充分发挥实验课在临床基础检验教学中的作用

培养掌握一定的理论基础知识,具有较强的实际操作能力的称职的检验医师,是医学检验教学质量的要求,也是本科生检验专业教学的主要目的。医学是在科学实验与实践的基础上发展起来的一门实验科学,而临床检验专业着重要要求掌握实验操作技术,并着力培养学生的动手能力。

唾液葡萄糖的检测及临床意义研究进展

近几年的研究表明唾液葡萄糖与血糖具有一定的相关性 ,本文就唾液样本的采集与保存、唾液葡萄糖的检测方法、唾液葡萄糖与血浆葡萄糖的关系进行了综述 。

加强医学检验教学中“输血医学”的教学

阐述"输血医学"在检验医学教学中的重要性。提出检验医学专业教学中应加大"输血医学"的教学内容,同时必须重视基础理论、基本知识和基本技能。"输血医学"是一门实验和临床紧密结合、实践和理论并重的学科,"输血医学"教学应注重理论和实践相结合。

《血液学及血液学检验》教学之心得

《血液学及血液学检验》是医学检验专业的专业课之一,是一门理论与实验技能并重的课程。现代血液学与医学、生物学的其它分支有着密切的联系,各种学科的交叉,以及现代分子生物学技术的迅猛发展,使得血液学的研究更是日新月异。这就对我们从事该门课程教学的人员提出了更高的要求。作者在此就简单谈一下近几年的教学工作之心得。

苦参诱导K562细胞分化的研究

K562细胞属于人红白血病细胞株，是骨髓多能干细胞。以苦参作诱导分化剂，可使K562细胞有分化现象并向多方向分化，这为临床探索中药非杀伤性治疗白血病打下了良好的基础。

无创血糖仪的研制

血糖是临床上分析病人是否患糖尿病的重要参考指标之一。常规检测血糖高低的方法 (1)用传统的量糖计 (旋光计 )检测尿糖的浓度 ,以间接知道病人血糖高低 ;(2 )用目前临床使用的血糖计 ,通过抽取病人血液检测血糖的浓度 ;(3)用分光光度计法测量血清糖化蛋白以确定病人血糖的高低 ;(4 )测定血清果糖胺以确定糖尿病等。这些方法中旋光计要用数毫升的尿液才能检测 ,早已被淘汰 ;后面的几种方法则需要针刺手指 ,或静脉血 ,用血液来检测。虽然有的方法正在广泛使用 ,有的正在研究之中 ,但是不管是那一种方法它们都要抽取病人的血液 ,是属于有创探测 ,会引起病人的不适和增加感染的机会 ,所以都不是理想的检测方法。本文介绍一种新颖的、方便制作的无创血糖探测仪 ,它不用血液 ,而用唾液就能方便地测出病人血糖含量的高低。实践证明 ,此装置方便、快捷、无创、安全 。

苦参提取液诱导K_(562)细胞分化的细胞化学观察

苦参是常用的中药，广泛应用于临床各科，特别是它的抗肿瘤作用正日益受到关注。本文用苦参提取液（１２ｇ／Ｌ）作诱导分化剂，以人红白血病细胞株Ｋ５６２作实验模型，培养三天，每天作细胞化学染色。用药后Ｗｒｉｇｈｔ＇ｓ＿Ｇｉｅｍｓａ染色，细胞形态有分化成熟的趋势。髓过氧化物酶染色（ＭＰＯ）阳性，糖原反应（ＰＡＳ）阳性，ａ－醋酸荼酚酯酶（α－ＮＡＥ）阴性。对照组上述染色均为阴性。结果表明苦参有促Ｋ５６２细胞向粒系和红系分化的现象。

大鼠肾移植三种尿路重建术式的比较

目的对大鼠肾移植3种尿路重建术式进行比较,筛选出稳定性好、并发症少的手术方案。方法以3种术式进行大鼠同系肾移植尿路重建:A组,供/受体输尿管端端吻合术(n=14);B组,供体膀胱瓣-受体膀胱吻合术(n=15);C组,供体输尿管-受体膀胱浆肌层隧道术(n=17)。对各组尿路重建时间、尿路并发症以及血肌酐动态指标进行比较。结果A、B、C 3组手术时间分别为(6±2.0)min(、14±2.5)min、(7±2.0)min,A组与C组差异无统计学意义,B组用时分别与A组、C组差异有统计学意义(P<0.05);术后,A组输尿管梗阻发生率最高(21.4%),B组尿漏发生率最高(13.3%);C组术后尿路并发症总发生率最低,为11.8%,A、B两组术后尿路并发症总发生率分别为28.5%和26.1%,与C组之间差异均有统计学意义(P<0.05);血肌酐监测显示A组术后40d与C组差异有统计学意义(P<0.05),术后60d与B、C两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论供体输尿管-受体膀胱浆肌层隧道吻合术后尿路并发症少,对移植肾恢复影响小,是大鼠肾移植尿路重建的较理想方案。

