颈交感神经阻滞对放烧复合伤小鼠死亡率的影响及其可能的作用途径(英文)

背景:颈交感神经阻滞促进机体神经-内分泌-免疫系统等稳态的恢复,其能否抑制创伤后应激紊乱导致的内稳态失衡仍不明确。目的:观察颈交感神经阻滞对放烧复合伤小鼠死亡率的影响,探讨颈交感神经阻滞可否成为严重创伤后续损害简单有效的治疗手段。设计:随机分组设计,动物对照实验。单位:解放军广州军区广州总医院麻醉科。材料:实验于2004-02/2005-07在解放军第三军医大学复合伤研究所完成。选择昆明小鼠160只,随机抽签法分为对照组80只(仅对动物给予放烧复合伤,颈部注射生理盐水0.3mL)和颈交感神经阻滞组80只(对动物给予放烧复合伤,伤后给予颈交感神经阻滞,1次/d,连续14d)。方法:动物致伤方法:①放射损伤:60Coγ射线5Gy,照射距离1.5m,吸收剂量率(5.17～5.33)mGy/s,全身一次均匀照射。②烧伤:放射损伤后给予20g/L凝固汽油涂于背部燃烧8s造成15%总体表面积Ⅲ度烧伤(病理切片证实)。颈交感神经阻滞方法:对大鼠进行双侧颈交感神经阻滞,注射5g/L利多卡因0.2mL,注射后5min观察小鼠是否出现类似于霍纳综合征症状。主要观察指标:观察两组动物伤后2,5,7,10,15,20,30d死亡率及伤后7,14,21d外周血红细胞、白细胞、血小板计数的变化,另观察颈交感神经阻滞对放烧复合伤后3,6,14d血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6的影响。结果:纳入动物160只,均进入结果分析。①与对照组比较,颈交感神经阻滞治疗使放烧复合伤后5,7,10,15,20,30d的死亡率显著降低犤对照组各时相点累计死亡率分别为8%,22%,32%,54%,74%,82%,90%;颈交感神经阻滞组分别为8%,14%,16%,22%,28%,34%,56%犦。②颈交感神经阻滞组伤后7,14,21d的血红细胞计数、血小板计数及白细胞计数与对照组比较显著增加犤以21d为例,血红细胞计数分别为23.21×1012L-1,14.58×1012L-1;血小板计数分别为16.87×1011L-1,12.57×1011L-1;白细胞计数分别为20.65×109L-1,14.58×109L-1犦。③颈交感神经阻滞组伤后3,6,14d的血清炎性细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6水平与对照组比较显著下降犤以14d为例,肿瘤坏死因子α分别为189,365ng/L;白细胞介素1β分别为14,23ng/L;白细胞介素6分别为70,132ng/L犦。结论:颈交感神经阻滞显著降低放烧复合伤动物的死亡率,是治疗严重创伤简单而有效的手段;颈交感神经阻滞降低放烧复合伤动物死亡率的机制可能是通过促进造血功能的恢复、抑制过度的炎性反应而实现的。

星状神经节阻滞的研究进展及其在严重创伤多器官功能障碍综合征中的应用展望

星状神经节阻滞（stellate ganglion block，SGB）是将局部麻醉药注入到颈交感神经及其附近组织，以达到颈交感干、颈交感神经节与节前、节后神经及其支配范围的区域性阻滞。既往认为SGB只能治疗其支配区的疾病，现在知道SGB对神经痛疗效显著，其治疗范围几乎遍及全身。在日本，每天至少有2万～3万人进行SGB治疗，其治疗学理论已为日本医界所公认。

贫铀弹伤害及其医学防护

贫铀在军事上主要用于加固装甲和制造贫铀弹。贫铀武器多次在实战中被使用,造成人员死伤,装备破坏,环境污染,产生了严重后果。本文从贫铀弹的4种杀伤因素、贫铀弹伤害的主要临床病理特点、医学防护和救治几个方面阐述了贫铀弹所致的伤害及其医学防护,同时也对防护中几个基本问题提出了自己的看法。

