婴儿ABO血型的鉴定及应用于临床输血

为了研究 6个月内婴儿ABO血型正确定型方法及影响因素 ,采用常规血清学法、凝胶柱法及PCR SSP 3种方法对 6个月以内的婴儿进行血型鉴定。结果表明 :在使用不同方法检测婴儿ABO血型结果不符的 33例中 ,常规血清学方法 32例红细胞定型与血清定型不符 ,1例是由细菌感染产生类B抗原所致的假相合。凝胶柱法可正确定型 2 7例 ,正确率 84 .4 %。PCR SSP法可对所有标本做出正确定型。凝胶柱法与PCR SSP法有显著性差异。结论 :对 6个月以内的婴儿进行ABO血型鉴定 ,推荐采用凝胶柱技术。凝胶柱法红细胞定型与血清定型相符的婴儿输血采用同型输注 ,但若婴儿患有感染性疾病时 ,应考虑到类B抗原引起的假相合。凝胶柱法红细胞定型与血清定型不符的婴儿输血时使用O型洗涤红细胞等成分血 ,待PCR SSP法分型结果做出后 。

微柱凝胶试验在临床输血中的应用

目的探讨微柱凝胶试验在临床输血中的应用。方法 采用微柱凝胶试验检定ＡＢＯ及ＲｈＤ血型１２０６人次，交叉 配血６８３８人次。结果３１份正反定型不一致的标本中９份假阳性，５份ＲｈＤ（－）中１份弱Ｄ，７８份交叉配血不合的标本 中９份假阳性。结论 微柱凝胶试验可作为临床输血的常规方法。

异体手移植的输血

目的 观察成分输血及去白细胞输血对异体手移植效果的影响。方法 用微柱凝胶技术对输注血进行抗体筛选和交叉配血,在净化间用去白细胞过滤器过滤红细胞悬液。结果 在2例观察病例中,无输血相关的移植物抗宿主病发生。结论 通过成分输血及去白细胞输血,可减少不良反应,尤其是输血相关免疫排斥反应,这是保证移植成功的重要措施之一。

输注IVIG后发生输血相关的急性肺损伤

背景 输血相关的急性肺损伤(TRALI)是住院病人在血成份治疗后发生的一种症状明显的严重并发症。患者的症状和体征常归因于其它临床因素,因此TRALI可能被忽略。IVIG是一种贮存的血浆衍生物,常用于门诊病人。输注IVIG引起的肺并发症,通常是由于输注量过大或过敏和血管舒缩反应。输注IVIG后发生的TRALI还从未报道。个例报道 1例多处运动神经障碍的23岁男性快速输注90g

可溶性HLA-Ⅰ和Fas Ligand分子的体外免疫抑制——它们是否在自体输血中起作用

背景 异体输血的免疫调节作用可使手术的肿瘤患者预后不良,临床试验希望证明自身输血是否使这些病人从中受益。由于异体输血造成的免疫调节作用与白细胞在贮存过程中释放的可溶性HLA有关,我们评估了库存自体血血浆中的可溶性分子在体外的免疫调节活性。研究设计和方法

中国汉族Rh血型基因多态性观察

为了观察中国汉族非血缘关系随机个体和家系Rh血型的基因多态性 ,采用聚合酶链反应 序列特异性引物 (PCR SSP)扩增技术 ,扩增Rh血型C/E基因 ,D基因外显子 ,内含子 2和 10 ,插入片段以及RhBox ,检测 16 0例Rh阳性个体 ,71例Rh阴性个体及 7个先证者为Rh阴性的家系的血样品。研究结果显示 ,带有C抗原的RhD阴性个体D基因结构具有多态性 ,D基因外显子有完整的、部分缺失和完全缺失的 3种形式 ;先证者为RhD阴性的家系中 ,大部分成员均出现插入片段和RhBox ,且在遗传上符合孟德尔遗传定律 ,插入片段或RhBox并未影响D基因的表达 ;全部RhD阴性和阳性个体中没有发现“正常的”RhD外显子 4。结论 :中国人带C抗原的RhD阴性者的基因结构具有多态性 ,具有完全缺失、部分缺失和不缺失 3种情况 ,并可能存在特殊的D(nf)Ce单体型 ;本组样本不能确定插入片段和RhBox与D基因表达有关 ,插入片段和RhBox的生物学功能尚需进一步研究 ;中国汉族的Rh血型基因序列不同于白种人 ,应建立本民族的Rh基因文库。