唾液葡萄糖比色测定方法的建立及应用

目的建立一种唾液葡萄糖比色测定方法,并观察其在糖尿病血糖浓度监测中的意义.方法用2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸取代葡萄糖氧化酶测定法的苯酚,用于唾液葡萄糖的测定.并观察正常人与糖尿病患者血糖浓度和唾液葡萄糖含量之间的关系.结果 186例健康人晨空腹唾液葡萄糖浓度为8.14±1.78mg/L.正常人及糖尿病患者血糖与唾液葡萄糖之间存在明显相关性(r=0.72～0.80).结论比色法可以高灵敏度的测定唾液葡萄糖的含量,并可用于糖尿病人血糖浓度的监测.

高原低氧对胎鼠海马神经元N-甲基-D-天冬氨酸受体发育的影响(英文)

目的:观察高原低氧环境对胎鼠海马神经元N-甲基-D-天(门)冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartatereceptor,NMDAR)数目和通道特性的影响,为防治高原低氧引起的脑损伤提供依据。方法:将孕10dSD大鼠置于低压氧舱内,采用原位杂交和膜片钳观察其所生子鼠海马NMDA受体的数量和功能。结果:胎鼠高原低氧后,NMDA受体数量减少,通道开放概率由0.150降为0.012,通道开放时间常数б1由0.040±0.010降为0.020±0.007(t=33.21,P<0.05),б2由0.75±0.23降为0.49±0.23(t=25.31,P<0.05),通道关闭时间常数б1由0.14±0.07升高为14.25±3.5(t=12.74,P<0.01),б2由2.67±1.12升高为4832±1809(t=8.44,P<0.01)。结论:高原低氧影响到胎鼠NMDA受体的发育,提示高原低氧环境下大鼠的学习记忆可能受到影响。

18%III度烫伤对小鼠脾脏T淋巴细胞肌醇脂质信号系统及其功能的影响

目的 :探索 18%Ⅲ度烫伤对小鼠脾脏T淋巴细胞肌醇脂质信号系统活性的影响及其与T细胞功能受抑 ,IL 2、IL 10分泌的关系 ,即烧伤后T淋巴细胞功能受抑的信号转导分子机制。方法 :以 18%Ⅲ度烫伤小鼠为模型 ,检测烫伤后不同时相参与跨膜信号转导的G蛋白 (G protein)、蛋白酪氨酸激酶 (PTK)、蛋白激酶C(PKC)及胞浆PTK、PKC、PI PLC活性与Ca+ + 浓度的改变 ,观察不同时相细胞功能及IL 2、IL 10分泌 ,分析各信号转导分子活性改变与T细胞功能受抑 ,IL 2、IL 10分泌的关系。结果 :烧伤后膜G protein、浆PI PLC酶活性受到抑制 (G protein活性明显降低出现于伤后 2h ,P <0 0 5 ,显著降低持续到伤后96h ,P <0 0 1;浆PI PLC变化趋势与G protein相同 ,但出现活性受抑的时间较G protein拖后一个时相 )。胞浆游离Ca+ + 浓度明显降低 ,明显降低的时相亦始于伤后 12h。PTK和PKC由于存在膜浆两相 ,其变化规律较复杂 ,转膜PKC活性呈现先降低(伤后 2～ 2 4h)后升高 (伤后 96h及以后 )的双相改变 ,浆PKC活性变化与之相反 ;膜PTK活性于伤后早期降低 ,16 8h后升高 ,浆PTK活性于伤后各时相均升高。T淋巴细胞增殖能力和IL 2分泌于伤后各时相均降低 ,其变化趋势与胞膜G protein和胞浆游离Ca+ + 浓度呈显著正性直线相关。IL 10分?