星状神经节阻滞对严重烧伤小鼠巨噬细胞糖皮质激素受体表达及细胞因子分泌的影响

目的:探讨星状神经节阻滞(stellate ganglion block,SGB)在严重烧伤小鼠腹腔巨噬细胞糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)表达及炎性细胞因子分泌中的作用,明确SGB可否成为改善严重创伤后的GR功能、抑制炎性反应过度的手段。方法:20%TBSAⅢ度烧伤小鼠分为单纯严重烧伤组(烧伤组)、严重烧伤后单侧颈部SGB治疗组(单侧SGB组)、严重烧伤后双侧颈部SGB治疗组(双侧SGB组),另设正常对照组,比较各组巨噬细胞GR水平及巨噬细胞分泌炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1"(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)的差异。结果:单侧及双侧SGB组腹腔巨噬细胞GR蛋白水平均显著高于烧伤组,单侧及双侧SGB组腹腔巨噬细胞分泌TNF-α、IL-1β、IL-6的作用均显著低于烧伤组。严重烧伤后单侧SGB组及双侧SGB组间巨噬细胞GR蛋白水平及TNF-α、IL-1β、IL-6的表达释放无明显差异。结论:单侧或双侧颈部SGB均可成为改善严重烧伤巨噬细胞GR功能、抑制其过度分泌炎性细胞因子的手段。

局部解剖学知识对防原医学实验的促进作用

防原医学主要研究战时核武器与平时核事件所致伤害的医学防护和救治,是军事预防医学的主干学科,更是一门包含放射病理、创伤外科等多学科的特殊新兴学科。放射性碘极易经胃肠道、呼吸道、完整的皮肤及伤口吸收,

^(125)I-Genistein在荷人乳腺癌裸鼠体内分布的实验研究

目的研究125I-Genistein在荷人乳腺癌裸鼠体内的生物学分布情况,探讨Genistein用于治疗人乳腺癌的可行性。方法Iodogen法标记Genistein;建立荷人乳腺癌裸鼠移植瘤模型;测定125I-Genistein在荷瘤裸鼠体内的放射性分布,计算肿瘤(T)与非肿瘤组织(NT)的放射性比值。结果125I-Genistein比活度为336KBq/μg,放射性化学纯度为98.72%。尾静脉给药30min后肿瘤组织的放射性达到高峰,但在各观察时相点肿瘤(T)放射性均显著低于血液、肝脏与肾脏(NT)(P<0.01);肾脏放射性明显高于肠道,30min后高于除血液外的其他受检组织;肠和脾脏的放射性始终处于极低水平。结论Genistein用于人乳腺癌的治疗需要进一步研究,以提高其在肿瘤组织中的分布。

新型升血小板因子静脉注射在小鼠体内的靶向性实验研究

目的探讨本所研制的新型升血小板因子在小鼠体内分布情况,明确其是否具有靶向性分布的特点。方法用同位素125I标记升血小板因子,经静脉注入小鼠体内后1、3、6、12、24和48h活杀动物,分别取血液、心、肝、脾、肺、肾、股骨等脏器,用自动γ计数仪进行放射性计数。结果静脉注射标记的因子后新型升血小板因子即由血液向骨髓分布,且随时间而渐次下降;各时相的组织间比较,组织的比放射性,都表现为主要在骨髓的含量较高。结论升血小板因子经静脉注入后在体内主要分布于骨髓,具有一定的靶向性分布特点。

放烧复合伤的发病机制与救治研究

放射损伤合并烧伤的放烧复合伤，主要见于战时核爆炸与平时核事故，也见于贫铀弹伤害、核恐怖“脏弹”袭击等情况。两伤合并后，伤情更重，救治更难，预后更差。国内外对此研究较为重视，国外以俄、美、法等国，特别是俄罗斯Budagov项目组对放烧复合伤研究较多^[1]。国内复合伤研究始于20世纪50年代后期，

生物样本铀的放射化学分析方法改进研究

目的寻找一种操作简单、花费较低的放射化学分析方法。方法根据以前的研究基础,结合仪器和技术方法的进展,将微波消解仪和多用预处理加热仪用于放化分析。结果将微波消解仪和多用预处理加热仪用于放化分析,成本较低,方法简化,消耗的化学试剂减少,既减轻了成本,又减轻了对环境和人员的危害。结论将微波消解仪和多用预处理加热仪用于放化分析,应是较好的预处理样本的方法。

