非清髓性供者造血干细胞移植对肾移植受者免疫功能的影响

目的:探讨肾移植受者进行非清髓性供者造血干细胞移植诱导免疫耐受、降低排斥反应的有效性、安全性。方法:根据ABO/Rh血型相同及HLA氨基酸残基配型相容原则,将同期等待肾移植的96例女性慢性肾功能衰竭患者随机分为观察组和对照组,各48例。观察组接受同一供体的骨髓-肾联合移植;对照组接受上述供体的肾移植。应用流式细胞术检测外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD4+CD25+细胞百分比,应用酶联免疫吸附法检测IL-10、TNF-α浓度。结果:移植后随着时间延长,观察组CD3+、CD4+、CD19+细胞百分比及TNF-α浓度持续降低,与对照组相比,60 d后CD3+、CD4+、CD19+下降最明显(P<0.05),之后稳定在一个水平;观察组CD8+降低不明显,但CD4+/CD8+比值明显降低;观察组CD4+CD25+百分比及IL-10浓度持续升高,与对照组相比,CD4+CD25+百分比90 d时升高最明显(P<0.05),IL-10浓度30 d时升高最为明显(P<0.05)。观察组急性排斥发生率为12%,对照组为29%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:供体特异性造血干细胞移植是一种安全、有效地诱导肾移植免疫耐受的临床治疗方法,能够降低排斥反应的发生,但更深层次的免疫机制有待进一步探讨。

造血干细胞输注在肾移植中的临床应用

对1998年2月至2005年12月行供者肾脏、造血干细胞联合移植（联合移植组，48例）和同一供者肾脏移植（对照组，48例）患者进行术后移植肾存活率（剔除带功死亡者）随访比较。术后1、3、5及10年，移植肾存活率联合移植组分别为98％（47／48）、94％（45／48）、83％（34／41）和9／17，对照组分别为98％（47／48）、90％（43／48）、76％（31／41）和7／17。慢性排斥反应的发生，联合移植组为2％（1／48）、对照组为17％（8／48）（P〈0．05）。供者造血干细胞输注能诱导肾移植患者免疫耐受产生,减少排斥反应的发生,提高患者的生存质量。

-80℃低温冻存保护剂对不同来源的造血干细胞体外冻存效果分析

目的分析-80℃体外冻存保护体系对不同来源的造血干细胞的冻存效果。方法以国产或进口药用二甲基亚砜(DMSO)、羟乙基淀粉(HES)、人血白蛋白(HSA)配制细胞冷冻保护剂,分别对人外周血、纯化的CD34+、骨髓及脐血造血干细胞进行-80℃低温保存,冻融前、后计数MNC、CD34+细胞、CFU-GM数量、回收率及台盼蓝拒染率,了解其生理活性。结果 4种来源的造血干细胞各30例,以120g/L HES加10%(V/V)DMSO和64g/L HSA为保护剂-80℃冻存360d,观察组与对照组在冻融前、后MNC、CD34+细胞、CFU-GM数量、回收率及台盼蓝拒染率无统计学意义(P>0.05)。应用国产试剂对118例外周血干细胞、39例纯化CD34+造血干细胞、3例脐血干细胞进行-80℃低温冻存1～9个月,进行冻存的造血干细胞移植,移植后7～19d内均成功恢复造血重建。结论以120g/L HES加10%(V/V)DMSO和64g/L HSA为细胞冷冻保护剂,能够良好保持干细胞数量及生理活性,且国产试剂与进口试剂无显著差别,具有价格低廉,容易购买,低毒安全,操作简便等特点,可临床应用于造血干细胞-80℃低温短期保存。

SSOP基因分型对HLA-AB血清学纯合型结果的校证

目的 建立快速、准确的人类白细胞抗原 (HLA)基因分型技术 ,解决血清学分型局限性。方法 选择HLA -A、B血清学分型纯合型标本 ,应用聚合酶链式反应 -序列特异性寡核苷酸探针杂交 (PCR -SSOP)技术进行基因分型。结果 4 2例HLA -A、4 5例HLA -B血清学纯合型标本 ,经SSOP基因分型 ,其中分别有 3例和 8例为杂合型。结论 SSOP基因分型具有特异性更强、灵敏度更高、结果更为准确可靠等优点 ,是取代传统血清学分型方法较为优越的技术之一。

CliniMACS系统进行CD^＋34造血干细胞阳性富集的应用评价

目的探讨CliniMACS系统进行CD^＋34造血干细胞阳性富集的有效性、安全性及应用效果。方法对39例实体瘤和自身免疫性疾病患者动员后采集的外周血干细胞进行了CliniMACS系统阳性富集的CD^＋34自体造血干细胞移植。结果阳性富集后CD^＋34细胞纯度平均可达89．8％，CD^＋34细胞平均回收率达78．9％，粒细胞-巨噬细胞集落形成单位（CFU—GM）数量为（15．0±7．0）×10^5／kg，阳性富集前、后细胞胎盘蓝拒染率比较差异无统计学意义，保持了细胞良好的生物学活性，移植后于2～3周内造血重建。结论应用CliniMACS系统进行CD^＋34造血干细胞阳性富集，可安全、有效地应用于造血干细胞移植。

B细胞非霍奇金淋巴瘤患者IgH基因重排检测分析及意义

目的探讨外周血和骨髓免疫球蛋白重链(Immunoglobulin heavy chain,IgH)基因重排检测方法及其在监测B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)患者微小残留病(Minimal residual disease,MRD)中的临床意义。方法应用PCR-SSP方法对B-NHL患者进行IgH基因重排检测,回顾性分析39例B-NHL患者IgH基因重排动态检测结果来了解其与临床MRD的关系。结果 39例B-NHL初诊未经治疗患者IgH基因重排检测34例阳性,阳性率87.1%(34/39)。34例初诊阳性患者,治疗后19例达到临床完全缓解的患者中16例IgH基因重排转阴,3例持续阳性;15例临床部分缓解者,IgH基因重排持续阳性。分析发现13例患者骨髓和外周血标本IgH基因重排均呈阳性。结论 IgH基因重排检测可以作为B-NHL的辅助诊断及其微小残留病的监测。