人血管内皮生长因子受体胞外1-3、2-3 loop cDNA在酵母中的表达及其生物学活性研究

目的 在酵母中实现人血管内皮生长因子 (hVEGF165)受体FLT 1胞外 1 3及 2 3loopcDNA的高效分泌性表达 ,并比较两种表达产物的生物学活性。方法 构建酵母重组表达质粒pPIC9K/FLT 1(1 3)及pPIC9K/FLT 1(2 3) ,并分别转化酵母宿主菌GS115。表达产物经CM SepharoseFF阳离子交换层析和SephacrylS 10 0分子筛层析纯化后测定其生物学活性。结果 SDS PAGE显示 ,表达产物以可溶性分子形式存在于上清中 ,诱导 4d的表达量占上清总蛋白的 6 0 %以上。表达的sFLT 1(1 3)及sFLT 1(2 3)都具有结合hVEGF165的能力和抑制hVEGF165对人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)的促增殖功能 ,其中前者的作用虽较强 ,但二者相差不大。结论 获得了具有生物学活性的可溶性重组FLT 1受体胞外区 1 3及 2 3loop小片段 。