骨髓间充质干细胞可塑性研究

骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,MSCs)具有跨系统、甚至跨胚层分化的特性,称为MSCs的可塑性(plasticity),成为细胞工程、再生医学中的主要选择细胞。但随着对成体干细胞可塑性质疑的出现,使MSCs是否具有转分化能力,存在着极大的分歧。对MSCs可塑性是否真正存在的进一步明确,越加显得急切和重要,也对干细胞基础理论及其临床应用具有指导性意义。

人脐血源性MSCs的免疫调节作用

目的从人脐血中分离、培养间充质干细胞(MSCs)并探讨其对淋巴细胞的免疫调节作用。方法淋巴细胞分离液分离人脐血单个核细胞,利用贴壁筛选法通过多次传代得到MSCs,流式细胞仪测定细胞表型;将获得的MSCs分别以不同数量加入到外周血混合淋巴细胞培养体系和植物血凝素(PHA)刺激的外周血淋巴细胞转化体系中,用H3-TdR标记β液体闪烁计数仪检测细胞增殖,观察脐血来源的MSCs对混合淋巴细胞反应和淋巴细胞转化的影响。结果从人脐血中分离获得的贴壁细胞,呈成纤维样的细胞形态,CD29、CD105和CD166表达阳性,CD14、CD34和CD45表达阴性;人脐血源性MSCs在体外对混合淋巴细胞反应和PHA诱导的淋巴细胞转化均具有明显的抑制作用,抑制作用与细胞数量呈正相关。结论从人脐血中可以成功地分离出MSCs,其对同种异体淋巴细胞具有免疫调节作用,为其作为骨组织工程异基因种子细胞来源打下基础。

黄酮类化合物对急性贫铀中毒的促排解毒作用初探

为了寻找对急性贫铀中毒具有促排及较好解毒作用的黄酮类化合物,给予Wistar大鼠贫铀,20mg/kg体重,立即给予含邻苯二酚基团的黄酮类化合物(包括QU、F1、F2、T1、T2、MY、BA),10mg/kg体重,连续3d,并设邻苯二酚类化合物8102及DMSO作为实验对照。观察大鼠在3d内的死亡率;收集72h尿液,取血液和一侧肾脏,测定铀含量,并进行肾功能检测和肾脏等组织病理观察。结果发现,急性贫铀损伤组死亡率为30%;使用促排剂后,8102组和F1组死亡率为0;T1、T2和DMSO组死亡率为20%。T2组尿铀含量增加,血铀含量减少,促排铀效果明显优于其它各促排剂(p<0.05),但肾脏铀含量增加;T1组次之,8102组肾脏铀含量降低。给予8102后,可使大鼠血清尿素氮和肌酐浓度大大降低,且能下降到与正常组相近的水平(p<0.01)。F1组次之,但降低幅度不如8102显著。F2、T1和T2组的肌酐浓度也显著降低。其余各组肾功能下降不显著。病理观察发现,T2组肾脏无明显损伤;8102和T1次之;F1和QU组肾损伤较重。这些结果说明,T2促排铀效果及对贫铀敏感器官的保护最好,并可改善肾功能,应具有作为贫铀促排剂的潜能。T1的效果次于T2。

