终末期肾病患者脂质过氧化水平的变化

目的 :研究慢性终末期肾病 (ESRD)脂质过氧化状况及肾替代治疗对其的影响。 方法 :观察对象分为正常对照组、慢性肾功能不全非透析 (CRF)组、持续性不卧床腹膜透析 (CAPD)组和血液透析 (HD)组 ;测定各组以及HD前后血浆丙二醛 (MDA)、脂氢过氧化物 (LOOH)含量和血浆抗氧化型LDL抗体 (anti oxLDLAb)水平。 结果 :ESRD患者血浆MDA、LOOH和anti oxLDLAb水平均比正常对照组明显升高 (P均 <0 0 5 ) ;CRF组血浆MDA、LOOH和anti oxLDLAb水平与SCr浓度呈正相关 (P均 <0 0 1) ,与Ccr呈负相关 (P均 <0 0 1) ;CAPD组血浆MDA含量比CRF组显著升高 (P <0 0 5 ) ;HD组血浆MDA、LOOH和anti oxLDLAb水平均比CRF组明显增高 ,MDA和LOOH浓度比CAPD组明显升高 (P均 <0 0 5 ) ;单次HD前后上述指标无明显变化 (P均 >0 0 5 )。 结论 :ESRD患者脂质过氧化反应增强 ,并随肾功能恶化而加重 ,HD可能进一步加剧这种病理生理改变。

伴有蛋白尿的IgA肾病的治疗

本刊从 2 0 0 2年起新辟“临床名家谈”专栏 ,特请国内知名专家就读者普遍关心的或一些有争议的问题发表意见 ,进行切蹉。本栏目的宗旨是“百花齐放 ,百家争鸣” ,强调尊重原作者的观点 ,来稿一律不作更动。笔谈不拘形式 ,有利于充分抒发各家特长或独到的经验。敬希广大读者惠予关注 ,能从各位名家发表的经验、宝贵意见中汲取营养。本刊诚挚地期望本栏目的设立能有利于提高我们的医疗质量 ,更好地为患者服务。

肝组织学检查对诊断终末期肾病合并病毒性肝炎的意义

目的 评价肝组织学检查对诊断终末期肾病合并病毒性肝炎的临床意义。方法 84例合并慢性乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒感染的终末期肾病患者接受肝穿刺活检术,以半定量积分法评价肝组织炎症和纤维化程度,将其与临床表现、血清学指标进行对比分析。结果 终末期肾病合并肝炎病毒感染者肝组织的炎症活动度与纤维化程度显著相关(P<0.01);根据临床表现和生化指标诊断病毒性肝炎与组织学诊断的符合率为38.1％;肝组织炎症活动度和纤维化程度不同的患者之间,血清丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸转氨酶、白蛋白、总胆红素和凝血酶原活动度均无明显差异(P均>0.05)。结论 对终末期肾病患者而言,肝组织学检查是诊断慢性肝炎并判断肝脏病变程度唯一可靠的指标。

慢性肾脏病患者晚期氧化蛋白产物血症及其与动脉粥样硬化的关系

目的 观察慢性肾脏病(CKD)患者循环中晚期氧化蛋白产物(AOPP)水平,并探讨其与动脉粥样硬化的关系。方法 断面队列研究。选109例CKD患者和71例健康对照者,用高分辨B超测颈动脉内膜中层厚度(IMT)、切面内膜中层面积及粥样斑块。测血清AOPP、丙二醛、谷胱苷肽过氧化物酶活性(GSHPx)和C 反应蛋白水平。结果 CKD患者血清AOPP水平明显高于健康对照者(P<0 01), 62例透析者血清AOPP水平明显高于47例未透析者(P<0 01);未透析者血清AOPP水平与内生肌酐清除率呈负相关(r=-0 292, P<0 05)。38例有颈动脉粥样斑块者血清AOPP水平明显高于71例无颈动脉粥样斑块者(P<0 01)。单因素相关分析和多因素逐步回归分析均显示,血清AOPP水平与颈动脉IMT、切面内膜中层面积呈正相关(r=0 332,r=0 288,P值均小于0 05;β=0 313,P<0 001;β=0 301,P<0 01)。CKD患者血清AOPP水平与丙二醛、C 反应蛋白呈正相关(r=0 300,P=0 01;r=0 255,P<0 05 ),与血清GSHPx呈负相关(r=-0 647,P<0 01 )。结论CKD患者普遍存在高AOPP血症,血清AOPP水平随肾功能减退而增高,并与CKD患者动脉粥样硬化密切相关。

