多基因PCR检测产毒性大肠杆菌和志贺氏菌的研究

为了提高普通的单基因ＰＣＲ检测致病性肠道杆菌的时效，采用ＥＴＥＣ４４８１３（ＬＴ）、ＥＴＥＣ１９４４９（ＳＴ）和福氏２ａＴ３２（ｉｐａＨ）３个标准株为模板，建立了检测产毒性大肠杆菌（ＬＴ，ＳＴ）和志贺氏菌的三基因ＰＣＲ方法。并分别用相应单基因ＰＣＲ方法标记的探针斑点杂交标准株ＥＴＥＣ４４８１５（ＬＴ）、工程株ＰＳＬＭ００４（ＳＴ）和标准株４８０２５１１（ｉｐａＨ）。杂交的结果都是阳性，证实了这个多基因ＰＣＲ扩增是特异的。并用此三基因ＰＣＲ反应系统检测１１３株ＥＴＥＣ和志贺氏菌，结果是ＬＴ２５株、ＳＴ１６株、ＬＴ和ＳＴ共３０株及ｉｐａＨ４２株。在几种病原体可能共存的样本中，用一次ＰＣＲ就能解决病原体的检测和鉴别问题，比单基因ＰＣＲ更快速、经济。

江门市福氏2a菌痢暴发的RAPD分析

首次采用随机PCR（RAPD）技术分析了1994年广东省江门市一起菌痢暴发期间分离的福氏2a暴发株和密切接触者分离株。结果表明：此次菌痢暴发期间分离的12株福氏2a暴发株具有三种不同的RAPD特征（RSⅠ、RSⅣ、RSⅤ），其中J9406（RSⅠ）和J9420（RSⅣ）分属不同克隆。提示：此次菌痢暴发中少数患者可能并非真正的暴发病例，之所以被归入暴发事件之中，可能是一种空间与时间上的偶合。同期分离的14株密切接触者分离株包含五种不同的RAPD特征（RSⅠ、RSⅡ、RSⅢ、RSⅣ、RSⅤ），进一步证实部分密切接触者感染的福氏2a并非来自所接触的病例。相对于质粒分析而言，RAPD分析具有更高的分辨率，它提供的遗传学信息更为丰富、直接、精细。

三基因PCR检测产毒性大肠杆菌和志贺菌的研究

三基因ＰＣＲ检测产毒性大肠杆菌和志贺菌的研究赵敏俞守义王红王雅贤吴敏在发展中国家，每年大约有五百万左右的儿童和婴儿死于急性腹泻［１］。这种疾病的致病因素主要是产毒性大肠杆菌（ＥＴＥＣ）和志贺菌。ＥＴＥＣ在生长繁殖过程中释放出耐热肠毒素（ＳＴ）和不耐热...

多重聚合酶链反应检测产毒性大肠杆菌三种毒力基因

目的提高普通的单基因聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测产毒性大肠杆菌（ＥＴＥＣ）的时效。方法以ＥＴＥＣ４４８１３（ＳＴｐ＋）、ＥＴＥＣ１９４４９（ＳＴｈ＋）和ＥＴＥＣ４４８１５（ＬＴ＋）三个标准株为模板，建立了检测产毒性大肠杆菌多重ＰＣＲ扩增系统。结果杂交工程株Ｈ１０９０７（ＳＴｐ＋），ＰＳＬＭ００４（ＳＴｈ＋）和ＰＭＭ０３０（ＬＴ＋），杂交的结果都是阳性，５４株菌株经ＰＣＲ检测，其中ＬＴ＋８株、ＳＴｐ＋２株、ＳＴｈ＋７株、ＬＴ＋＋ＳＴｐ＋１０株、ＬＴ＋＋ＳＴｈ＋１０株、ＳＴｐ＋＋ＳＴｈ＋４株和ＬＴ＋＋ＳＴｐ＋＋ＳＴｈ＋１３株。结论用一次ＰＣＲ扩增可检测和鉴别ＥＴＥＣ，比单基因ＰＣＲ更加快速、经济。