肝细胞生长素对小鼠实验性急性肝损伤的修复

肝细胞生长素（HGF）是肝细胞提取制备的一种能促进肝细胞 DNA 合成和肝细胞再生的物质,我们应用本室制备的 HGF 治疗 CC14诱发的小鼠实验性急性肝损伤,探讨治疗效果及作用机理,报道如下。

胃安素对大鼠慢性实验性胃溃疡愈合的影响

用不同剂量的胃安素(胸腺蛋白,TP)治疗大鼠慢性实验性胃溃疡。结果:1.TP_1(10mg·kg^(-1)·d^(-1)),TP_2(15mg·kg^(-1)·d^(-1))组大鼠溃疡面在喂药10天后均缩小,与盐水对照组比较,分别有高度显著性(P<0.01)和显著性差异(P<0.05),TP_1与TP_2两组面积比较有显著性差异(P<0.05);2.喂药20天大鼠胃溃疡完全愈合率比较:TP_1(75.0％)>TP_2(50.0％),高剂量的TP_3(50mg.kg^(-1)·d^(-1))组无效,其愈合率(5.0％)低于盐水对照组(15.0％);胃安素与西咪替丁联合应用效果最佳,其愈合率(94.47％)与对照组(15％,P<0.05)及西咪替丁组(55.0％,P<0.05)比较具有显著性差异。结果表明,一定剂量的胃安素能促进大鼠慢性实验性胃溃疡的愈合,与西咪替丁合用能更有效地提高溃疡的治愈率。

3，4’，5－三羟基芪－3－β－单－D－葡萄糖甙对损伤动脉内膜血小板沉积量的影响

在离体动脉损伤模型上，应用￣（１２５）Ｉ标记血小板，观察了３，４，５－三羟基芪－３－β－单－Ｄ－葡萄糖甙（ＰＤ）对模拟血管成形术后血小板沉积量的影响。结果表明，对照组血小板沉积量为９．４２±２．０１×１０￣６／ｃｍ￣２和４０２．３７±７２．８５×１０￣６／ｇ（标本干重，下同）；ＰＤ组血小板沉积量为：５．９３±１．９５×１０￣６／ｃｍ￣２和２５３．４９±７６．３８×１０￣６／ｇ，两组间差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。

急性肝衰竭大鼠血浆内毒素水平的检测及其与肝细胞生长素的关系

本实验采用鲎试验基质显色法检测D-氨基半乳糖(GaLN)形成急性肝衰竭(FHF)模型大鼠血浆内毒素(LPS)水平,并探讨了肝细胞生长素(HGF)对其影响。结果表明:FHF早期血浆LPS水平较正常对照组水平(49±6.94pg/ml)明显升高,且其水平随时间延长而自然降低。动态观察第9小时为高峰期(234±83.8pg/ml),30小时为最低水平(63.1±18.4pg/ml),与正常对照组比较分别具非常显著(P<0.01)或显著性差异(P<0.05)。结合肝组织病理学检查结果提示,内毒素血症出现在形成明显的肝损害之前。以HGF早期一次性腹腔注射治疗,发现9小时治疗组血浆LPS水平(149±41.9pg/ml)明显低于盐水对照组水平(234±83.8pg/ml,P<0.005)。相反,24小时HGF组LPS水平升高(266±55.9pg/ml)而明显高于盐水对照组水平(153±71.9pg/ml,P<0.001)。改变给药方式,则24小时两组LPS水平比较无显著性差异(115±14.5pg/ml与117±12.1pg/ml,P>0.05)。本研究进一步说明HGF、内毒素血症及肝损伤三者间紧密联系,并提示HGF治疗FHF所出现的内毒素血症以间歇或持续用药为宜。

肿瘤坏死因子α杂交瘤细胞系的建立

应用细胞融合技术建立了2株(3A_9、4B_7)能稳定分泌肿瘤坏死因子单克隆抗体(TNFMcAb)的杂交瘤细胞系,经鉴定:(1)二株均为IgG1;(2)染色体为101条;(3)二株McAb腹水1:20稀释与10U的TNFa进行免疫沉淀反应,结果TNF几乎全部失去活性(将近90％以上活性丧失);(4)效价测定,腹水为1×10^((-4)~2)×10(-4),培养上清液为5×10^((-2)~1)×10^(-3)或更高;(5)TNF McAb置4℃2个月,室温(25℃),10d抗体效价基本稳定;(6)杂交瘤细胞在液氮中冻贮2个月后复苏,细胞生长良好,抗体分泌正常。本研究为rHTNFa的纯化、生物学特性研究、治疗感染性内毒素休克、研制TNF检测药盒提供了物质基础。为进一步研究TNF与重型肝炎的致病机理、筛选治疗重型肝炎药物、判断病情预后有十分重要的价值。

猪肝细胞生长素对大鼠实验性肝硬化治疗作用的电镜观察

肝细胞生长素(Hepatic Growth Factor,HGF)是一类小分子多肽类物质,能刺激34％肝切除大鼠肝细胞DNA合成。我们在用其治疗小鼠急性肝损伤、大鼠急性肝衰竭取得较好疗效后,进一步治疗CCl4及胆固醇等诱发的SD大鼠早期肝硬化。以电镜为观察手段,探讨其作用机制材料和方法一、模型建立:SD大鼠,雌雄各半,160～200g(广东省计生所)。安静条件下(20℃～25℃)常规饲养一周后,以纯玉米渣为饲料。