ABO血型基因分型及应用

目的 :研究ABO血型基因分型的意义。方法 :采用聚合酶链反应 序列特异性引物 (PCR SSP)基因定型方法对ABO血型基因定型并观察其基因多态性分布特征和疑难血型检定。结果 :对已知ABO基因的DNA标本进行基因定型 ,证实文中的ABO基因定型方法可靠 ;对 10 4例健康、无血源关系的汉族个体ABO血型基因定型 ,结果与血清学所定表型完全符合 ;并用ABO基因分型技术解决临床输血前血型鉴定、产前胎儿血型鉴定、亲权试验及血清学亚型的正确性验证。结论

脐血单个核细胞的分离及冻存

研究脐血采集后的放置、单个核细胞的分离、冻存等的影响因素。方法为血液采集后,离心分离单个核细胞,进行冷冻保存及复苏后洗涤。结果优选为采集后4℃或室温放置24小时内,羟乙基淀粉2次离心法分离单个核细胞,50％二甲亚砜加自身血浆为保护剂冻存、复苏后洗涤等程序。结论:本研究的优化方法可有效地保存脐血单个核细胞。

可溶性HLA-Ⅰ的检测及中国人正常值

目的：ｓＨＬＡⅠ可预测器官移植排斥反应及监控某些疾病。为了介绍ｓＨＬＡⅠ类抗原定量检测技术及中国人ｓＨＬＡⅠ正常值。方法：采用ＥＬＩＳＡ双抗夹心法，以Ｗ６／３２ｍＡｂ包被酶标板，加被检血清，再加β２ｍＨＲＰ及底物显色。以不同浓度ｓＨＬＡⅠ标准品的结果绘出标准曲线并测定１１３例正常人ｓＨＬＡⅠ含量。结果：ＥＬＩＳＡ法可以准确定量测定血清中ｓＨＬＡⅠ，中国人ｓＨＬＡⅠ正常值为７８９２７±５０６３２ｎｇ／ｍｌ。结论：ＥＬＩＳＡ法检测ｓＨＬＡⅠ具有特异、敏感及重复性。

mPEG-BTC对血小板表面HLA抗原的化学修饰

目的 :研究mPEG有效修饰血小板表面HLA抗原的方法及效果。方法 :在 2 2℃、pH 7.4的PBS介质中 ,采用浓度梯度法修饰血小板表面的HLA抗原。并分别用处理前后的血小板吸收血清中的相应抗体 ,通过微量混合淋巴细胞毒试验检测化学修饰的效果。结果 :经mPEG处理后的血小板无吸收血清中相应抗体的能力 ,微量淋巴细胞毒试验为阳性 ;未经mPEG处理的血小板则与之相反。结论 :血小板表面的HLA抗原经mPEG修饰后 。

可溶性HLA-I检测技术和贮存血中可溶性HLA-I的浓度变化观察

本研究建立可溶性人类白细胞抗原 I类 (sHLA I)检测方法 ,并探讨贮存血中sHLA I浓度变化的意义。采用ELISA双抗夹心法定量检测 6 0例正常广东人血清中sHLA I水平和 2 0例献血员成分血中sHLA I含量。结果表明 :采用本技术时 ,可溶性HLA I最低检测限为 2 .84ng ml,批内变异系数为 5 .80 % ,批间变异系数为 9.0 0 % ,回收率≥ 98 5 7% ,广东人sHLA I平均值为 (6 99.5 4± 36 0 .10 )ng ml。贮存 2 8天的RBC和随机供者血小板的sHLA I的浓度明显高于其它成分血 ,并且与成分血中残存的白细胞数和贮存时间有关。结论 :用ELISA法检测可溶性HLA I灵敏、特异、稳定 ,在临床输血过程中可考虑选择性输注含有不同浓度可溶性HLA I的成分血。

