G1通过核因子E2相关因子2减轻神经元氧糖剥夺损伤

目的探讨G1对原代神经元氧糖剥夺损伤后氧化应激指标的影响及核因子E2相关因子2(nuclear factor-E2-related factor 2,Nrf2)在其中的作用。方法将培养7 d的C57BL/6胎鼠皮质原代神经元细胞按随机数字表法分为6组(每组6孔):对照组(C组)、氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)组、溶剂组、G1组、G1+对照病毒组和G1+Nrf2慢病毒组。C组,不做任何处理;OGD/R组,OGD 2 h后恢复氧糖;溶剂组,OGD 2 h后在培养液中加入适量溶剂,继续培养22 h;G1组,行OGD/R模型,复氧复糖后的正常培养液中加入终浓度为5μmol/L的G1,继续培养22 h;G1+对照病毒组,感染对照慢病毒的原代神经元细胞行OGD/R模型,其余处理同G1组;G1+Nrf2慢病毒组,感染了Nrf2 shRNA慢病毒的原代神经元细胞行OGD/R模型,其余处理同G1组。利用分光光度法检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量,应用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞活力,采用ELISA法检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(malonaldehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide,SOD)和总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)的含量,采用Western blot和免疫荧光法检测Nrf2的表达。结果与C组比较,OGD/R组和溶剂组LDH、MDA和ROS含量升高,细胞活力、SOD和T-AOC含量降低,Nrf2总蛋白水平和核内蛋白水平均升高(P<0.05);与OGD/R组比较,G1组LDH、MDA和ROS含量降低,细胞活力、SOD和T-AOC含量升高,Nrf2总蛋白水平和核内蛋白水平升高(P<0.05)。与G1组及G1+对照病毒组比较,G1+Nrf2慢病毒组细胞活力、SOD和T-AOC含量降低,LDH、ROS及MDA含量升高(P<0.05);G1组与G1+对照病毒组比较,各指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论G1可以通过Nrf2通路增加抗氧化酶活性减轻原代神经元OGD/R损伤。