培养大鼠皮层神经元创伤性损伤后NADPH-d组化反应研究

目的：研究创伤性损伤后大脑皮层细胞ＮＡＤＰＨ－ｄ组化反应变化情况，探讨继发性脑损伤的某些机制。方法：用机械划痕法创伤性损伤混合培养１０ｄ的大鼠大脑皮层神经细胞，采用ＮＡＤＰＨ－ｄ组化染色和ＮＳＥ免疫组化染色法观察神经元和胶质细胞中的一氧化氮（ＮＯ）产生情况。结果：正常培养皮层神经元中有少量ＮＡＤＰＨ－ｄ阳性反应神经元，创伤性损伤后阳性反应神经元数量增加；胶质细胞中有ＮＡＤＰＨ－ｄ阳性反应，在创伤性损伤混合培养皮层神经元创道周围，ＮＡＤＰＨ－ｄ阳性反应明显强于其它部位。结论：创伤可致神经元和胶质细胞过量产生和释放ＮＯ并在继发性脑损伤中可能具有重要意义。

CBD和尼莫地平对培养大鼠皮层神经元损伤的保护作用

目的 研究一种神经营养物质CBD和尼莫地平（Nimodipine，Nim）联合应用对培养大鼠皮层神经元损伤的保护作用。方法 分别采用谷氨酸化学或机械划痕创伤性损伤培养大鼠皮层神经元，根据培养细胞台盼蓝活力计数和培养上清乳酸脱氢酶（LDH）检测评估损伤程度。结果 CBD和Nim单独应用时，对谷氨酸和创伤介导的培养皮层神经元损伤有中等程度的保护作用，与单独损伤未加保护性药物组相比较有显著性差异（P<0.01）。CBD和Nim联合会用时，保护作用比单独应用明显增强（P<0.01）。结论 CBD和Nim联合应用有明显的协同作用。

一种体外培养大鼠皮层神经元创伤后继发性损伤模型的建立

目的 建立一种简便的体外培养大鼠神经元创伤性损伤模型。方法采用机械划痕创伤性损伤培养大鼠皮层神经 元，根据培养细胞锥虫篮活力计数和培养上清乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）检测评估损伤程度，用中性红复染确定未损伤细胞。结 果创伤性损伤培养神经元后，锥虫篮细胞活力计数和培养上清ＬＤＨ检测对损伤程度的判定具有显著的相关性，远离 创道未直接损伤区域的神经元可产生继发性损伤。结论本模型可用于体外研究神经元创伤后原发性和继发性损伤。

成年大鼠脑内5-HT能神经纤维向胎鼠脑皮层移植物内投射的研究

目的:探讨大鼠胎脑皮层组织同种移植后的存活情况,以及宿主脑组织与移植物之间是否能建立神经纤维联系.方法:移植受体(宿主)为正常雄性成年Wistar大鼠,移植供体取自胎龄15～17d的Wistar孕鼠.在移植手术后不同时间取脑切片,用ABC法进行免疫组织化学染色,显示5-HT能神经纤维及其在宿主脑内和移植物中的分布情况.结果:同种胎鼠脑皮层组织移植后存活率为30%,ABC法显示有5-HT能神经纤维从宿主脑组织长入移植物中.结论:同种胎脑皮层组织移植后移植物与宿主脑组织可以建立神经纤维联系.

大鼠隔核中肽能神经元的分布与形态测量

用免疫组织化学方法研究了大鼠隔核各亚核中降钙素基因相关肽,血管活性肠肽,生长抑素,神经降压肽,促皮质释放因子,P物质,亮氨酸-脑腓肽,黄体生成素释放因子,甘丙肽,胆囊收缩素,促甲状腺素释放因子,甲硫氨酸-脑腓肽,等12种肽能神经元的分布,并用图象分析仪对肽能神经元的面积,周长,最大径,最小径和灰度进行了测量.肽能神经元主要分布在外侧隔核中间部,内侧隔核;而隔伞核及三角隔核中较少.图象分析仪测量表明隔核中肽能神经元的面积,周长,最大径,最小径和灰度各不相同,有显著的统计学差别.

大鼠纹状体边缘区P物质受体的免疫细胞化学研究

目的 研究大鼠纹状体边缘区的结构与功能.方法 用免疫细胞化学技术对大鼠脑切片内P物质受体的定位分布进行研究.结果 P物质受体阳性胞体和树突在中枢神经系统有不均匀分布.纹状体边缘区内有较强P物质受体阳性胞体和树突,典型的梭形细胞沿背腹方向行走.结论 边缘区内有P物质受体的分布.推测边缘区内P物质递质有接受、整合功能.