人RHD基因Rhesus盒的检测及其意义

为了解人RHD基因的组合情况 ,进一步研究RHD基因遗传结构和预测新生儿溶血病 ,采用PCR SSP方法 ,设计 4条引物 ,用同一PCR反应条件同时检测人RHD基因的上游、下游和杂交的Rhesus盒。结果显示 :RHD- RHD- 纯合子个体只检出杂交Rhesus盒 ,无上、下游Rhesus盒 ,RHD+ RHD- 杂合子个体能同时检出上、下游和杂交Rhesus盒 ,RHD+ RHD+ 纯合子个体只检出上、下游Rhesus盒 ,无杂交Rhesus盒。 5 0例RhD阳性样本中5例 (10 % )为RHD+ RHD- 型 ,其余 (90 % )均为RHD+ RHD+ 型。 98例无血缘关系RhD阴性汉族人样本中 ,5 4例(5 5 .1% )为RHD- RHD- 纯合子 ,36例 (36 .7% )为RHD+ RHD- 杂合子即RHD基因单体型 (可用于对RHD基因单体型进一步分析 ) ,8例 (8.2 % )为RHD+ RHD+ 纯合子。 2例弱D型样本同时检出上、下游和杂交Rhesus盒 ,为RHD+ RHD- 型。 16例Del型中 10例 (6 2 .5 % )同时检出上、下游和杂交Rhesus盒 ,为RHD+ RHD- 型 ,6例 (37.5 % )只检出上、下游Rhesus盒 ,无杂交Rhesus盒 ,为RHD+ RHD+ 型。这些样本RHD基因 10个外显子的检测结果验证了本方法的正确性。结论 :本方法所需引物少 ,操作简便 ,结果判断直观 ,适合临床应用。在RhD阴性中国汉族人中存在为数不少的RHD无效基因

通用血小板的研究

目的研究有效修饰血小板表面HLA的方法。方法采用浓度梯度法用mPEG修饰血小板表面HLA。通过微量淋巴细胞毒试验检测修饰效果,并对血小板功能进行检测。修饰后血小板输注到中国白兔体内检测血小板计数。结果mPEG可有效修饰血小板表面HLA,黏附与聚集能力分别由修饰前的(30.2±5.59)%和(1.43±0.74)%升至修饰后的(45.5±2.72)%,(3.86±1.21)%,Ca2+释放无显著差异。中国白兔输注修饰血小板24h时血小板升高指数及血小板回收率分别为69.93±11.20和(52.06±10.92)%。结论mPEG修饰可有效阻断血小板表面HLA与其相应抗体的结合,修饰后血小板黏附及聚集功能有所增强,Ca2+释放功能不受影响,中国白兔输注修饰后血小板计数增高。

抗-Ce引起第1胎新生儿溶血病1例报告

Rh血型抗体引起的新生儿免疫性溶血性疾病(hemolytic disease of the newborn,HDN)主要发生在第2胎,但如果孕妇有输血史或流产史也可发生在第1胎,另外,少数Rh阴性母亲的母亲(外祖母)为Rh阳性,其红细胞可使母体致敏,导致第1胎发病.现报道1例因母亲有输血史发生的第1胎抗-Ce引起的HDN.

中国汉族人及维吾尔族人Rh血型基因结构多态性研究与分析

目的 研究中国汉族及维吾尔族家系的RHD基因结构。方法 采用聚合酶链反应 -序列特异性引物扩增 (PCR -SSP)方法 ,对汉族和维族Rh阴性家系的D基因结构多态性进行研究。结果 中国人RHD基因结构具有多态性 ,特别是带有C的个体 ;82例RHD血清学阴性个体中 ,完整携带十个外显子的有 14个样本 ,部分携带的有 6个样本 ,8个样本为完全缺失。结论 中国汉族人群与高加索人种有着显著的不同 。