针对Ⅰ型及Ⅲ型前胶原基因的二联核酶的构建及体外活性研究

增殖性瘢痕组织中胶原蛋白的合成显著增加从而导致胶原的过度沉积。利用核酶特异地抑制前胶原基因的表达可减少胶原蛋白的合成 ,为瘢痕的研究和防治提供了新的思路。为研究用核酶抑制前胶原基因表达的可能及效果 ,设计并构建了针对α1 (Ⅰ )型及α1 (Ⅲ )型前胶原基因的二个单价核酶串联的二联核酶基因真核表达载体 ,并对其体外切割活性进行研究。结果表明该二联核酶的切割效果明显 ,均能有效地切割底物 。

端粒重复序列扩增法结合微孔板杂交法定量检测端粒酶活性

目的探讨定量检测端粒酶活性的非放射性检测方法。方法将端粒重复序列扩增测定法（ＴＲＡＰ）与微孔板杂交 相结合建立了非放射性检测方法，对３例正常肝组织和４例肝癌患者治疗前后的肝癌组织、瘤旁组织、肝癌凋亡组织 进行检测。结果肝癌组织具有比较高的端粒酶活性，而正常肝组织和瘤旁组织无此酶活性，肝癌凋亡组织端粒酶活性 显著降低。结论 该定量分析方法简单、灵敏、特异性强，可以比较准确地反映组织的端粒酶活性状态。

乙型肝炎病毒特异性核酶与丁型肝炎病毒重组体的构建

目的将重组丁型肝炎病毒基因组作为乙型肝炎病毒特异性核酶的载体，探讨解决核酶在实际应用中的保护性运载、靶向性和特异性问题。方法设计了乙型肝炎病毒特异性锤头型核酶结构，采用重组引物，结合“不对称ＰＣＲ”和“ＭｅｇａＰｒｉｍｅｒＰＣＲ”方法将所设计的锤头型核酶基因替代插入到了型肝炎病毒基因组５'端高变区，重组体经ＰＣＲ初步鉴定后，克隆到Ｔ载体（ｐＴＡｄｖ）Ｔ７启动子下游，经限制性内切酶酶切、序列测定分析。结果与结论证实该重组作为预期的乙型肝炎病毒特异性核酶－丁型肝炎病毒基因组重组体，为进一步的体外切割和细胞内与乙型肝炎病毒相互作用的研究提供了基础。

抗TORCH-IgM型抗体检测中类风湿因子RF清除的实验研究

目的探讨在抗ＴＯＲＣＨ－ＩｇＭ型抗体检测中排除ＲＦ和特异ＩｇＧ产生的假阳性和假阴性结果的方法。方法在抗ＴＯＲＨ－ＩｇＭ型ＥＬＩＳＡ试剂的研究过程中．用羊抗人ＩｇＧ（γ特异）抗血清消除ＲＦ干扰。结果弱阳性ＯＤ_(４５０)下降不超过５０％而非特异性下降约８０％左右的情况下有效地消除了ＲＦ和特异ＩｇＧ的干扰．结论在调整好特异性和敏感性关系的前提下，用羊抗人ＩｇＧ（γ特异）抗血清，能有效地消除ＲＦ和特异ＩｇＧ的干扰，使弱阳性不漏检而假阳性被剔除。