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壳聚糖-海藻酸钠包裹幽门螺杆菌全菌蛋白微球疫苗制备工艺研究 被引量:5
1
作者 王毅超 邹全明 +3 位作者 任建敏 郭刚 解庆华 刘健 《重庆医学》 CAS CSCD 2007年第13期1285-1287,共3页
目的改变壳聚糖-海藻酸钠包裹幽门螺杆菌全菌蛋白微球制备中的各项参数,最终确认微球制备工艺。方法根据形成乳液的溶解性、流动性及黏稠度,选择微球制备过程中海藻酸钠(AGS)浓度及植物油与海藻酸钠的配比,通过比较形成微球的粒径大小,... 目的改变壳聚糖-海藻酸钠包裹幽门螺杆菌全菌蛋白微球制备中的各项参数,最终确认微球制备工艺。方法根据形成乳液的溶解性、流动性及黏稠度,选择微球制备过程中海藻酸钠(AGS)浓度及植物油与海藻酸钠的配比,通过比较形成微球的粒径大小,最终确定微球制备中CaCl2溶液的滴定程序及搅拌速率、搅拌时间等实验参数。结果确定了AGS乳液浓度为2%、植物油与AGS乳液配比为2∶8、CaCl2溶液反滴滴定法等MS制备工艺,并确定了搅拌速率800r/min、药物浓度2mg/ml、制备温度25℃、搅拌时间30min等参数。结论依照上述参数可以制备出符合实验要求的微球疫苗。 展开更多
关键词 微球 工艺 幽门螺杆菌
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蛋白质抗原表位研究进展 被引量:50
2
作者 李海侠 毛旭虎 《微生物学免疫学进展》 2007年第1期54-58,共5页
本文综述了蛋白质抗原表位的种类及特性,回顾了近几年来实验确定和理论预测B细胞蛋白质抗原表位的常用方法,介绍了表位作图和表位疫苗的研究现状。
关键词 抗原表位 噬菌体随机肽库 表位预测 表位作图 表位疫苗
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新月柄杆菌RsaA分泌系统用于大肠杆菌胞外递送重组蛋白的初步研究 被引量:1
3
作者 宁亚蕾 周立雄 +4 位作者 肖斌 张卫军 曾浩 毛旭虎 邹全明 《生物技术通讯》 CAS 2008年第2期175-180,共6页
目的:构建基于新月柄杆菌RsaA外运机制的以大肠杆菌为宿主的原核胞外分泌表达载体系统。方法:利用分子克隆手段,按RsaA分泌系统操纵子组织方式,将RsaA系统外运功能基因配合以异源调控序列克隆至pQE30骨架质粒。以绿色荧光蛋白(GFP)为报... 目的:构建基于新月柄杆菌RsaA外运机制的以大肠杆菌为宿主的原核胞外分泌表达载体系统。方法:利用分子克隆手段,按RsaA分泌系统操纵子组织方式,将RsaA系统外运功能基因配合以异源调控序列克隆至pQE30骨架质粒。以绿色荧光蛋白(GFP)为报告分子、大肠杆菌M15为宿主菌,诱导表达后通过Western Blotting检测培养上清中GFP的表达。结果:获得了与设计完全一致的pQABPS载体,利用该载体系统,在培养上清中报告分子GFP的表达明显增加,且是通过特异的RsaA外运机制被分泌至胞外的,而非渗漏表达或简单的信号肽引导。结论:在大肠杆菌中重现了RsaA分泌系统的外运功能,为该系统在基因工程领域的应用研究打下了良好基础。 展开更多
关键词 新月柄杆菌 RsaA分泌系统 大肠杆菌 胞外分泌 表达载体
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幽门螺杆菌感染非侵入性诊断方法的评价及研究进展 被引量:1
4
作者 吴亚男 邹全明 郭刚 《医学研究生学报》 CAS 2005年第11期1045-1048,共4页
幽门螺杆菌(Hp)感染的非侵入性诊断方法以其无创优势倍受青睐。尿素呼吸实验和粪抗原被称为是Hp感染活动性检测;而血清和尿液抗体是检测Hp的标记物,并不能说明感染是否正在进行,所以被称之为被动检测。非侵入性检测被广泛推荐用于初次... 幽门螺杆菌(Hp)感染的非侵入性诊断方法以其无创优势倍受青睐。尿素呼吸实验和粪抗原被称为是Hp感染活动性检测;而血清和尿液抗体是检测Hp的标记物,并不能说明感染是否正在进行,所以被称之为被动检测。非侵入性检测被广泛推荐用于初次感染的诊断,选择合适的检测方法主要依赖于初筛感染的可能性、检测方法的特性及其性价比。作者对现在的非侵入性检测方法进行评价。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 诊断技术 研究进展
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基于新月柄杆菌RsaA外运机制的EspA及EspA-IL-24融合蛋白胞外分泌表达研究
5
作者 宁亚蕾 周立雄 +4 位作者 毛旭虎 张卫军 程琰 余抒 邹全明 《生物技术通讯》 CAS 2008年第3期353-357,共5页