晚期糖基化终产物受体的结构和功能

晚期糖基化终产物受体 (RAGE)是一种膜蛋白 ,属于免疫球蛋白家族 ,由 4 0 0多个氨基酸组成 ,分子量为 35kD ,分胞外段、跨膜段和胞内段 ,在单核巨噬细胞、血管内皮细胞、肾系膜细胞、神经细胞及平滑肌细胞等细胞中普遍表达。RAGE作为信号转导受体介导晚期糖基化终产物 (AGE)和其配体在细胞表面结合 ,激活细胞内多种信号转导机制 ,在糖尿病慢性并发症、透析相关性淀粉样变 (DRA)、阿尔采末病 (AD)、动脉粥样硬化等疾病发生中起重要作用。对RAGE结构和功能的认识可能为这些疾病的防治提供新的靶位 。

单核细胞RAGE表达上调:慢性肾功能衰竭微炎症的机制

目的 探讨慢性肾功能衰竭 (CRF)时细胞表面晚期糖基化终产物 (AGE)受体 (RAGE)的表达及其在单核细胞介导的炎症反应中的作用。方法 96例非糖尿病CRF患者的断面队列研究。用密度梯度离心加免疫磁珠法分离外周血单核细胞 (PMC) ,用特异性抗RAGE抗体染色、流式细胞仪检测PMC表面RAGE表达 ,Scatchard印迹法分析PMC结合AGE的位点数和亲和力 ,用ELISA法测定循环新蝶呤、TNF α、C反应蛋白 (CRP)和AGE水平。结果 CRF患者PMC表面RAGE表达明显上调并随肾功能恶化而增加 (r2 =0 73) ,RAGE上调程度与血浆AGE水平呈正相关 (r =0 71) ;CRF患者PMC与AGE的结合位点数和亲和力明显高于正常人 ,在相同剂量AGE刺激下 ,CRF患者PMC生成的TNF α明显多于正常PMC ,且AGE诱导的TNF α分泌可被抗RAGE抗体所抑制 ;患者PMC表面RAGE表达水平与循环TNF α水平呈正相关 (r=0 6 1) ,与单核细胞活化标志物———新蝶呤 (r=0 6 5 )和急性时相反应蛋白———CRP(r =0 4 4 )呈正相关。结论 CRF患者RAGE表达增加 ,RAGE上调可能通过促发炎症正反馈环导致单核细胞持续活化 ,从而参与CRF由单核细胞介导的全身微炎症反应。

晚期糖基化终产物通过p38信号通路抑制内皮细胞合成一氧化氮的研究

目的 研究晚期糖基化终产物 (AGE)修饰蛋白对内皮细胞生成一氧化氮 (NO)的作用及p38丝裂素活化蛋白激酶 (MAPK)信号传导通路在此病理过程中的作用。方法 用来自培养的人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)和人内皮细胞株ECV30 4。将内皮细胞与不同浓度的AGE修饰人血清白蛋白(AGE HSA)、AGE修饰牛血清白蛋白 (AGE BSA)在体外共同培养。用Griess法检测培养上清的NO水平 ;用免疫沉淀 激酶活性测定法测定细胞p38 MAPK活性。结果 AGE HSA和AGE BSA以时间和剂量依赖的方式抑制内皮细胞生成NO ,同时导致p38信号通路激活 ;未经修饰的HSA和BSA无此作用 ,AGE HSA和AGE BSA的抑制作用亦无明显差异 (P >0 .0 5 ) ;p38通路特异阻断剂SB 2 0 35 80完全阻断AGE修饰蛋白对内皮细胞生成NO的抑制效应 ,提示AGE修饰蛋白对内皮细胞的这一生物学作用是由p38通路介导的。AGE修饰蛋白激活HUVECp38通路。在AGE修饰蛋白作用 10min时 ,p38激酶磷酸化活性明显升高 ,在 30min时到达高峰 ,在 12 0min时回到基础水平。p38磷酸化激酶的磷酸化作用随着AGE修饰蛋白浓度的增高而加强。以ECV30 4细胞株为靶细胞时 ,AGE修饰蛋白对p38通路的活化作用与对HUVEC相同。AGE BSA对内皮细胞p38通路的活化作用与AGE HSA相同。结论本研究证实 ,AGE修饰蛋白能?

