基因芯片技术在恶性血液系统疾病研究中的应用

基因芯片是用微阵列技术将大量ＤＮＡ片段通过机器人或原位合成方式以一定的顺序或排列方式使其附着在如玻璃、硅等固相表面制成的高密度ＤＮＡ微点阵。用荧光物质标记的探针,借助碱基互补原理与基因芯片杂交,可进行大量的基因表达及监测等方面的研究,基因芯片技术在基因诊断、基因表达、基因突变、发现新基因及各种病原体的诊断等生物医学领域中具有重大的应用价值。本文简要综述基因芯片的分类、制作原理及基因芯片技术在恶性血液系统疾病研究中的应用。

DNA芯片技术在恶性血液系统疾病研究中的应用

DNA芯片是近年发展起来的生物高新技术,其基本原理是运用微阵列技术将大量DNA片断附着在固相载体表面或原位合成寡核苷酸制成高密度DNA微点阵,用标记探针与其杂交,进行高通量的基因检测。目前DNA芯片技术已日趋成熟并且应用于基因组水平进行基因表达、突变、测序和多态性分析等。本文对DNA芯片技术在白血病和淋巴瘤研究中的应用进行介绍。

血管内皮细胞生长因子影响难治性急性髓系白血病发生发展的作用研究

背景和目的:难治性白血病的发生发展机制非常复杂,近年来发现白血病患者骨髓过度表达血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF),但VEGF如何影响难治性白血病尚未明确。本研究探讨高表达VEGF对人急性髓系白血病细胞株HL-60增殖及三尖杉酯碱诱导HL-60细胞凋亡影响;观察难治性急性髓系白血病(acutemyeloidleukemia,AML)中VEGF蛋白表达与疾病发展的相关性。方法:采用脂质体转染VEGF165cDNA入HL-60细胞,通过RT-PCR及ELISA方法鉴定转染克隆HL-60/VEGF165细胞中VEGFmRNA及蛋白的表达,MTT法、集落形成实验比较HL-60/VEGF165及转染pcDNA3.1-neo空载体的HL-60/neo细胞增殖活性,流式细胞仪观察三尖杉酯碱诱导的细胞凋亡。用ELISA法检测难治性与非难治性AML患者血浆中VEGF蛋白浓度。结果:HL-60/VEGF165细胞培养上清中VEGF蛋白浓度为(399.07±12.45)ng/L,高于HL-60/neo细胞(184.45±10.53)ng/L(P<0.01)。HL-60/VEGF165细胞与HL-60/neo细胞相比生长速度明显加快,集落形成能力明显增加,集落数分别为(157.00±17.00)/500细胞和(110.00±12.90)/500细胞(P<0.05);而细胞凋亡率减少,分别为(3.18±0.33)%和(6.61±0.50)%,三尖杉酯碱诱导HL-60/VEGF165细胞凋亡率低于HL-60/neo细胞。

香菇多糖联合CHOP方案治疗非霍奇金淋巴瘤

目的探讨香菇多糖联合CHOP方案治疗非霍奇金淋巴瘤的临床疗效。方法60例非霍奇金淋巴瘤患者分为两组:治疗组32例应用香菇多糖联合CHOP方案化疗,对照组28例只给予CHOP方案化疗。观察两组完全缓解率、总有效率、免疫功能和不良反应。结果治疗组完全缓解率为81.25%,对照组为50.00%,两组间有差异性(P<0.05),治疗组总有效率为87.50%,对照组为67.86%,两组间有差异性(P<0.05)。治疗后免疫功能治疗组与对照组相比有差异性。治疗组未见严重不良反应。结论香菇多糖联合CHOP方案治疗,能提高非霍奇金淋巴瘤的完全缓解率和总有效率,保护患者免疫功能。

