伤口微环境对修复细胞生长调控规律的研究

伤口渗出液在很大程度上反映了伤口微环境状况。本研究通过比较伤后不同时间伤口渗出液对修复细胞增殖的影响，探讨了伤口微环境在调控修复细胞增殖方面的变化规律。结果显示：伤后第１，３，７天，伤口渗出液可刺激修复细胞生长。而伤后第９，１１，１５天，伤口渗出液在高浓度胎牛血清存在时，对修复细胞生长呈抑制作用；在低浓度胎牛血清存在时，后期伤口渗出液可诱导细胞死亡。提示在伤口愈合过程的后期。

血清源酸热稳定多肽促伤口愈合的研究

为了研究多肽促进伤口愈合的可能性，从猪血清中分离出一组酸、热稳定的多肽，分子量低于１８ｋｕ，无免疫原性、无毒副作用。用５０μｌ多肽制剂（５ｍｇ／ｍｌ）注入小鼠皮下埋置的聚乙烯醇海绵“死腔伤口”中，从致伤当日起，每日一次共５次；对照“死腔伤口”内注入５０μｌ牛血清白蛋白（５ｍｇ／ｍｌ）。伤后７，１０ｄ治疗组海绵中总ＤＮＡ、蛋白质及羟脯氨酸含量明显高于对照组，有显著差异（Ｐ＜０．０５），伤后１４ｄ两组间无差异（Ｐ＞０．０５）。体外实验发现，与对照基质１％胎牛血清１６４０液相比，含０．２％多肽制剂的对照基质可明显促进伤口修复细胞增殖，经统计学处理有显著差异（Ｐ＜０．０５）。结果证实，猪血清源分子量低于１８ｋｕ的酸、热稳定多肽，具有促伤口愈合的活性，直接促进伤口修复细胞生长是其发挥作用的机理之一。

创伤家兔血清免疫抑制性研究

创伤家兔血清免疫抑制性研究张玉纯，李磊，胡承香（第三军医大学野战外科研究所一室重庆６３００４２）本研究通过家兔双后肢粉碎性骨折模型，观察了家兔创伤前后不同时相血清对正常小鼠脾淋巴细胞转化及白细胞介素２（ＩＬ－２）诱生的影响。此实验为进一步探讨创伤后机...

NF-κB靶向性哑铃形"圈套"寡核苷酸对肾小球系膜细胞TNF-α的表达抑制作用的研究

目的:本实验设计合成靶向NF-κB的哑铃形圈套ODNs,并检测其对肾小球系膜细胞TNF-α表达的抑制效应。方法:以NF-κB顺式作用元件κB序列为模板,设计包含两个拷贝的κB序列,长度为58个碱基的环状IDNs,合成后部分序列做FAM标记,行转染效率鉴定实验。提取大鼠肾小球系膜细胞,随机分为正常对照组、LPS刺激组、哑铃形圈套ODNs处理组、无关圈套ODNs处理组和脂质体处理组。采用阳离子脂质体将2、4、8 mg／L不同剂量哑铃形圈套ODNs转染大鼠肾小球系膜细胞,6h后用LPS刺激,收集转染后8、12、18上清和细胞。用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测上清TNF-α蛋白表达,逆转录PCR(RT-PCR)法检测TNF-αmRNA转录。结果:阳离子脂质体可将哑铃形圈套ODNs高效转染入肾小球系膜细胞;4、8mg／L剂量哑铃形圈套ODNs可明显抑制LPS诱导的大鼠肾小球系膜细胞TNF-α转录和表达。结论:靶向NF-κB的哑铃形圈套ODNs对体外培养的肾小球系膜细胞炎性因子TNF-α的表达具有抑制效应。

NF-κB靶向性哑铃形圈套寡核苷酸抑制肾小球系膜细胞TGF-β_1的表达

目的 :设计合成靶向NF κB的哑铃形圈套ODNs,并检测其对NF κB转录活性和肾小球系膜细胞TGF β1 表达的抑制效应 .方法 :采用电泳迁移率改变实验 (EMSA)体外检测哑铃形圈套ODNs对NF κB转录活性的抑制效应 .提取大鼠肾小球系膜细胞 ,随机分为正常对照组、LPS刺激组、哑铃形圈套ODNs处理组、无关圈套ODNs处理组和脂质体处理组 .采用阳离子脂质体将 2 ,4 ,8mg/L不同剂量哑铃形圈套ODNs转染大鼠肾小球系膜细胞 ,6h后用LPS刺激 ,收集转染后 8,1 2 ,1 8h上清和细胞 .用酶联免疫吸附试验 (ELISA)法检测上清TGF β1 蛋白表达 ,逆转录PCR(RT PCR)法检测TGF β1 mR NA转录 .结果 :哑铃形圈套ODNs在体外能有效地抑制NF κB与其顺式元件的结合 ;4 ,8mg/L剂量哑铃形圈套ODNs可明显抑制LPS诱导的大鼠肾小球系膜细胞TGF β1 转录和表达 .结论 :靶向NF κB的哑铃形圈套ODNs在体外可抑制NF κB的转录活性 ,从而对体外培养的肾小球系膜细胞炎性因子TGF β1

