Humanin对鱼藤酮诱导的多巴胺神经元毒性的保护作用研究

目的探讨Humanin(HN)对鱼藤酮(rotenone,Rot)诱导的多巴胺神经元毒性损伤的保护作用和机制。方法构建Rot染毒PC12细胞模型,实验设对照组、Rot染毒组、HN预处理Rot染毒组、单独HN处理组。采用ELISA检测Rot染毒细胞内外HN的含量,CCK-8法检测细胞活性,ATP检测试剂盒检测细胞内ATP含量,DCFH-DA探针检测细胞内ROS水平,Western blot分别检测线粒体自噬调控蛋白Pink1、Parkin、p-Parkin、p62、LC3,线粒体生物发生调控蛋白PGC1α和分裂/融合调控蛋白OPA1、MFN2、DRP1、p-DRP1以及抗氧化应激调控蛋白Keap1、Nrf2的表达。采用HBAD-mcherry-EGFP-LC3腺病毒转染细胞观察自噬体和自噬溶酶体的数量。结果Rot染毒组PC12细胞内HN浓度显著高于对照组(P<0.05);与对照组比较,Rot染毒组PC12细胞活性下降,ATP含量下降,ROS的生成增加,Rot染毒后PC12细胞内Pink1、p-Parkin表达升高,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高,p62表达下降,细胞线粒体生物发生蛋白PGC1α和线粒体融合蛋白MFN2、OPA1表达下降,而线粒体分裂蛋白p-DRP1表达升高,抗氧化应激蛋白Keap1和Nrf2表达下降(P均<0.05);与对照组比较,Rot染毒组PC12细胞中自噬体和自噬溶酶体数量增多(P<0.05),而20μmol/L HN预处理可以改善Rot染毒引起的上述变化(P<0.05)。结论HN通过抑制线粒体自噬和线粒体分裂、促进线粒体生物发生和融合以及抗氧化应激,改善Rot诱导的多巴胺神经元毒性损伤。

低氧复合氰化钠中毒对大鼠肺的损伤效应

目的探讨低氧复合氰化钠(NaCN)中毒对大鼠的肺损伤效应。方法以低压氧舱模拟4 000m低氧环境。72只大鼠随机分为海拔308m中毒组和海拔4 000m中毒组。皮下注射3.6mg/kg NaCN,分别于0、0.5、1、2、4、6h取肺组织和支气管肺泡灌洗液(BALF),测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)活力,丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、伊文思蓝(EB)含量,酸性磷酸酶(ACP)、乳酸脱氢酶(LDH)及碱性磷酸酶(AKP)的活性。结果NaCN中毒后BALF中LDH、ACP及AKP活性明显增高,0.5h最高。低氧(海拔4 000m)复合NaCN中毒大鼠BALF中LDH、ACP及AKP活性明显高于同一时相点单纯(海拔308m)NaCN中毒大鼠。低氧复合NaCN中毒能引起肺组织和BALF中的GSH含量、SOD和GSH-PX活力下降,并引起MDA含量增加,各指标的变化幅度远大于单纯NaCN中毒的效应。结论在低氧条件下NaCN的细胞毒性作用增强,肺损伤程度加重,严重影响大鼠肺的氧化应激水平和肺血管通透性。

浅析外军化生放核防御能力的综合性训练

化学的、生物的、放射的、核的(chemical,biological,radiological,and nuclear,CBRN,简称化生放核)防御训练(可简称为CBRN训练),是应对CBRN威胁的重要手段,各国军方均高度重视。本文针对外军CBRN训练的方法进行总结,介绍了外军通过计算机模拟训练、基地化训练、模拟器材训练、模拟战剂训练、站点巡回训练、非军事场景训练、跨国训练等多种CBRN训练的方法。外军CBRN训练中,注重利用网络化和计算机模拟训练,建设高水平的训练基地和实景模拟设备,使用站点巡回培训,以及融合于与非军事情景。这些训练方法为完善我军相关训练模式,提升CBRN训练的整体水平提供了借鉴。