晚期糖基化终产物修饰的β_2微球蛋白对人关节滑膜细胞的病理生物学作用

目的 探讨晚期糖基化终产物（ＡＧＥ）修饰的β２微球蛋白（ＡＧＥ－β２ｍ）对人关节滑膜细胞的病理生物学作用。方法 分离、培养正常人关节Ｂ型滑膜细胞，与ＡＧＥ－β２ｍ共同孵育，用ＥＬＩＳＡ法检测培养上清中单核／巨噬细胞趋化蛋白１（ＭＣＰ－１）和ＲＡＮＴＥＳ水平，放射免疫法检测透明质酸（ＨＡ）、层黏蛋白和Ⅲ型前胶原水平，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分析培养细胞 ＭＣＰ－１和 ＲＡＮＴＥＳ的 ｍＲＮＡ表达，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ分析培养上清中 ＨＡ的相对分子质量。结果 ＡＧＥ－β２ｍ以剂量依赖的方式刺激关节滑膜细胞分泌ＭＣＰ－１和ＲＡＮＴＥＳ，同时上调ＭＣＰ－１和ＲＡＮＴＥＳｍＲＮＡ的表达。抗入ＡＧＥ受体（ＲＡＧＥ）ＩｇＧ和Ｂ型滑膜细胞预孵育能明显抑制ＡＧＥ－β２ｍ的上述作用。ＡＧＥ－β２ｍ增加滑膜细胞ＨＡ的分泌量，但在ＡＧＥ－β２ｍ刺激下生成的 ＨＡ的相对分子质量（３３ ０００）明显小于正常 ＨＡ（３７ ０００）。ＡＧＥ－β２ｍ对滑膜细胞层黏蛋白和Ⅲ型胶原分泌无明显影响。结论ＡＧＥ－β２ｍ通过ＲＡＧＥ介导的作用，刺激人类关节Ｂ型滑膜细胞产生ＭＣＰ－１和ＲＡＮＴＥＳ，井促进滑膜细胞分泌炎症性小分子ＨＡ。

甲基乙二醛对人血管内皮细胞的毒性作用

目的 探讨甲基乙二醛(methylglyoxal,MGO)对人血管内皮细胞的毒性作用及其机制。方法 体外培养的人脐静脉血管内皮细胞与不同浓度MGO共同孵育后,通过形态学观察和原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡,并以荧光Annexin-V及碘化丙碇(PI)染色,经流式细胞仪定量检测凋亡细胞和死亡细胞。细胞内氧化水平以氧化敏感的荧光染料2,7-二氢二氯荧光素(DCFH)染色,用流式细胞仪测定。结果 MGO刺激后,内皮细胞形态和超微结构出现凋亡的特异性变化,并且TUNEL染色阳性,流式细胞仪测定显示凋亡细胞和死亡细胞数量与MGO呈时间和剂量依赖关系;同时,MGO刺激后细胞内氧化水平明显升高,其时效与量效关系与细胞凋亡和死亡的变化相似。抗氧化剂(N-乙酰半胱氨酸和丙丁酚)及羰基化合物清除剂(氨基胍)对MGO引起的细胞氧化应激和细胞毒性具有抑制作用。结论 MGO对人血管内皮细胞具有直接的毒性作用,其机制可能是诱导细胞氧化应激。这些结果提示,活性羰基化合物蓄积可能与慢性肾功能衰竭和糖尿病血管并发症的形成有关。

化学修饰蛋白质类尿毒症毒素的检测方法与评价

慢性肾衰竭时,化学修饰的蛋白质,包括晚期糖基化终产物(AGE)修饰的蛋白质、氧化修饰的低密度脂蛋白(ox-LDL)和晚期氧化蛋白产物(AOPP)等,在循环和组织中蓄积.已证实这些被修饰的蛋白参与慢性肾衰竭并发症的形成,如透析相关性淀粉样变、动脉粥样硬化、神经系统和免疫功能异常等.

晚期糖基化终产物修饰的β_2-微球蛋白刺激人关节滑膜细胞分泌促炎症细胞因子

目的 旨在探讨晚期糖基化终产物 (AGEs)修饰的 β2 微球蛋白 (AGE β2 m)对人关节滑膜细胞的病理生物学作用。方法 分离、培养正常人关节B型滑膜细胞 ,与AGE β2 m共同孵育 ,用ELISA法检测培养上清液中肿瘤坏死因子 α(TNF α)和白细胞介素 1β (IL 1β)水平。 结果 AGE β2 m诱导滑膜细胞分泌TNF α和IL 1β ,诱导作用具有时间和剂量依赖规律。抗AGE受体抗体预处理滑膜细胞能明显抑制AGE β2 m引起的TNF α和IL 1β分泌。结论 AGE β2 m通过AGE受体介导的作用 ,刺激人类关节B型滑膜细胞产生TNF α和IL 1β ,这种生物学效应可能参与了透析相关性淀粉样变 (DRA)时关节局部的炎症反应和组织损伤。