肺泡巨噬细胞与急性肺损伤

肺泡巨噬细胞是肺部防御病原微生物和肺损伤的第一道防线 ,是目前受到重视的肺巨噬细胞亚群之一 ,对急性肺损伤的发生、发展及转归具有重要影响。

不同时期伤口渗出液对成纤维细胞的影响

伤口微环境的愈合状况．在一定程度上反映在伤口不同时期渗出液的质和量的变化。本文比较研究伤口不同天数渗出液对修复细胞的影响．探讨伤口微环境在调控修复细胞增殖的变化规律。实验结果表明1、3、7、日伤口渗出波可刺激修复细胞生长．而9、11、15日在高浓度胎牛血清（fetalcalfserum，FCS）存在时对修复细胞生长呈抑制作用,在低股牛血清时，后期伤口渗出液可诱导细胞死亡，可能系细胞凋零（Apoptosis）。愈合过程的后期伤口微环境中存在细胞生长抑制因子。

树突状细胞与趋化因子激活免疫应答的分子机制

免疫应答的产生首先是由抗原提呈细胞(APC)捕获抗原,经其加工、处理后将抗原信息传递给T、B淋巴细胞,从而引发一系列的特异性免疫应答.因此APC是机体免疫应答的首要环节,能否进行有效的抗原提呈直接关系到免疫激活或免疫耐受的诱导.APC包括树突状细胞DC、巨噬细胞(MΦ)、B细胞等,其中DC是功能最强的APC.DC因其成熟时伸出许多树突样或伪足样突起而得名,有别于其它APC.DC最大的特点是能够显著刺激处女型或初始型T细胞增殖,而巨噬细胞、B细胞能刺激已活化的或记忆性T细胞,因此DC是机体免疫应答的始动者,在免疫应答的诱导中具有独特地位.……

小鼠脾细胞核蛋白提取及核因子-κB活性的检测

应用高盐溶液提取法，高速离心分离纯化创伤小鼠脾细胞核蛋白，其核提取物经蛋白电泳分析，可见清晰蛋白条带。凝胶滞留法检测ＮＦ－κＢ的ＤＮＡ结合活性灵敏可靠。该方法的建立，为研究基因转录调控的表达奠定了基础。

大鼠创伤后腹腔巨噬细胞亚群的变化及与IL-6、TNFα的关系

目的 探讨创伤后免疫功能紊乱状态与巨噬细胞亚群的关系。方法 采用创伤失血模型 ,运用流式细胞仪分析单克隆抗体ED1、ED2单克隆抗体双标记表达情况 ,测定腹腔巨噬细胞 (pM)培养上清白细胞介素 6 (IL 6 )、肿瘤坏死因子 (TNFα)含量 (ELISA法 )。结果 正常大鼠pM分为ED1+ ED2 -亚群、ED1+ED2 + 亚群 ,无单纯的ED2 + 巨噬细胞亚群 ,创伤后ED1+ ED2 -亚群比例增加 ,ED1+ ED2 + 亚群比例降低 ,同时TNFα、IL 6分泌增加 ,内毒素 (LPS)刺激可增加TNFα、IL 6分泌水平。结论 创伤后细胞因子分泌紊乱可能与ED1+ ED2

人PD-L1真核表达载体的构建及结肠癌细胞稳定表达单克隆株的筛选和鉴定

目的:构建人程序性死亡配体1(PD-L1)重组质粒载体,筛选稳定高表达人PD-L1的结肠癌单克隆细胞株。方法:提取HCT116细胞总RNA,RT-PCR克隆PD-L1基因片段,将其重组至含有HA标签和Neo真核细胞筛选抗性的pc DNA3质粒载体上,转染HCT116细胞,倍比稀释8个细胞浓度至96孔板,G418筛选两周,挑取单细胞克隆,通过免疫印迹鉴定外源性PD-L1的表达;通过MTS、Transwell和软琼脂细胞克隆形成实验比较PD-L1低表达和高表达单克隆细胞株生长增殖、迁移和细胞克隆形成能力的差别;最后通过在两组细胞中过表达帽依赖性荧光素酶报告基因阐述造成上述表型的可能机制。结果:成功构建人PDL1的真核表达载体,并筛选获得稳定高表达PD-L1的HCT116单克隆细胞株。功能研究初步证明PD-L1可促进细胞克隆形成能力、迁移和生长增殖。过表达PD-L1可使帽依赖性荧光素酶报告基因的表达上调约3~4倍,表明其机制部分为PD-L1可上调帽依赖性蛋白质翻译。结论:获得了PD-L1重组质粒载体及可用于后续功能研究的稳定高表达人PD-L1的HCT116单克隆细胞株。

可塑性异种脱钙骨基质加释放系统修复骨缺损的研究

可塑性异种脱钙骨基质加释放系统修复骨缺损的研究林贵德，柯新华，王民刚，罗涛丽，李德琼异种脱钙骨基质（ＸＤＢＭ）加释放系统（ＤＳ）仍不能塑形易松散流失。实验添加明胶克服之并观察对其诱导成骨能力的影响。材料和方法一、材料制备１．ＸＤＢＭ用小公牛长骨干剪成...

血浆中的可溶性受体

可溶性受体的来源大致分为膜受体的胞外段经水解酶水解释放、基因选择性拼接、病毒基因的表达、人工基因重组。可溶性受体的作用机制包括作为相应膜受体的竞争者阻断配体的信号转导 ,作为血清结合蛋白转运、稳定、富集配体 ,下调膜受体数量 ,上调配体效应等。