目的:实现大肠杆菌分泌蛋白(Esp)A及EspA与白细胞介素(IL)-24融合蛋白的胞外分泌表达,进一步验证基于新月柄杆菌RsaA外运机制的原核胞外分泌表达载体系统的有效性和通用性,并改造优化该系统。方法:利用分子克隆手段,按RsaA分泌系统操纵... 目的:实现大肠杆菌分泌蛋白(Esp)A及EspA与白细胞介素(IL)-24融合蛋白的胞外分泌表达,进一步验证基于新月柄杆菌RsaA外运机制的原核胞外分泌表达载体系统的有效性和通用性,并改造优化该系统。方法:利用分子克隆手段,按RsaA分泌系统操纵子组织方式,将获得的RsaA系统元件编码序列和异源调控序列克隆至pQE30骨架质粒,构建新的胞外分泌表达质粒pQABP2S;以大肠杆菌为宿主菌诱导表达EspA及EspA-IL-24融合蛋白,并通过Westernblot检测目标蛋白在培养上清中的表达。结果:获得了新的胞外分泌表达载体pQABP2S;与对照相比,该载体宿主系统培养上清中目标蛋白EspA及EspA-IL-24的表达量明显增加。结论:在大肠杆菌中通过RsaA分泌系统可实现分子大小不同的EspA及EspA-IL-24融合蛋白的特异性分泌表达,进一步证实该分泌表达策略的有效性和通用性;调整调控序列以优化分泌系统的尝试,为此类基因工程技术平台的开发提供了借鉴。 展开更多
关键词 新月柄杆菌 RsaA分泌系统 大肠杆菌分泌蛋白A 白细胞介素-24 分泌表达 表达载体 大肠杆菌
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肠出血性大肠杆菌O157:H7基因工程疫苗免疫小鼠的实验研究
6
作者 程建平 邹全明 +3 位作者 毛旭虎 易勇 王庆旭 马颖 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期828-832,共5页
目的研究肠出血性大肠杆菌O157:H7基因工程疫苗免疫小鼠后对该菌感染的保护能力。方法将60只BALB/c小鼠平均分为5组,分别为3种抗原单独免疫、三抗原联合免疫和PBS对照组,用注射方式免疫3次,抗原和佐剂均为每次100μg/只。采集免... 目的研究肠出血性大肠杆菌O157:H7基因工程疫苗免疫小鼠后对该菌感染的保护能力。方法将60只BALB/c小鼠平均分为5组,分别为3种抗原单独免疫、三抗原联合免疫和PBS对照组,用注射方式免疫3次,抗原和佐剂均为每次100μg/只。采集免疫前和各次免疫后7d的小鼠血清检测抗体,末次免疫10d后以10^9CFU的O157全菌液经口感染小鼠。观察小鼠临床症状及死亡情况,检测粪便与肠道带菌情况,并作病理组织学检测。结果各抗原免疫组小鼠特异抗体明显增加,感染后各组小鼠均有死亡,IntiminC300、Stx2B、HlyAN436和联合免疫组保护率分别为73%、64%、36%和91%。未病死小鼠粪便排菌情况:对照组22d,实验组为5—14d。肠道带菌情况:对照组阳性率为100%,实验组为25%-83%。病死小鼠肺脏、肝脏均有明显组织病理学改变。结论IntiminC300、Stx2B和HlyAN436疫苗对于O157感染具有一定的预防作用,而联合免疫效果又大于单独免疫。 展开更多
关键词 肠出血性大肠杆菌O157:H7 紧密黏附素 志贺毒素ⅡB亚单位 EHEC溶血素 基因工程疫苗
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壳聚糖-海藻酸钠幽门螺杆菌全菌蛋白微球的制备及表征 被引量:6
7
作者 王毅超 邹全明 +2 位作者 任建敏 刘健 王晓勤 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期375-377,共3页
目的以壳聚糖、海藻酸钠为主要材料包裹幽门螺杆菌(HP)全菌超声蛋白抗原,制备新型HP疫苗制剂。方法将海藻酸钠、壳聚糖、大豆油以及HP超声全菌抗原制备成W/O/W型微球。通过扫描电镜、粒径分布仪等检测微球粒径大小;药物溶出度仪、BCA蛋... 目的以壳聚糖、海藻酸钠为主要材料包裹幽门螺杆菌(HP)全菌超声蛋白抗原,制备新型HP疫苗制剂。方法将海藻酸钠、壳聚糖、大豆油以及HP超声全菌抗原制备成W/O/W型微球。通过扫描电镜、粒径分布仪等检测微球粒径大小;药物溶出度仪、BCA蛋白试剂盒检测微球的蛋白包封率及药物释放速率。结果所制备的微球形态规则,平均粒径3.33μm;蛋白包封率约为64.8%;微球呈显著缓释模式,缓释时间可达6d。结论壳聚糖-海藻酸钠微球包裹全菌蛋白可以作为HP疫苗的新型缓释制剂。 展开更多
关键词 微球 幽门螺杆菌 壳聚糖 海藻酸钠 表征
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