基因组内碱基分布整体均衡与局部不均衡的研究进展

近年来 ,随着各种基因组计划的相继完成 ,发现在各种生物体单核苷酸链水平上存在着A≌T ,G≌C的数量关系 ,但从几千个至十几万个碱基的范围来看 ,A≠T ,G≠C。从数学上可以证明 ,如果DNA双链之间碱基的突变率一致 ,则A≌T ,G≌C成立 ,但很多实验表明 ,双链之间的突变率并不一致 ,因此这个问题的解决仍有赖于数理科学和生物学的进一步结合。

胃肠道功能紊乱与胃动素关系的实验研究

目的 探讨胃动素（MTL）与胃肠道功能紊乱发生的关系。方法 用放射免疫分析方法（RIA）检测胃肠道功能紊乱模型大鼠体液及组织中MTL的含量，并用四君子汤反证。结果 与正常对照相比，胃肠道功能紊乱模型大鼠在制摸过程的早期（第6 d），血浆、肠液、空肠及下丘脑组织中MTL含量增加（P<0.05），而晚期（第14 d）MTL含量下降（P<0.05）。经四君子汤预防和治疗的胃肠道功能紊乱模型大鼠， MTL水平得到明显改善，明显优于自然恢复大鼠（P<0.05）。结论 体液及组织中MTL含量异常是胃肠道功能紊乱发生的重要因素之一。

细胞凋亡的方法学研究进展

细胞凋亡的方法学研究进展谭晓华张亚历周殿元姜泊作者单位：第一军医大学南方医院消化内科研究所（广州５１０５１５）细胞凋亡（Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）或称程序性细胞死亡（Ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｄｅａｔｈ，ＰＣＤ）是受基因控制的一种主动性细胞自杀过程［１］，...

表没食子儿茶素对LoVo细胞生长周期的影响和诱导其凋亡的研究

目的探讨表没食子儿茶素对体外培养的人大肠癌ＬｏＶｏ细胞株生长周期的影响以及诱导该细胞凋亡的作用。方法用流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳、ＨＥ染色观察表没食子儿茶素处理ＬｏＶｏ细胞后其细胞周期的改变以及细胞凋亡形态学和生化方面的改变。结果表没食子儿茶素在低浓度时（３２．５μｍｏｌ·Ｌ－１）对ＬｏＶｏ细胞的周期有明显的影响，主要是Ｓ期和Ｍ／Ｇ２期明显降低，引起ＬｏＶｏ细胞生长阻滞在Ｇ１期；在较高浓度（１６２．５～３２５μｍｏｌ·Ｌ－１）作用２４ｈ，流式细胞仪ＰＩ染色出现亚二倍体峰，ＨＥ染色可见ＬｏＶｏ细胞有典型的凋亡细胞形态改变：细胞变小变圆、固缩，细胞膜出泡，细胞核固缩、边集和碎裂以及凋亡小体的形成；琼脂糖凝胶电泳呈典型的“梯状（Ｌａｄｄｅｒ）”带。结论表没食子儿茶素对体外培养的ＬｏＶｏ细胞具有抑制和杀伤作用，其机制是通过影响ＬｏＶｏ细胞的生长周期和诱导其凋亡而实现。

强肝胶囊治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的临床病理研究

目的 试图从临床病理学角度探讨该药对慢性乙型肝炎肝纤维化的疗效。方法 共 63例慢性乙型肝炎接受试验。随机分为 2组 ,其中治疗组 45例 ,对照组 18例。治疗组给予强肝胶囊 1.2g ,3/d ,至少 6个月 ;对照组给予肝泰乐及复合维生素治疗6个月。试验前 3个月内和试验终止后 1个月内 ,分别予血清肝纤维化指标检测和肝穿刺病理学检查 ,以进行疗效评价。结果 ( 1)血清肝纤维化指标 :治疗组治疗前后透明质酸分别为 184.32± 71.5 6和 94.2 4± 2 8.37ng/ml(P <0 .0 5 ) ,IV型胶原分别为 138.65± 5 1.16和 76.96± 40 .2 5ng/ml(P <0 .0 5 ) ,层粘蛋白分别为 1.38± 0 .48和 1.0 7± 0 .32U/ml(P <0 .0 5 ) ;而对照组上述指标治疗前后无明显差异 (P >0 .0 5 )。 ( 2 )肝组织学改变 :治疗组炎症坏死活动性改善的总有效率为 82 .6% (P <0 .0 5 ) ,肝纤维化改善或停止发展的总有效率为 92 .8% (P <0 .0 1) ;对照组治疗前后在炎症坏死活动性及纤维化方面均无显著性差异。结论 强肝胶囊能有效地减轻肝内炎症坏死 ,稳定甚至逆转肝纤维化 ,可作为治疗慢性乙型肝炎的良好药物。