以实战化训练提高化学防御和卫勤保障能力

实战化训练是提高军事训练质量的有效途径。防化医学作为三防医学的重要组成部分,在部队的建制和训练中都处于防御大规模杀伤性武器的核心地位。防化医学乃至三防医学的实战化训练首先应建立完善的规章、指南、条例及相应的管理机制。教官队伍、训练模式、训练安全和训练评估是实战化训练中需要注意的关键问题,可以通过调研外军和国际组织实战化训练现况,着力提升我军卫勤保障的实战化训练效果。

美国国民警卫队大规模杀伤性武器民事保障队的能力建设

美国大规模杀伤性武器民事保障队由国民警卫队多兵种人员组成,每个州都至少有1支队伍。作为州属的应急救援力量,这些队伍有非常高的专业性、即时响应能力、综合保障能力,其组队、训练、认证、行动等方面的做法值得借鉴。

维生素D3通过抑制NLRP3炎性小体激活改善氮芥诱导角质形成细胞炎性损伤

目的探讨NLRP3炎性小体在维生素D3(vitamin D3,VD3)改善氮芥(nitrogen mustard, NM)诱导角质形成细胞炎性损伤中的作用和机制。方法用20μmol/L NM单独或联合用10μmol/L caspase-1特异抑制剂(Ac-YVAD-cmk, YVAD)、10μmol/L NLRP3炎性小体特异抑制剂(MCC950)、5 nmol/L VD3处理人角质形成细胞株(HaCaT细胞)4 h。应用CCK-8法检测细胞增殖活力,Western blot检测NLRP3、caspase-1 p20、IL-1β和COX-2的表达水平,ELISA检测IL-1β释放量。结果 20μmol/L NM对HaCaT细胞增殖活力无显著影响,NM处理后可显著上调HaCaT细胞NLRP3、caspase-1 p20、IL-1β和COX-2的蛋白表达水平,增加细胞IL-1β释放(P<0.05)。而加入MCC950或YVAD处理后能显著抑制NM诱导的上述效应(P<0.05);同时,VD3干预能够明显抑制NM对NLRP3和caspase-1 p20蛋白表达的上调作用,并显著减少NM诱导的IL-1β和COX-2的表达和释放(P<0.05)。结论 VD3通过抑制NLRP3炎性小体激活减少角质形成细胞炎性因子生成,改善NM诱导的细胞炎性损伤。

氮芥通过激活腺苷酸活化蛋白激酶/自噬通路抑制角质形成细胞增殖活力

目的探讨腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/自噬通路在氮芥(nitrogen mustard,NM)诱导角质形成细胞增殖活力下降中的作用。方法用不同浓度(1、5、10、20μmol/L)的氮芥单独或加入5 mmol/L自噬特异性抑制剂(3-methyladenine, 3-MA)、20 nmol/L自噬特异性激动剂(rapamycin, RAPA)、10μmol/L AMPK特异性抑制剂(compound C, CC)处理人角质形成细胞株(HaCaT细胞)24 h后,CCK-8法检测细胞增殖活力,Western blot检测AMPK、pAMPK、LC3-B2/B1和p62的表达水平,共聚焦显微镜观察自噬体形成。结果 NM处理后HaCaT细胞增殖活力被显著抑制(P<0.05),且处理浓度越高抑制效应越明显;当NM浓度为20μmol/L时,角质形成细胞增殖活力约下降40%。同时,NM处理能力显著提高pAMPK、LC3-B2的表达水平并下调p62的表达,且随处理浓度的增加,表达变化越明显;同时,NM可明显促进HaCaT细胞自噬体的形成。加入3-MA或CC干预后能显著抑制NM的上述效应(P<0.05),而RAPA干预对NM处理的效应无明显影响(P>0.05)。结论氮芥能够激活AMPK/自噬通路诱导角质形成细胞的毒性损伤,抑制细胞的增殖活性。