腹盆腔放疗诱发肠道微生态失调与肠源性感染的实验研究

目的 探索腹盆腔放疗照射对肠道微生态的影响及其与肠源性感染的关系.方法 模拟腹盆腔放疗照射BALB/c小鼠,2.0 Gy/d,连续照射5 d/周,分别于照射3周、5周和6周后停照1周的时间点收集回肠组织及其内容物样本.用实时定量RT-PCR检测抗菌肽和促炎性因子的表达;用PCR检测细菌在小鼠体内的移位情况;用变性梯度凝胶电泳技术检测分析肠道微生态的特征.结果 腹盆腔照射诱发了肠道潘氏细胞隐窝素-1和4表达紊乱,照射3周或照射6周后停照1周,小鼠回肠隐窝素-1和-4均呈现显著性降低（t=-7.43、-3.54、-4.72、-4.27,P＜0.05）;而照射5周小鼠回肠隐窝素-1和-4表达明显升高（t=6.15、5.75,P＜0.05）.放疗模拟照射3和5周时小鼠肠道微生物区系多样性指数和丰富度显著降低（t=-3.49、-4.19、-3.44、-4.97,P＜0.05）,呈现以乳酸杆菌等益生菌减少,大肠杆菌和弗氏志贺氏菌等条件致病菌增多为特征的微生态失调.受照小鼠肠系膜淋巴结和血液中的细菌DNA阳性率明显增高.照射3和5周后回肠组织IL-1β、IL-6和TNF-α显著性高表达（t=4.85、6.16、7.71、4.60、4.86、5.97,P＜0.05）;照射6周后停照1周时,肠道促炎性因子的表达量有所回落,但IL-1β和TNF-α的表达量仍显著性高表达（t=3.67、5.88,P＜0.05）.结论 腹盆腔放疗可诱发肠道抗菌肽表达紊乱,引起肠道微生态失调,进而导致肠源性细菌移位及感染性炎症的发生.微生态可能成为减轻放疗患者消化道不良反应的有效干预靶点.

SELEX技术筛选钙通道特异性核酸适配体及其抗肥大细胞活化的作用

目的筛选针对Orai1分子第1膜外区蛋白的核酸适配体,探讨适配体通过拮抗钙离子释放激活通道(Ca2+release activation channel,CRAC)抑制肥大细胞活化的效应。方法构建随机单链DNA文库,利用不对称PCR对单链DNA文库进行扩增。采用聚苯乙烯酶联板为介质的指数富集配体系统进化(systematic evolution of ligand by exponential enrichment,SELEX)技术筛选核酸适配体。利用酶联免疫吸附实验检测各轮筛选序列与靶蛋白的亲和力,验证适配体与靶蛋白的特异性结合;激光共聚焦显微镜观察适配体对细胞内钙离子浓度变化的影响;利用IgE介导的肥大细胞脱颗粒模型,观察适配体对β-氨基己糖苷酶释放的抑制效应。结果经过12轮SELEX筛选,获得了7条核酸适配体,其中AptamerY1解离常数(Kd值)为1.72×10-8mol/L。以终浓度2μg/mL的AptamerY1可抑制由IgE介导的人肥大细胞系LAD2钙离子内流,并对LAD2细胞的β-氨基己糖苷酶释放抑制率达95%。结论通过SELEX筛选,获得了7条针对Orai1分子第1膜外区的核酸适配体,所获得适配体可对肥大细胞LAD2钙内流有效抑制,进而抑制肥大细胞活化和β-氨基己糖苷酶的释放。

贫铀长期接触后在大鼠体内的吸收分布特点

目的:检测贫铀长期接触后在大鼠体内各重要脏器的吸收分布特点。方法:通过手术在大鼠体内植入贫铀片或给予含贫铀50μg/L和70μg/kg饮水及饲料,建立植入/摄入贫铀动物模型。采用铀萤光发光法检测大鼠在接触贫铀1、6、12和18个月后体内各脏器的贫铀含量。结果:从1到18月,各个脏器中的贫铀含量均随接触时间的延长而增加。以肾脏和骨组织贫铀含量最高,第18个月摄入组肾脏及骨组织分别达到(3 305.61±1 234.30)ng/g及(2 804.57±1 518.01)ng/g,植入组分别达到(3 927.53±1 742.90)ng/g,(3 760.85±1 822.30)ng/g。结论:无论是植入途径还是摄入途径,肾脏和骨组织均为贫铀的主要蓄积靶器官。

干扰素诱导蛋白IFIT1的克隆与原核可溶性表达

目的研究干扰素诱导蛋白IFIT1的原核可溶性表达。方法通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)获得IFIT1编码序列,克隆入原核表达载体,电穿孔转化大肠杆菌,筛选阳性克隆,诱导细菌表达,蛋白凝胶电泳观察。结果构建的原核表达平台实现了较丰富的麦芽糖结合蛋白融合IFIT1(MBP-IFIT1)可溶性表达。结论 MBP-IFIT1的原核可溶性表达为后续IFIT1蛋白结合分析及免疫分析提供了材料及方法学基础。