经眼上静脉入路行海绵窦栓塞的应用解剖学

目的:为经眼上静脉入路行海绵窦栓塞术,治疗颈动脉-海绵窦瘘提供解剖学依据.方法:成人头部标本24个,解剖观测眼上静脉及其眶外属支的形态、长度及外径等.结果:①眼上静脉由眶上静脉支和内眦静脉交通支组成.眶上静脉支穿经眶上孔处外径为1.3mm.内眦静脉外径为1.4mm,距内眦6～8mm,其交通支外径为14mm.②眼上静脉在眶内分为3段,外径平均达2.1～2.5mm.

大鼠纹状体边缘区传入投射细胞的免疫组化特性

用WGA-HRP逆行标记和免疫组化双标记法研究了大鼠纹状体边缘区传入投射胞体部位及性质.当WGA-HRP注射于纹状体边缘区后再进行免疫组化时,在黑质外侧部及其背外侧区的脚周核和丘脑后板内核可见逆行标记胞体,并在这些核中见到WGA-HRP和P物质,胆囊收缩素,神经降压肽,亮氨酸-脑腓肽及酪氨酸羟化酶的双标记细胞.推测这些投射细胞可能和运动,感觉及记忆功能有关.

脂多糖诱发急性肺炎时中性粒细胞碱性磷酸酶细胞化学定位观察

目的 探讨脂多糖诱发急性肺炎时 ,大白鼠中性粒细胞碱性磷酸酶 (alkaline phosphatase,AL P)的超微定位及其在炎症过程中的相关功能。 方法 采用腹腔内 (intraperitoneal,IP)注射及气管内 (intratracheal,IT)滴注脂多糖 (lipopolysaccharide,L PS,一种提自大肠杆菌的内毒素 )的方式诱发大白鼠急性肺炎 ,使中性粒细胞在肺内不同部位集聚。用铈作为捕捉剂 ,以检测 AL P活性。对照组为介质中除去底物或加入 2 m mol/L左旋咪唑。电镜下行酶活性定位观察。 结果 IP注射主要导致中性粒细胞在鼠肺肺泡隔毛细血管内集聚 ,而 IT注射多致中性粒细胞聚集于肺泡腔中。在偶见的非炎区肺内中性粒细胞 ,AL P活性产物主要以小球状或管状的膜包颗粒存在于胞质中。L PS腹腔内注射组中 ,AL P活性除出现于胞质内 ,还呈现于中性粒细胞的质膜表面 ;在气管内给药组 ,与毛细血管内皮细胞或肺泡上皮细胞相接触的中性粒细胞质膜表面 AL P活性有所增强 ,而肺泡腔的中性粒细胞质膜表面 AL P活性减弱。在各组标本中 ,对照组均为 AL P阴性。 结论 大鼠肺中性粒细胞 AL P活性可经 L PS注射而增强 ,其活性可能和细胞与细胞间的粘连、细胞外环境以及与细胞的功能状态有关。

培养大鼠脑皮层神经元损伤后c-fos蛋白表达

目的观察培养的大鼠皮层神经元损伤后ｃ－ｆｏｓ蛋白表达，探讨其在继发性脑损伤中的作用。方法混合培养１０～１２天ＳＤ胎鼠的皮层神经元分别用谷氨酸和机械划痕损伤。采用ＳＰ法进行免疫组化双重标记反应。结果谷氨酸作用后２小时，ｃ－ｆｏｓ蛋白开始表达，４小时后在核中明显浓聚。创伤后２小时仅在创道边缘直接损伤部位有ｃ－ｆｏｓ蛋白表达，远离创道未直接损伤区的神经元在创伤后４小时才出现；少数神经元突起远端有明显ｃ－ｆｏｓ蛋白颗粒；损伤后６小时神经元突起开始崩解，但ｃ－ｆｏｓ蛋白颗粒仍未消失。结论谷氨酸损伤可引起培养的神经元ｃ－ｆｏｓ蛋白的大量表达，损伤后培养皮层神经元和胶质细胞可以释放出神经毒性物质。

中枢神经系统基因治疗及其途径

本文就总体及局部性ＣＮＳ神经退行性紊乱及脑卒中的治疗潜力，概述了以病毒为载体的ＣＮＳ治疗基因转染技术、经基因水平调整后的细胞移植技术、胚胎移植和／或经基因工程技术处理过的神经前体细胞（ｎｅｕｒａｌ ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ ｃｅｌｌｓ）移植术；以及对疾病过程中产生特殊酶类、神经递质和／或生长因子等产物的治疗潜力等。