(C57BL/6×615)F1代小鼠L615白血病模型的建立

目的 了解 L6 15白血病细胞株能否在 (C5 7BL/ 6× 6 15 ) F1小鼠体内建立白血病模型。方法 雄性 6 15小鼠与雌性 C5 7BL / 6小鼠采用长期同居法培育 (C5 7BL / 6× 6 15 ) F1小鼠 ,6 15、F1小鼠分别经腹腔接种不同数量 L 6 15白血病细胞株 ,观察其白血病发病情况 ;取发病濒死 F1小鼠脾脏 ,制备脾细胞悬液 ,按不同数量经腹腔注射分别接种予 F1小鼠 ,观察白血病发病情况。结果 (C5 7BL/ 6× 6 15 ) F1小鼠接种 L6 15白血病细胞后 10 0 %发病 ,L6 15白血病细胞可在 (C5 7BL/ 6× 6 15 ) F1小鼠体内传代。结论 L6 15白血病细胞株能在 (C5 7BL/ 6× 6 15 )

药物性中性粒细胞减少症患者病因分析及对策

笔者分析了38例药物性中性粒细胞减少(不包括抗肿瘤药物所致)患者的用药史、家族史及文化背景,发现有14例存在滥用药,6例有家族过敏史,11例对疾病用药情况及相关检查认识不够,其余7例与间断用药有关。采取向患者强调遵医嘱用药的重要性,加强用药宣教,仔细询问病史,教育特殊病人慎用药等措施以降低该病的发生率。

STI571体外对急性非淋巴细胞白血病患者骨髓细胞c-kit表达的影响

为了探讨STI5 71体外对急性非淋巴细胞白血病患者骨髓细胞c kit表达的影响 ,采用逆转录 聚合酶链反应及流式细胞术分别测定不同浓度STI5 71处理前后骨髓细胞c kitmRNA及CD117的表达。结果表明 :c kitmRNA及CD117的表达于STI5 71作用后呈浓度依赖性下降 ,培养后各药物浓度组与培养前及对照组之间都存在显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,且 0 .1μmol/L组的表达明显高于 10 μmol/L组 ,而空白对照组与培养前差异不显著。结论 :STI5 71在体外对急性非淋巴细胞白血病患者骨髓细胞c kitmRNA及CD117抗原的表达有明显的抑制作用 。

白血病+8染色体异常的研究现状

+8作为最常见的白血病非随机性染色体异常之一,与白血病的发生、发展必然存在某种潜在联系。本文就白血病+8染色体异常流行病学情况及其作用机制的研究现状作一综述。

逆转录病毒载体介导的人IL—2基因转染白血病细胞的初步研究

应用逆转录病毒载体ＬＮＣＩＬ－２介导答ＩＬ－２基因转染人白血病细胞株Ｋ５６２，ＨＬ－６０，并获得稳定表达；观察到转染ＩＬ－２基因后的Ｋ５６２，ＨＬ－６０细胞，的生长速度明显落后于未转该基因或转染突载体的Ｋ５６２，ＨＬ－６０细胞。

止血汤治疗血友病甲后凝血指标的变化

目的:探测中药止血汤治疗血友病患者后血浆凝血酶原时间/国际标准化比率(PT/INR)、部分凝血活酶时间(APTT)、简易凝血活酶生成时间(STGT)、凝血酶时间(TT)、凝血因子Ⅷ活性(FⅧ:C)等凝血指标的变化及其临床意义。方法:用中药止血汤治疗13例血友病甲患者,治疗前、后分别用凝血一期法测定PT、APTT、FⅧ:C、STGT等指标。结果:治疗后病人的临床症状明显好转,PT、APTT、STGT较治疗前缩短,FⅧ:C增高,但治疗后与正常组相比较,APTT、STGT显著延长,FⅧ:C处低水平。结论:止血汤治疗血友病有效的机理可能为:通过低调TFPI水平增强外源性凝血途径.补偿内源性凝血途径功能的缺陷。

