BMSCs膜受体CXCR4和CXCR7表达及其在骨创伤修复中的作用

目的 探讨BMSCs膜表面受体CXCR4和CXCR7的表达及其在BMSCs迁移中的作用,为骨创伤修复提供理论依据.方法 选择C57BL/6小鼠经贴壁法培养获得第2代BMSCs,免疫荧光染色法和流式细胞技术检测BMSCs膜表面受体CXCR4和CXCR7的表达.趋化因子CXCL12诱导BMSCs迁移实验分为对照组（无血清培养基诱导BMSCs迁移）、CXCL12组（含CXCL12无血清培养基诱导BMSCs迁移）和CXCR4阻断组（含CXCL12无血清培养基诱导阻断膜受体CXCR4后BMSCs迁移）,统计BMSCs迁移数量,观察CXCR4和CXCR7趋化BMSCs迁移的作用.采用Western blot检测阻断膜表面受体CXCR4后CXCR7蛋白的表达.结果 免疫荧光结果显示大量BMSCs膜表面表达CXCR4和CXCR7.流式细胞仪检测结果显示BMSCs膜表面分子CXCR4的阳性率为96.4％,CXCR7的阳性率为97.3％.细胞迁移结果显示,CXCL12组BMSCs迁移量最高,CXCR4阻断组BMSCs迁移量显著低于CXCL12组但迁移量仍高于对照组（P＜0.01）,而阻断XCCR4后CXCR7蛋白表达升高.结论 CXCR4和CXCR7受体均表达于BMSCs膜表面,在CXCL12调节BMSCs迁移至骨创伤创面过程中CXCR4发挥主要作用.

三种不同免疫状态小鼠皮肤创面愈合过程中基质细胞衍生因子-1的表达

目的观察3种不同免疫状态小鼠皮肤创面愈合过程中基质细胞衍生因子-1（SDF-1）的基因表达。方法采用差异性贴壁法分离纯化BALB／C雄性小鼠骨髓源性干细胞（BMSCs），取第3代BMSCs进行成脂、成骨诱导鉴定；同时另取第3代BMSCs，经尾静脉注射到3．5Gy放射性损伤后的雌性BALB／C鼠、裸鼠、SCID鼠体内，小鼠背部皮肤制作一直径为1．5cm的创面，建立骨髓移植嵌合体皮肤创伤动物模型，观察创面的愈合过程，并于伤后1、3、5、7、14d获取创面组织，应用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测创面组织中SDF。1的基因表达。结果提取的BM—SCs可以成功进行成骨、成脂诱导分化；创面愈合过程中BALB／C鼠SDF-1基因表达于伤后1d即有增高，5d达峰值（P〈0．01），然后逐渐下降，14d创面基本愈合时接近对照组。裸鼠、SCID鼠创面中SDF-1基因表达于伤后逐渐增高，7d达峰值（P〈0．01），与BALB／C鼠比较，SDF-1基因表达峰值延后，14d创面未愈，SDF-1基因表达仍高于对照组。结论皮肤创面愈合过程中，SDF-1趋化BMSCs，参与创面愈合的炎症反应期和增殖期的修复过程，在创面愈合中起着重要作用；机体的免疫功能也将影响BMSCs募集，从而影响创面愈合。