外军化生放核防御的训练基地建设、培训课程与训练

化学的、生物的、放射的、核的(chemical,biological,radiological,and nuclear,CBRN,简称化生放核)威胁一直是战场上的防御重点。基地化训练是目前西方发达国家和跨国军事组织主要采取的军事训练模式。本文介绍了外军重要的CBRN训练基地的设施、培训课程、装备等建设情况。如美国马斯卡塔图克城市培训中心、美军积极响应(Vibrant Response)演习项目、德国霍恩费尔斯训练区、北约Oberammergau学院的CBRN培训、英国国防部CBRN防御中心;列举了依托这些基地开展的有代表性的实景模拟训练,介绍参训的武装力量、战斗任务和内容。据此提出,我军在与卫勤保障演练协同或专门进行卫生机构和卫生力量的CBRN基地化训练方面还需要加强;在训练课程设置方面应该更多地面向多军种、多兵种、多层次、多岗位的受训者;在训练设施建设方面,应该以实景为依托并设置相应的课程和训练内容,同时注重培养一支以多专业、多层次的专家和技术专长人员为骨干的教官队伍。

DVC1在氮芥致人支气管上皮细胞DNA-蛋白交联损伤修复中的作用

目的探讨蛋白水解酶DVC1在氮芥诱导人支气管上皮细胞DNA-蛋白交联损伤修复中的作用。方法利用siRNA干预DVC1表达,50μmol/L氮芥染毒细胞后,采用Western blot检测DNA损伤修复蛋白的表达;荧光酶标仪测定1~24 h DNA-蛋白交联总量;Slot blot检测DNA与O 6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O^(6)-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)的共价交联;免疫沉淀检测MGMT泛素化水平。构建GST-DVC1融合蛋白,GST下拉实验检测DVC1与MGMT、泛素的结合。结果si-DVC1干预后,DNA-蛋白交联总量升高。氮芥降低交联蛋白MGMT原型的水平,但增强其泛素化水平;DVC1可结合泛素,si-DVC1可进一步增强MGMT的泛素化及DNA-MGMT的交联量,与泛素结合酶抑制剂NSC697923和蛋白酶体抑制剂MG132引起的交联结果类似。si-DVC1引起DNA损伤修复蛋白Rad51表达降低、Ku70表达升高。结论DNA-蛋白交联的清除依赖于交联蛋白的泛素化;DVC1通过与泛素相互作用,促进氮芥诱导的DNA-蛋白交联的清除,并维持DNA以同源重组方式修复损伤的能力。

西部战区卫生战士健康状况调查分析

目的调查分析西部战区卫生战士的健康状况及其影响因素。方法2020-2021年期间,以驻地在西部战区的卫生战士为研究对象,根据《国际疾病分类》第十版制定健康调查问卷,收集志愿者的基本信息、生活方式、疾病症状等。结果纳入了716名合格志愿者。8个系统症状发生率分布在10.8%~42.6%之间,由高到低依次为神经系统、肌肉骨骼系统、呼吸系统、血液系统、泌尿系统、消化系统、内分泌系统、循环系统。吸烟组呼吸系统症状发生率显著高于不吸烟组(31.6%vs 24.0%,P=0.025)。驻地海拔≥3000 m组的呼吸系统(34.4%vs 25.9%,P=0.028)、内分泌系统(23.3%vs 15.3%,P=0.014)、神经系统(49.4%vs 40.3%,P=0.032)症状发生率均显著高于驻地海拔<3000 m组。在驻地海拔≥3000 m的志愿者中,军龄≥6年组的循环系统(28.6%vs 11.0%)、内分泌系统(42.9%vs 21.0%)、神经系统(67.9%vs 42.0%)、泌尿系统(53.6%vs 24.0%)症状发生率显著高于军龄≤2年组(P<0.05)。结论西部战区卫生战士神经系统和肌肉骨骼系统疾病症状发生率高,高原条件下长期服役可能对健康的损害作用更大。