STI571体外对急性非淋巴细胞白血病细胞分化及c-kit表达的影响

目的 :探讨STI5 71对ANLL白血病细胞c-kitmRNA表达及细胞分化的影响。方法 :不同浓度STI5 71培养前后逆转录 -聚合酶链反应方法测定c -kitmRNA的表达 ,涂片吉姆萨染色及过氧化物酶染色观察细胞的分化情况。结果 :①培养后不同药物浓度组的粒细胞及单核细胞均有不同程度的分化 ,随着药物浓度的增加 ,原早幼粒细胞逐渐减少 ,中晚幼粒和成熟单核细胞数增加 ,有诱导向同系成熟分化作用 ,并且过氧化物酶染色阳性程度增加 ;②c -kit受体mRNA的表达培养前 2 .2± 0 .4 9,培养后 (对照、0 .1、1、10 μmol·L-1)浓度组c-kitmRNA表达的平均值分别为 2 .1± 0 .6、1.2± 0 .4、0 .8± 0 .4、0 .5± 0 .2 ,培养前与培养后各药物浓度组有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,各浓度组与对照组之间差异显著 (P <0 .0 5 ) ,且 0 .1μmol·L-1与 10 μmol·L-1两个浓度组之间差异显著 (P <0 .0 5 )。结论 :STI5 71对急性非淋巴细胞白血病原代细胞有诱导向同系成熟分化作用 ,对c -kit酪氨酸激酶有明显的抑制作用 ,且与药物浓度相关。

CD_(34)^+造血干细胞混合CD_3^+ T细胞移植分离移植物抗宿主病和移植物抗白血病效应

目的 探讨在异基因造血干细胞移植中能否采用纯化 CD34 + 造血干细胞混合一定量纯化 CD3+ T细胞移植达到既控制移植物抗宿主病 (GVHD)又保留移植物的抗白血病效应 (GVL )。 方法 (C5 7BL /6× 6 15 ) F1代接种 L 6 15白血病细胞株建立小鼠白血病模型作为移植受鼠 ,利用免疫磁珠纯化骨髓 CD34 + 造血干细胞及脾脏CD3+细胞 ,流式细胞仪分析纯化前后 CD34 +、CD3+细胞百分比 ,观察单纯移植 CD34 +细胞及混合不同数量级 CD3+细胞后受鼠生存时间、GVHD、GVL效应 ,移植后骨髓造血重建细胞来源。 结果 纯化 CD34 + 细胞 1× 10 6 移植组10 0 %死于白血病复发 ;CD34 +细胞 +纯化 CD3+细胞 (1× 10 7)移植组生存期明显延长 ,5 0 %死于白血病复发 ,无GVHD表现 ;CD34 + 细胞 +CD3+ 细胞 (5× 10 7)移植组长期存活 ,无白血病复发 ,无 GVHD表现 ;CD34 + 细胞 +CD3+细胞 (1× 10 8)移植组 6 2 .5 %死于 GVHD,37.5 %长期存活 ;CD34 + 细胞 +CD3+ 细胞 (1.5× 10 8)移植组 10 0 %死于GVHD。移植后生存时间 >6 0 d的受鼠骨髓造血重建细胞 y染色体检出率为 10 0 %。 结论 移植物中 CD3+细胞数量与 GVHD和 GVL效应密切相关 ,通过限定移植物中的 CD3+ 淋巴细胞的含量能够保留

急性白血病患者应用套管针效果分析

急性白血病(AL)患者由于反复进行化疗,机体抵抗力低,在应用套管针后易造成一些并发症,为探讨影响套管针使用的相关因素及防治对策,我们对64例次AL患者应用套管针情况进行了分析,发现化疗药物浓度、血管部位的选择及血管重复使用、白细胞数过低均影响套管针优越性的发挥.为此在使用套管针时应选择弹性好且较直的血管轮流使用,对靠近关节及细小静脉仍主张使用头皮针;对输注局部组织刺激性强的药物,输注前后均用生理盐水冲管,并将药液稀释后滴入;加强穿刺部位的护理,创造条件促进血管修复.