贫铀对人肾小管上皮细胞的恶性转化及苯乙酸、亚硒酸钠的抑制作用

目的 :探讨贫铀 (DU)是否会引起人肾小管上皮细胞 (HKC)向恶性表型转化 ,以及抑制物是否可有效地抑制这种恶性转化 .方法 :将HKC用可溶性DU溶液 (0 .0 6 3～ 0 .5 0 0g/L)作用 2 4h后 ,再与 1.0～ 2 .5 μmol/L的苯乙酸 (PA)或亚硒酸钠 (SS)孵育 1d～ 3mo,观察不同代龄细胞的集落形成率、生长曲线、刀豆蛋白 (ConA)凝集实验、半固体琼脂集落形成率及裸小鼠成瘤性 ;检测脆性组氨酸三联体 (FHIT)蛋白在转化细胞中的表达 .结果 :传约 2 0～ 30代后 ,HKC在半固体琼脂中形成集落 ,注入裸小鼠后成瘤 .部分转化细胞的FHIT蛋白表达也较正常HKC减弱 .PA ,SS可明显减少HKC在半固体琼脂集落形成率至 (0 .6± 0 .1)‰ ,裸小鼠也无皮下肿瘤形成 (0 /3) (P <0 .0 5 ) .结论 :DU可诱发HKC向恶性表型转化 ;用PA ,SS抑制这种恶性转化的效果相似 .

Red/ET重组在基因打靶载体快速构建中的应用

通过合理应用Red/ET重组技术实现基因打靶载体的快速构建。在Red/ET重组介导下,首先从基因组DNA中将靶基因片段亚克隆至打靶质粒载体中,随后将两端带有50 bp同源臂的抗性筛选基因插入并替换靶基因上的目标序列,如此两步操作即可完成一个传统型基因敲除打靶载体的构建;结合Cre-loxP系统,在传统型基因敲除打靶载体的基础上,经过再一轮的Red/ET重组就能够成功实现条件性基因敲除打靶载体的构建。整个实验过程不需要PCR扩增长、短臂序列,也不涉及酶切、连接反应,因此,不仅省时、省力,而且所构建的基因打靶载体序列准确,无突变。实验方法的建立为加速后基因组时代的基因功能研究提供了一条捷径。

电离辐射后ERp29蛋白在IEC-6细胞中的表达

目的探讨大鼠空肠上皮细胞株(IEC-6)受到不同剂量γ射线照射后,ERp29蛋白(endoplasmic reticulum protein)在不同时相点的表达变化情况。方法分别提取正常IEC-6细胞和5、101、52、0 Gy照射后3、12、24、48、72 h细胞的蛋白样品,采用Western blotting方法检测ERp29的表达。结果不同剂量照射后IEC-6 ERp29蛋白表达比正常细胞高,蛋白表达随照射时间的增加而增加。结论电离辐射可诱导IEC-6细胞高表达ERp29蛋白,提示该蛋白在肠道的损伤修复中起重要作用。

贫铀长期摄入对大鼠某些性激素水平和睾丸的影响

目的研究贫铀低剂量长期摄人后对大鼠某些性激素含量及睾丸超微结构的改变。方法摄人组为初断乳35～55g大鼠，以含有50μg/L和70μg/kg的贫铀饮水及饲料喂食大鼠。采用放射免疫分析法检测贫铀摄人后3个月大鼠体内卵泡刺激素、间质细胞刺激素和睾酮水平，并分别在摄人贫铀后3、6、12和18个月进行大鼠睾丸的病理组织学及超微结构观察。结果性激素水平测定发现睾酮、间质细胞刺激素、卵泡刺激素含量在贫铀接触后有不同程度的改变。分别为（2．92±1．03）nmol／l，（0．865±0．18）mlU／ml和（0．243±0．079）mlU／ml。睾丸病理组织学检查发现间质细胞增生，后期出现曲细精管的萎缩。结论长期贫铀摄人可引起大鼠睾丸某些性激素水平变化和致睾丸损伤。