应用CD4^+CD25^+Treg细胞诱导大鼠肾移植免疫耐受的研究

目的应用供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞诱导移植免疫耐受,抑制大鼠肾移植慢性排斥反应。方法以SD、Wister大鼠分别为供、受体建立同种异体肾移植慢性排斥反应动物模型;受体脾细胞悬液同供体肾组织抗原孵育培养,诱导获得对供体抗原的特异性;采用MACS法分选具有供体抗原特异性的CD4+ CD25+T细胞,FACS流式细胞法检测分选的CD4+CD25+T细胞及CD4+CD25+Treg细胞纯度;获得之供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞于同种异体肾移植术后2、4、6、8、10周,分别经尾静脉注射入受者体内(实验组,n=12),选取未注射组为对照(n=12)。观察两组移植肾脏存活时间;术后第10、40、80天MTT法检测比较两组受体脾细胞对供体抗原刺激反应程度;术后第10、20、40、60、80天分别监测各组血肌酐水平。结果FACS流式细胞法检测分选的CD4+CD25+T细胞得率为4.13%,分离纯度为73.34%;CD4+CD25+Treg细胞纯度为65.22%。所分选之CD4+CD25+Treg细胞成功获得供体抗原特异性,对供体抗原的抑制率(IR)为85.4%。移植肾存活时间:治疗组移植肾存活时间为(98.83±6.66)d,显著长于对照组的(78.25±4.71)d,组间差异有统计学意义(P<0.05);术后第40、80天治疗组脾细胞对供体抗原刺激反应程度均明显低于对照组,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。术后第20、40、60、80天对照组血肌酐指标明显高于治疗组,同治疗组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞可特异性抑制受体对供体抗原的免疫反应,有效抑制了移植肾慢性排斥反应的发生。

微流控芯片用于AFP快速检测的研究

目的建立一种可以用于免疫分析的微流控芯片系统。方法采用激光直接加工法制备微流控芯片，建立由流体拉制系统、免疫反应系统和信号处理系统构成的芯片系统，用于甲胎蛋白的测定。结果芯片系统可以在20min内完成AFP的分析，所需要的标本量和试荆量为5μl，线性范围为1-800ng／ml，批内CV平均为4．8％，批间CV平均为7．0％，回收率为96．3％。结论微流控芯片系统是一种快速、耗费小、可重复使用的AFP测定方法。

基于超顺磁珠的微流控免疫分析系统的设计

介绍采用激光直接加工法制备微流控芯片,建立基于超顺磁珠的化学发光微流控免疫分析系统,用于甲胎蛋白的测定。芯片系统可以在20min内完成AFP的分析,所需要的标本量和试剂量为5μl,线性范围在1～800ng/ml。

供体抗原特异性CD4^+ CD25^+ Treg细胞对肾移植大鼠免疫状态的影响

目的研究供体抗原特异性CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)对肾移植后大鼠免疫状态的影响。方法常规分离Lewis和F344大鼠脾脏淋巴细胞,然后将Lewis大鼠淋巴细胞负载F344大鼠抗原,然后从负载抗原后的Lewis大鼠淋巴细胞悬液中用MACS磁珠分选法分离纯化供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞,并用流式检测分选Treg细胞纯度以及RT-PCR检测分选细胞的Foxp3基因表达。以F344、Lewis大鼠分别为供、受体建立同种异体肾移植动物模型,将供体抗原特异性Treg细胞经尾静脉注射入受者体内(治疗组,n=8),选取未注射组为对照组(n=8)。于术前1d,术后15d检测移植后4组大鼠血清IL-10、IgG,并于术后15d MTT法检测受体脾细胞对供体抗原刺激的反应。结果所分选之CD4+CD25+Treg细胞成功获得供体抗原特异性,对供体抗原的抑制率(IR)为85.4%,并检测到Foxp3表达。移植前治疗组和对照组大鼠血清中均无法检测到IL-10浓度。术后15d治疗组血清IL-10与对照组比较,明显增高(P<0.01)。对照组在术后15d血清IgG浓度已经显著升高,较术前差异有统计学意义(P<0.05)。而治疗组术后15d血清IgG浓度与术前相比有所降低,与术前相比差异无统计学意义(P>0.05),但与对照组相比较均差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组对供体脾细胞的刺激反应也明显低于Ⅰ组(P<0.01)。结论供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞能显著促进体内IL-10的产生以及抑制免疫球蛋白IgG的产生,并且可特异性抑制受体对供体抗原的免疫反应。