微核实验的分子生物学研究进展

随近年分子生物学技术的发展 ,及着丝粒和端粒DNA探针、染色体特异性文库DNA探针的应用 ,微核实验已发展成可检测染色体断裂、染色体丢失、染色体不分离、细胞分裂延迟和凋亡等多个终点的细胞分子毒理学检测方法 ,本文简要综述了微核实验在研究对象。

丙烯酰胺诱导人白血病HL-60和NB_4细胞hprt基因的分子突变谱

为了研究丙烯酰胺的遗传毒理作用 ,采用单细胞克隆培养 ,双向筛选计数 ,多重PCR扩增与电泳分析 ,研究了诱导HL 6 0和NB4 两种细胞hprt基因突变率及分子突变谱 .发现只有丙烯酰胺高剂量组 (70 0mg·L- 1)才对两种细胞有明确的致hprt基因突变作用 ;丙烯酰胺诱发突变主要由点突变和缺失两部分组成 (40 .0 %～ 6 6 .7% ,33.3%～ 6 0 .0 % ) ,而自发突变几乎全是点突变 (90 .0 %以上 ) ,两种细胞均无全基因缺失型 ;缺失突变可以发生于hprt基因上的每个外显子 (除外显子 7/ 8以外 ) ,较集中于基因的 3′末端 ,且诱发突变中绝大多数是点突变与单个外显子缺失 (93.3% ,86 .1% ) ,两种细胞情况类似 .结果提示 ,丙烯酰胺具有较弱的诱导hprt基因突变的作用 ,且诱发突变与自发突变的分子图谱不一样 。

基因芯片分析显示昆明山海棠有机萃取液经NF- κB及线粒体信号传导途径诱导HL- 60细胞凋亡(英文)

目的 研究中草药昆明山海棠 Tripterygium hypoglaucum( THH)有机萃取液诱导人早幼粒白血病 HL-6 0细胞凋亡过程的信号传导通道及分子机制。方法 应用流式细胞仪研究了 THH有机萃取液诱导 HL - 6 0细胞的凋亡过程 ,并应用包含 3 0 0 0人类基因与 EST的基因芯片进行基因表达差异分析。结果 基因芯片杂交结果显示有 16个基因表达发生大于 2倍的显著变化 ,这些基因同细胞生长 ,细胞周期调控 ,细胞分化 ,以及压力反应有关。部分基因在细胞凋亡过程中起关键作用 ,如 Caspase3和 Caspase8。结论 THH有机萃取液诱导 HL- 6 0细胞凋亡 ,该过程与 NF- κB和线粒体信号传导途径有关。

昆明山海棠根部水提液诱导HL-60细胞凋亡及对c-Myc基因表达的调控(英文)

目的 研究昆明山海棠 Tripterygium hypoglaucum(Celastraceae) (THH)根部水提液对早幼粒白血病HL- 6 0细胞凋亡的诱导作用及机制。方法 通过特征性的形态学观察 ,Annexin- V标记 ,以及流式细胞仪检测中次G1 峰的形成确定 THH的诱导细胞凋亡作用 ;应用 Western Blotting研究 THH对 c- Myc蛋白表达的影响。结果THH根部水提液可诱导早幼粒白血病 HL - 6 0细胞凋亡。在浓度高于 18μg/ m L时 ,THH对 HL - 6 0细胞的诱导凋亡作用呈现浓度与时间的相关性。在 THH处理 2～ 4 h后 ,癌基因蛋白 c- Myc表达降低 99%以上。结论 THH抑制了 c- Myc蛋白的翻译或后翻译过程 ,从而降低了 c- Myc在细胞周期运转中的作用 。

γ─射线诱导微核的电镜超微结构观察

γ─射线诱导微核的电镜超微结构观察曹佳，刘胜学，郑怀恩，程天民（重庆第三军医大学分子毒理学实验室６３００３８第三军医大学防原医学教研室）微核（ＭＮ）形成的基本机制已熟为人知，但仍有许多细节尚未搞清。如ＭＮ是否具有核膜、核仁，是否具有ＤＮＡ复制功能等等...

γ─射线诱导女性X染色体形成微核比率的研究

γ─射线诱导女性Ｘ染色体形成微核比率的研究曹佳，刘胜学，敖琳，钱频（重庆第三军医大学分子毒理学实验室６３００３８）已有观察证实随着女性年龄的增加，Ｘ染色体丢失率也增加。那么，在女性是否Ｘ染色体受报和丢失的比率要比常染色体大一些呢？本实验使用５Ｇｙγ─...

内毒素诱导人淋巴细胞微核形成的研究

内毒素诱导人淋巴细胞微核形成的研究杨录军，曹佳，刘胜学（重庆第三军医大学分子毒理学实验室６３００３８）内毒素是革兰氏阴性杆菌坏死后释放的主要毒素，在烧伤感染导致的各种病理生理变化中占据着重要地位。有关内毒素对脏器、细胞损害的报道已很多，但是否对染色体...

微核形态用于区分非整倍体毒剂和染色体断裂剂的研究

目的 :通过比较非整倍体毒剂和染色体断裂剂诱导的各种微核形态类别的差异 ,探讨以微核形态指标区分两类诱变剂的可能性。方法 :对 6种标准诱变剂 (非整倍体毒剂 :秋水仙碱 ,长春新碱 ;染色体断裂剂 :环磷酰胺 ,丝裂霉素C ,乙基磺酸甲酯 ,γ射线 )诱导的小鼠骨髓红细胞微核 ,进行形态学分类分析。结果 :①非整倍体毒剂诱导的环形微核率显著高于染色体断裂剂 (分别为 33 8± 2 8,17 4± 8 3;P =0 .0 0 3) ,而圆形微核率显著低于后者 (分别为 5 1 6± 6 5 ,72 3± 9 1;P <0 .0 0 0 1) ,肾形微核率有高于染色体断裂剂诱导的微核的趋势 ,但差别无显著性 (分别为 14 6± 6 7,10 2± 6 3,P =0 .0 7) ;两类诱变剂诱导的 3种类别的微核 95 %可信区间差异很大 ,其中圆形微核率和环形微核率完全分离 ;②得到通过微核形态区分两类诱变剂的判别方程。结论 :微核的圆形。

二甲基亚砜在λDNA重包装法中的遗传毒性研究

二甲基亚砜在λＤＮＡ重包装法中的遗传毒性研究曹阳，曾佳，胡维民（广州华南农业大学蚕学系５１０６４２重庆第三军医大学分子毒理学实验室６３００３８）二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）是化工行业广泛使用的有机溶剂和试剂，在突变研究中被广泛用作化学受试物的有机溶剂，历来...