肠易激综合征不同中医证型的神经内分泌学研究

目的从神经内分泌学的角度探讨肠易激综合征（Ｉｒｒｉｔａｂｌｅ ｂｏｗｅｌｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＩＢＳ）中医证型的病理实质。方法选两 种中医证型的 ＩＢＳ患者、溃疡性结肠炎（Ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅ ｃｏｌｉｔｉｓ，ＵＣ）患者及正常对照者各 ２０例，采用放射免疫法测定血浆中 Ｐ物质（Ｓｕｂｓｔａｎｃｅ Ｐ，ＳＰ）、血管活性肠肽（Ｖａｓｏａｃｔｉｖｅ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ，ＶＩＰ）含量，同时取乙状结肠粘膜作 ＳＰ、ＶＩＰ阳 性细胞免疫组化检测。结果不同中医证型ＩＢＳ病人血浆 ＳＰ、ＶＩＰ含量及结肠粘膜 ＳＰ、ＶＩＰ阳性细胞数有不同的异常 改变。结论本研究提示脑肠肽有可能成为ＩＢＳ中医微观辨证的客观依据之一。

茶叶抗癌机理研究进展

茶叶及其茶多酚成分防癌抗癌作用已为众多的实验证实,但其机制尚未完全明了,可能与其抗氧化活性、抑制亚硝基形成反应、调节致癌原代谢酶、捕获最终的致癌原和抑制细胞增殖相关活性有关,近来发现具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用。

耐药株LoVo /Adr细胞pH与药物分布的关系研究

目的 探讨耐药株LoVo /Adr细胞 pH与药物分布的关系。 方法 采用免疫组化法检测P gp的表达 ;在共聚焦显微镜下测细胞内SNAFL calcein AM荧光强度 ,其强度与胞浆的pH成正比 ;利用荧光显微镜观察阿霉素在细胞内的分布。结果 敏感LoVo株细胞P gp染色为阴性 ,而耐药株LoVo /Adr细胞呈强阳性 ;LoVo /Adr细胞内 pH显著高于LoVo细胞 ;LoVo/Adr细胞内阿霉素含量显著低于LoVo细胞 ,且阿霉素在核区分布明显减少 ,相对在胞浆中增多 ;而在敏感LoVo细胞中 ,阿霉素集中分布在核区 ,胞浆中很少。结论 P gp过度表达可能通过影响胞浆的 pH而导致药物在耐药细胞中异常分布 ,可增进其对化疗药物的耐受性 ,是肿瘤细胞发生耐药的原因之一。

难辨梭菌性结肠炎与肠道微生态关系的临床研究

目的 :研究难辨梭菌性结肠炎与肠道微生态关系、临床特征及防治措施。方法 :30例腹泻患者难辨梭菌培养阳性 ,为实验组 ,采用George方法进行难辨梭菌分离、鉴定。菌群培养分析检查 10种常见细菌定量分析。以及粪便快速涂片革兰氏染色快速诊断肠道菌群失调。同时与对照组、健康组相比较。结果 :难辨梭菌性结肠炎肠道微生态发生变化 ,表现为肠杆菌、拟杆菌、乳杆菌、双歧杆菌数量明显下降。在使用抗生素或化疗药物 3d～ 2周腹泻 ,12例结肠镜见到假膜附着。结论 :难辨梭菌性结肠炎与肠道微生态改变有关。使用抗生素或化疗药物易诱发难辨梭菌性结肠炎。

