病毒性肝炎患者血浆一氧化氮和内皮素水平及意义

各型病毒性肝炎及活动性肝硬化患者共２１３ 例，采用镉柱还原法及重氮化法检测ＮＯ－２ ／ＮＯ－３ 水平，放免法检测ＥＴ－ １ 水平。急性肝炎、慢性活动型肝炎、肝炎肝硬化等各型肝病患者血清ＮＯ－２ ／ＮＯ－３ 及ＥＴ－ １ 水平均有不同程度的升高，肝炎急性期ＮＯ 就有明显升高，慢性肝病ＮＯ与ＥＴ随病情进展水平升高。

DNA疫苗诱导健康小鼠细胞免疫及HBV转基因小鼠抗-HBs产生

目的 :在HBVDNA疫苗成功地诱导健康小鼠体液免疫应答的基础上 ,探讨其作为抗 HBV治疗的可行性及作用机理。方法 :应用基因重组技术 ,构建编码HBV中蛋白 (preS2 +S)及人白细胞介素融合蛋白基因的真核表达质粒pS2 .S及pFP ,继经肌注免疫健康Balb C及HBV转基因 (Tg)小鼠并观察健康小鼠细胞免疫应答及HBVTg小鼠HBsAg的血清转换。结果 :1 体外HBsAg对DNA疫苗免疫后的T细胞的刺激呈浓度相关 ,HBsAg 30 μg ml时刺激pS2 .S免疫小鼠脾细胞增殖指数(5 6± 0 9)明显较pcDNA3 1组 (2 0± 0 5 )高。细胞培养上清液细胞因子水平检测结果 :免疫实验组IL 2及IFN γ的分泌水平明显较对照组高 ,而IL 4水平于各组影响不明显。 2 pS2 .S免疫小鼠局部引流淋巴结DCs诱导HBsAg致敏的T 细胞增殖指数(4 2 0 )较pcDNA3.1组 (2 5 5高 )。 3 高剂量的pS2 .S组与联合pFP组各有一只Tg小鼠分别于 2、4w开始发生HBsAg血清转换 ,且其抗体水平随时间而增长。结论 :结果表明HBVDNA疫苗能有效诱导HBsAg特异性的细胞免疫应答 ;HBV Tg小鼠初步实验结果为治疗型HBVDNA疫苗的深入研制提供了实验依据。

肝细胞提取物对癌细胞凋亡相关基因表达的影响

<正>研究资料表明,肝细胞提取物(hepatocyteextraction)在诱导BEL-7402细胞凋亡的同时能促进p53和Fas基因表达,而对bcl-2和C-myc表达具有一定的抑制作用.本研究采用免疫组化技术,进一步观察纯化的肝提取肽(S4)对4种肝癌和4种非肝癌细胞凋亡及凋亡相关基因的影响.1 材料与方法1.1 肝细胞提取物和S4(subfraction 4)的制备参见文献[2].1.2 细胞系及培养条件SMMC 7721、QGY-7703人肝癌细胞、HCT-8结肠癌细胞、GLC-82低分化肺腺癌细胞引自中国科学院细胞所.BEL-7402人肝癌细胞引自北京中日友好医院中西医结合研究所.Hepe小鼠肝癌细胞、CNE-2鼻咽癌细胞引自中山医科大学.SGC-7901胃腺癌细胞由第四军医大学生化室惠赠.实验时将对数生长期细胞用0.25%胰酶加0.025%EDTA消化,配成(2.5～5)×10~4/ml细胞悬液,加入内置盖玻片的24孔Costar培养板中,每孔0,5ml.37℃,5%CO_2条件下孵育24小时后,置4℃水浴1小时后立即升到37℃,将S4以不同浓度加入培养孔,每孔0.5ml,继续孵育.洗涤固定细胞,分别做DNA原位末端标记检测和癌基因免疫组化测定.根据预实验结果,选定S4为5μg/ml,作用48小时为统一条件,以利于结果的可比性及准确性.

逆转录-聚合酶链反应用于肾综合征出血热病毒基因分型诊断

目前，用于肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）分型的方法主要是空斑减少中和试验（ＰＲＮＴ）。由于操作过于复杂与繁琐，仅用于实验研究。逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）是以ＲＮＡ为模板，联合ＲＴ与ＰＣＲ，具有快速、简便、灵敏、特异等优点。近年来，国内外已...