作为对照组,基于线上学习平台下的翻转课堂作为试验组。结果试验组学生的实验完成时间、实验动物意外死亡数以及平均实践考核成绩均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),并且试验组学生主观认为线上学习平台联合翻转课堂的实践教学模式能够改善实训课学习效果。结论将基于线上学习平台联合翻转课堂教学方式用于临床基本操作实验教学,这种教学模式可以帮助学生更快更高质量地掌握知识,同时潜移默化中激发学生的学习兴趣。

多基因编辑猪-猴心脏、肝脏、肾脏移植临床前研究初步报道

目的探讨目前国际上基因改造程度最大的基因编辑猪在临床前异种器官移植中的应用前景。方法将1只猪内源性逆转录病毒(PERV)敲除联合3种主要异种抗原基因敲除以及抑制补体活化、调节凝血紊乱、抗炎抗吞噬的9种人源化基因转入猪(PERV-KO/3-KO/9-TG)作为供体,获取其心脏、肝脏和肾脏,分别移植给3只恒河猴受体,建立猪-猴异种器官移植临床前研究模型。观察血流重建后各移植物的功能状态并总结受体存活情况;监测移植物的血流动力学情况;比较各器官移植受体的血液学指标变化;观察移植物组织病理学表现。结果血流重建后各移植器官颜色红润、质地柔软、血流灌注状态良好。术后1 d,移植心脏、肝脏和肾脏均表现为动、静脉血流状态充盈,灌注情况良好。心脏、肝脏和肾脏移植受体的术后存活时间分别为7 d、26 d和1 d。心脏移植受体术后1 d肌酸激酶、肌酸激酶同工酶以及乳酸脱氢酶水平均升高,至术后6 d逐渐恢复至接近正常水平。术后7 d各项指标均急剧升高。肝脏移植受体术后2 d天冬氨酸转氨酶水平升高,术后10 d转氨酶基本恢复正常,但总胆红素持续升高。术后12 d天冬氨酸转氨酶和丙氨酸转氨酶水平均出现升高,至术后15 d达到高峰。肾脏移植受体术后1 d出现轻微蛋白尿,后因突发严重心律失常死亡。组织病理学显示心脏和肾脏移植物组织结构接近正常,移植肝脏表现为片状坏死,肝组织结构出现紊乱,并伴有炎症损伤、间质出血和血栓性微血管病形成。结论PERV-KO/3-KO/9-TG猪在克服超急性排斥反应、缓解体液性排斥反应及凝血紊乱方面具有一定优势,但其能否作为临床异种器官移植潜在供体需进一步评估。

“三全育人”理念下《基本操作》教学改革——以“无菌术”为例

思政教育的理念对我国医学教育改革产生了深远的影响,强调将课程作为“主阵地”,致力于实现“思想政治工作贯穿教育教学全过程”,促进教育教学深化改革,全方位优化课程思政供给。新教学模式的探索和医学人才培养模式的改革是促进医学教育高质量发展的关键,以“三全育人”作为“以德树人”理念和使命下课程建设的有力抓手,在各高校中掀起了“三全育人”综合改革实践新征程。《临床基本操作》是我校一门纵、横向特色性整合的临床医学课程,创新性改革以学科为中心的传统构架,以“系统疾病”为主线建立全面完整的知识结构体系。结合“三全育人”理念,从“三全”模式的构建、无菌术课程教学的思政设计、无菌术课程教学的实践以及考核评价体系四个方面展开研究和实践,并通过调查问卷分析等方法对教学效果进行深度剖析,对新教学模式进行总结、凝练,并上升为理论素材,旨在将“三全育人”贯彻到医学临床基本操作课程教学中,为建设临床基本操作一流本科课程奠定基础。

不同浓度阿托品在学龄前儿童近视中的防治效果对比及对视力水平的影响研究

近视主要是指人眼在调节放松状态下,平行光线经眼的屈光系统屈折后聚集在视网膜之前^([1,2])。近视在学龄前儿童中较为常见,患儿主要表现为远视力下降,且该疾病已成为威胁学龄前儿童身心健康的一大疾病。近视是一种可防可控不可治的疾病,当学龄前儿童出现近视时,若未采取有效的治疗措施进行防控,则随着近视的发展出现不可逆转,且患儿的近视度数会不断提高,眼轴长度会不断增长,导致其用眼负荷加重,增加眼底病、白内障等并发症的发生概率^([3,4])。

四环素诱导的YAP1敲减系统的建立及其对胃癌细胞功能的影响

目的建立一种四环素(tetracycline,DOX)诱导的基因敲减系统,并利用此系统研究YAP1对胃癌细胞功能的影响。方法构建pLKO.1-tetON-YAP1敲减的慢病毒载体,酶切和测序方法检测载体构建成功与否;慢病毒感染胃癌细胞系SGC-7901和MKN-28,建立DOX诱导的YAP1敲减的胃癌细胞系;RT-PCR检测YAP1 mRNA相对表达量,Western blotting检测YAP1蛋白水平变化;平板克隆实验检测细胞增殖情况;划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移的情况。结果构建四环素诱导的YAP1敲减的病毒质粒,酶切鉴定结果显示,在6000 bp和3000 bp处各有一条带,测序结果与设计的shRNA序列一致。包装慢病毒并感染胃癌细胞系SGC-7901和MKN-28,DOX诱导组中,感染pLKO.1-tetON-YAP1的病毒的细胞中YAP1 mRNA的相对表达量和蛋白水平明显下调;而未诱导组则无明显变化。平板克隆形成实验结果显示,DOX诱导后shYAP1组克隆形成数明显降低;未诱导组无明显变化。划痕实验和Transwell迁移实验结果显示,DOX诱导后shYAP1组表达后细胞迁移能力受到抑制,未诱导组无明显变化。结论成功建立了四环素诱导的慢病毒系统,利用此系统敲减胃癌细胞YAP1基因,胃癌细胞增殖和迁移能力受到抑制。