血管内皮细胞生长因子及其受体研究进展

1983年Senger等发现用癌性腹水作Mile试验,可使豚鼠皮肤对美兰的通透性增加。并且在癌性腹水和肿瘤细胞培养上清液中分离、纯化出可使微血管与小静脉血管通透性增加的活性物质,称作血管通透因子(Vascular Permeability Factor,VPF)。后来发现该因子特异性作用于血管内皮细胞,并促进血管内皮细胞的增殖,因此又称血管内皮细胞生长因子(Vascular EndotheUal Growth Factor,VEGF)。实验和临床研究发现,实体肿瘤在血管未形成时,肿瘤的增殖、生长有限,

生长抑素及其类似物的研究进展

生长抑素(SST)及其类似物通过生长抑素受体(SSTR)介导可以发挥多种生物学作用,临床上已用同位素标记的SST及其类似物诊断多种肿瘤,特别是胃肠、胰腺的神经内分泌瘤(APUD)。研究发现SST及其类似物有广泛的抑制细胞增殖活性,可以抑制肿瘤的增长和转移。本文就SST及其类似物的研究进展作一综述。

筛选野战敷料组方抑菌止血作用的实验研究

目的为研制野战密闭性功能敷料筛选抑菌止血中药组方。方法以民间验方为基础组成3个组方;且以2种制备方法进行凝血实验、体外抑菌实验,筛选出止血、抑菌功效好的组方。结果Ⅰ号方提取液的凝血时间、平均抑菌率与其他组方比较差异显著(P<0.01),其止血作用与云南白药无显著差异(P>0.05),其最低抑菌浓度(MIC)在0.00625-0.025g／L之间,用于敷料的浓度是MIC的16-64倍。结论Ⅰ号组方的提取液具有显著的止血抑菌效果而被筛选为野战密闭性功能敷料主方。

蛋白酪氨酸激酶与胃粘膜损伤修复关系的研究

目的探讨蛋白酪氨酸激酶(PTK)在胃粘膜修复中的作用。方法以不同浓度去氧胆酸钠(DOC)造成 SD 大鼠胃粘膜不同程度的损伤,按不同时间点取胃粘膜,以膜结合法测定细胞膜组份 PTK 活性。结果以对照组 PTK 活性作为基础值(100%),胃粘膜中度(20mmol/LDOC)损伤,30min 后 PTK 活性呈轻度下降(86.49%,p>0.05),1h 后开始上升(116.11%),但无统计学意义(p>0.05)。3h 后急剧上升至峰值(260.69%,p<20.01),以后逐渐下降,损伤后6和12h PTK 活性分别为对照组的203.40%和160.6%,p<0.01,于24hPTK 活性又有所回升,为对照组的176.37%(p<0.01),48h 后恢复至正常对照组的水平(P>0.05)。重度(60mmol/L DOC)损伤后30min、1和3h,PTK 活性均较对照组降低,分别为后者的51.36%、43.25%和72.39%(P均<0.01),虽然损伤后6h PTK 活性上升至对照组的115.19%,但 PTK 活性升高仅在12h(145.72%)以后有统计学意义(p<0.01)。24h 继续上升至对照组的184.07%(p<0.01),48h 仍维持在较高水平(166.04%,p<0.01)。5、10和20mmol/L DOC 所致损伤,3h PTK 活性分别为对照组的180.24%、215.87%和260.69%(P 均<0.01),PTK 活性变化呈剂量依赖性关系。结论胃粘膜损伤后的早期,PTK 活性的迅速上升是胃粘膜快速修复以及维持其完整性的重要物质基础;PTK 活性低下使胃粘膜修复明显延迟。

姜黄素防治肿瘤的机制研究进展

姜黄素可以抑制多种肿瘤细胞系的生长 ,其作用机制主要是调控癌基因和抑癌基因 ,下调NF κB的活性抑制iNOS ,COX 2的活性 ,影响EGFR ,PKC信号转导通路 ,诱导细胞周期停滞和细胞凋亡 ,抑制血管生成 ,抑制尿激酶的活性和MMP