肝细胞生长素对四氯化碳慢性中毒性肝损伤保护作用的研究

从断奶乳猪新鲜肝脏提取的肝细胞生长素(HGF)注入经四氯化碳(CCl_4)诱发的大鼠慢性中毒性肝损伤模型的腹腔内,观察 HGF 对肝损伤的保护作用。结果发现 HGF 具有:1.降低转氨酶(与对照组比较有显著差异,P<0.05);2.改善蛋白代谢,降低γ-球蛋白;3.抑制肝脏纤维组织增生(羟脯氨酸含量和肝组织纤维化均比对照组明显降低和减少)等作用;4.超微结构在 HGF 组比对照组也有明显改善,尤以线粒体和粗面内质网为明显。本实验证实 HGF 可以对 CCl_4诱导的慢性肝损伤起到肝细胞再生和保护作用。

干扰素及肿瘤坏死因子对瘢痕成纤维细胞影响的实验研究

目的 观察干扰素 (INF r)及肿瘤坏死因子 (TNF α)对体外培养瘢痕成纤维细胞的影响 ,探讨其作用机制。方法 将瘢痕组织来源的成纤维细胞经培养后通过不同浓度的INF r及TNF α处理 ,一定时间后测定成纤维细胞抑制率及细胞内DNA含量。结果 一定浓度的INF r和TNF α可以抑制瘢痕成纤维细胞的分化和增长 ,并呈剂量依赖关系 ,且可使其细胞内DNA含量明显减少。结论 INF r和TNF α可在细胞水平上抑制瘢痕成纤维细胞的增殖和DNA合成。

肝细胞生长素增强大鼠网状内皮系统功能的实验研究

近年来,国内外对重型肝炎与网状内皮系统(RES)功能,内毒素血症和肿瘤坏死因子相互关系的研究越来越深入,并致力于寻找能提高RES功能状态的措施。

用肝细胞生长因子治疗鼠实验性肝损伤

应用猪肝细胞生长因子(HOF)治疗CCl_4诱发的小鼠急性肝损伤及D-半乳糖胺诱发的大鼠暴发性肝衰竭(FHF)。结果表明,HGF可迅速降低急性肝损伤小鼠转氨酶(ALT)水平,与联苯双酯相似。修复肝损伤优于联苯双酯。治疗HFH大鼠,30天存活率47.8％,盐水组仅为17.3％(P<0.05)。HGF的疗效除与促进肝细胞再生外,尚可能与激发机体的免疫状态及与制剂中含有的核酸及Zn、Se等微量元素有关。

肝细胞生长素与肝损伤大鼠雌二醇关系的探讨

为探讨肝细胞生长素(HGF)促进肝细胞DNA合成的机理,结合Francavilla报告,血清雌二醇(E_2)水平能影响肝细胞DNA合成的研究,我们建立了SD大鼠急性肝损伤模型,并按不同的HGF剂量设实验组,不同时间取血检查血清E_2动态变化,同时用盐水设对照组。结果表明:大鼠肝损伤组注射HGF(20mg)后,E_2水平明显高于盐水对照组P<0.01;而血清E_2,浓度在4h达最高峰,并与剂量成正相关(γ_1=0.835,γ_2=0.885)。但E_2血清高峰期不因HGF剂量加大而提前。无肝损伤大鼠组:注射HGF和盐水对照组其血清均未检出E_2。提示HGF只能提高肝损伤大鼠血清E_2水平。推测HGF可能作用于肝损伤大鼠丘脑下部垂体而正反馈调节E_2水平,E_2再通过其相应受体效应调节钠通道,进而促进肝细胞再生。我们初步认为:肝损伤、HGF、E_2、肝细胞再生四者有密切关系。

测定肿瘤坏死因子ELISA法的建立及其在肝病中的应用

为深入研究TNF在某些疾病和病理过程中的作用,本文应用自制的肿瘤坏死因子单克隆抗体(抗-TNFMcAb)建立了三种检测各型肝炎患者血清中 TNF 水平的方法,并分别考核其灵敏度。结果表明,方法1的最低检出量为0.128ng/ml,比其它二法灵敏度高5和25倍。另外,方法1的特异性、重复性测定表明,其符合率及抗体特异性中和率均在95.00%以上且与其它细胞因子不发生交叉反应。各种肝病血清中 TNF 阳性率和含量与健康人血清对照组(4.0%,<0.14ng/ml)比较均有不同程度的升高并有非常显著性差异(P<0.001)。各组肝病患者血清TNF 升高的顺序为重型肝炎(0.86±0.26ng/ml,80.09%)>慢性活动性肝炎(0.46±0.13ng/ml,65.78%)>肝硬化(0.43±0.14ng/ml,60.00%)>慢性迁延性肝炎(0.35±0.14ng/ml,34.28%)。

免疫荧光检测抗PHSA、PHSA-R及HBsAg免疫复合物

应用免疫荧光法同时检测 PHSA-R、抗 PHSA 和 HBsAgICs 的结果表明,三者常以高比率重叠存在于 HBV 感染者血清中。抗 PHSA-IgM 检出率 AH 患者明显低于 LC、HCC、CH 患者。实验还表明,抗 PHSA 不能中止 HBA 的感染,HBsAgICs 可能参与肝脏损害。

抗-LSP单克隆抗体的临床应用

本文报告用自制的抗-LSPMcAb作为试剂,建立ABC-ELISA双夹心法,并与ABC-ELISA间接法,ELISA、PHA法作比较,同时检测277例乙肝患者血清申的抗-LSP水平,其阳性率在慢性活动性肝炎及慢性迁延性肝炎病例中,双夹心法分别为91.7%和50.0%;间接法分别为91.7%和56.2%,明显高于ELISA和PHA法(P<0.01或0.05),而慢性活动性肝炎的抗-LSP阳性率也高于其它各型肝炎(P<0.01或0.05).本文还检测肾损伤型SLE和慢性肾病患者的抗-LSP,双夹心法阳性率分别为15.4%和17.8%,明显低于间接法46.2%和、62.2%,P<0.05.