Hp尿素酶B亚单位减毒鼠伤寒菌重组疫苗的制备和生物效应研究

目的研制表达幽门螺杆菌(Hp)尿素酶B亚单位(UreB)的减毒鼠伤寒杆菌重组疫苗,并观察其生物学效应。方法以幽门螺杆菌标准株——悉尼株(SS1)的基因组DNA为模板,构建Hp尿素酶B亚单位减毒鼠伤寒杆菌重组疫苗SL3261/pTC01-UreB。经口服免疫BALB/c小鼠后,检测肠液中抗UreB的特异性IgA抗体和血清中IgG抗体,同时观察小鼠体重、胃黏膜炎症程度等一般情况。结果构建Hp-UreB的SL3261/pTC01-UreB菌株,连续传80代可稳定表达Hp-UreB,菌落提取质粒后酶切及PCR鉴定均与pTC01-UreB符合;SDS-PAGE和Western blot显示pTC01-UreB转化SL3261可表达与Hp-UreB亚单位相符的相对分子质量约61000蛋白,该蛋白能与抗Hp兔血清反应;SL3261/pTC01-UreB口服免疫BALB/c小鼠的肠液中抗UreB的特异性IgA抗体和血清中IgG抗体明显增高,而小鼠体重和胃粘膜炎症指数与对照组差异无显著意义。结论Hp-UreB的减毒鼠伤寒杆菌重组疫苗SL3261/pTC01-UreB口服免疫小鼠可诱导特异性免疫应答。

生物人工肝脏的研究现状

随着细胞学、生物工程学技术的发展,生物人工肝脏的建立和临床试用成为研究热点,生物人工肝脏可望成为治疗肝衰竭的新途径。本文综述了当前该领域的研究成果、应用前景及存在的问题。

幽门螺杆菌过氧化氢酶脂质体疫苗免疫预防研究

目的探讨制备脂质体包裹重组幽门螺杆菌过氧化氢酶(Kat)口服疫苗的方法,并用Hp感染的小鼠模型评价其在预防Hp感染中的作用。方法将PET-22(+)/Kat在BL21(DE3)大肠杆菌表达,表达Kat的包涵体经洗涤、变性、复性,采用Q Sepharose Fast Flow阴离子交换层析和Sephacryl S-200凝胶过滤层析分离纯化Kat重组蛋白,用薄膜分散法制备以卵磷脂和胆固醇为膜组分包裹的Kat重组蛋白口服疫苗,并用透射电镜测定其粒径。BALB/c小鼠分为5组,分别通过灌胃方法给予PBS、空白脂质体、Kat重组蛋白+CT、脂质体包裹Kat重组蛋白、脂质体包裹Kat重组蛋白和CT,每周1次共4次,末次攻击2周再用活Hp攻击3次,3周后处死小鼠,行胃组织快速尿素酶试验、Hp的定植半定量、炎症程度及其炎症活动度的评分。结果以包涵体为主的表达产物占全菌总蛋白的24.4%,经纯化获得纯度为95%的重组蛋白,制备的脂质体粒径为0.7±0.4μm。PBS组和空白脂质体组保护率均为0,而Kat重组蛋白+CT组、脂质体包裹Kat重组蛋白组、脂质体包裹Kat重组蛋白和CT组的保护率分别为73.3%、66.7%和86.7%,且均能使免疫小鼠胃粘膜Hp感染数目明显减少,炎症反应减轻。结论口服脂质体部能分代替免疫佐剂的作用,将其作为Hp疫苗的免疫佐剂,具有广泛的应用前景。

胃炎及消化性溃疡患者血清Hp CagA IgG的检测

目的 cagA 基因阳性 Hp 感染与慢性胃炎、消化性溃疡的关系。方法用 ELISA 检测55例慢性胃炎和33例消化性溃疡患者血清中 Hp CagA IgG 水平。结果慢性胃炎患者的 CagA IgG 阳性率为47.3％,其阳性血清的平均 CagA IgG 水平为27.9±12.9U/ml,而消化性溃疡患者之阳性率为72.7％,CagA IgG 水平为41.6±18.0U/ml,两组比较相差显著(p<0.05和 p<0.01)。结论 CagA 阳性 Hp 具有致溃疡作用。