实验性迷路炎豚鼠耳蜗NF-κB p65的表达及意义

目的探讨实验性迷路炎时,豚鼠耳蜗核转录因子-κB(nucleartranscription factor κB,NF-κB)的分布特点及其在迷路炎发病中的作用.方法将12只豚鼠随机分为实验组和对照组,实验组9只(18耳)以lmg/ml内毒素(lipopolysaccharide,LPS)0.2ml缓慢注入中耳腔,对照组3只(6耳)则以等量生理盐水注入,观察6h、48h、14d的ABR反应阈及光镜下耳蜗的病理变化,用免疫组化染色检测耳蜗NF-κB p65的表达.结果(1)ABR反应阈:与对照组相比,实验组豚鼠反应阈6h开始升高,48h进一步加重,14d时降至正常.(2)耳蜗形态学改变:对照组耳蜗各部位无明显炎症反应;实验组6h时,血管纹、螺旋韧带、蜗螺旋轴静脉等充血、水肿、炎细胞浸润,Corti器支持细胞和感觉细胞轻度肿胀、变性;48h时加重;14d时各部分结构恢复正常.(3)NF-κB p65的表达:在正常对照组,NF-κB p65表达于豚鼠螺旋韧带Ⅰ型纤维细胞的胞浆;在实验组则于6h和48h表达于耳蜗的多个部位如螺旋韧带Ⅰ～Ⅴ型纤维细胞、根细胞、螺旋缘和螺旋神经节细胞等,以胞核染色为主;48h染色强于6h(P＜0.05),而14d与对照组无显著性差异(P＞0.05).结论急性迷路炎的发生可能与NF-κB p65的活化有关,推测其作用机制可能是鼓室内LPS的刺激引起NF-κB过度活化而导致了耳蜗的炎性损伤和听力损害.

庆大霉素作用下豚鼠耳蜗螺旋神经节细胞bcl-2及Bax的表达

目的探讨bcl-2蛋白家族与庆大霉素诱导耳蜗螺旋神经节细胞凋亡的关系。方法对豚鼠进行庆大霉素连续肌肉注射,150mg/kg×10d,分别于停药后1、3、7、14d各处死豚鼠8只,取耳蜗,做平行蜗轴的石蜡切片,用免疫组织化学方法检测连续用药后不同时间耳蜗螺旋神经节细胞bcl-2及Bax的表达变化情况。结果耳蜗螺旋神经节细胞bcl-2表达增强,3d时表达达到高峰,7d时有所下降,14d时bcl-2表达明显减弱;Bax的表达在3d时达到高峰,7d时表达较3d时下降,14d时Bax表达减弱。结论庆大霉素作用下,bcl-2和Bax表达发生变化,bcl-2蛋白家族参与了庆大霉素诱导的耳蜗螺旋神经节细胞凋亡。

核因子-κB在中耳胆脂瘤中的表达

目的观察核因子-κB(NF-κB)在中耳胆脂瘤中的表达,探讨其在胆脂瘤上皮细胞高度增殖过程中的作用。方法应用免疫组化法检测26例胆脂瘤上皮、20例正常外耳道皮肤中NF-κB及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况。结果胆脂瘤上皮细胞均出现明显的NF-κB核转位,NF-κB及PCNA的表达显著高于正常外耳道皮肤组织,差异有统计学意义(P<0.01)。结论中耳胆脂瘤上皮具有高度增殖能力,NF-κB在胆脂瘤组织中的激活可能是中耳胆脂瘤上皮细胞过度增殖的一个原因。

豚鼠内耳Na,K-ATP酶α亚基异构体的表达

目的 研究豚鼠内耳组织中Na ,K -ATP酶α亚基三种异构体α1、α2 、α3 的表达及其意义。方法 用小鼠抗大鼠Na ,K -ATP酶α亚基异构体特异性单克隆抗体 ,采用免疫组化SP法观察豚鼠耳蜗、半规管、椭圆囊及球囊组织中Na ,K -ATP酶α亚基三种异构体的表达模式。结果 α1亚基异构体广泛分布于内耳组织的各个部位 ,特别是上皮细胞和螺旋神经节细胞中 ,α2 和α3 亚基异构体则主要分布于螺旋神经节细胞、Corti器及血管纹。结论Na,K -ATP酶亚基异构体在内耳不同部位的表达差异表明不同的内耳细胞转运Na+ 和K+ 的能力不同 。

IL-2、TNF-αmRNA在迷路炎豚鼠耳蜗中的表达

目的:探讨迷路炎时,豚鼠耳蜗IL - 2、TNF -αmRNA的表达变化及其与迷路炎的关系。方法:随机将2 4只豚鼠分为实验组和对照组,实验组18只、36耳,将1mg .ml- 1内毒素(lipopolysaccharide ,LPS) 0 .2ml缓慢注入中耳腔,对照组6只、12耳注入等量生理盐水,观察6h、4 8h、14d耳蜗的病理变化;用原位杂交技术检测IL - 2、TNF -αmRNA在耳蜗的表达,用Tiger92 0图像分析软件分析图象。结果:(1)耳蜗形态学改变:鼓室注药后6h ,实验组豚鼠耳蜗的血管纹、螺旋韧带、蜗螺旋轴静脉等即可见充血、水肿、炎细胞浸润,Corti器支持细胞和感觉细胞轻度肿胀、变性;4 8h时加重;14d时耳蜗各部分结构恢复正常。对照组豚鼠耳蜗各部分结构无改变;(2 )IL - 2mRNA的表达:对照组耳蜗无IL - 2mRNA表达;鼓室注射LPS后6h ,实验组耳蜗的螺旋神经节、螺旋缘呈阳性表达,血管纹、螺旋韧带呈可疑阳性;而4 8h、14d无表达;(3)TNF -αmRNA的表达:对照组耳蜗无TNF -αmRNA表达;鼓室注射LPS后6h ,TNF -αmRNA广泛表达于实验组耳蜗的螺旋神经节、Corti器、螺旋缘、血管纹、螺旋韧带等部位,4 8h表达明显增强(P <0 .0 1) ,14d时仅螺旋神经节呈弱阳性染色。结论:IL - 2、TNF -α可能与急性迷路炎的发生有关,TNF -α则可能起着更为重要的作用。

咽喉结核32例报告

目的 探讨咽喉结核的发病趋势与临床变化。方法 回顾性研究第三军医大学大坪医院 1982～ 2 0 0 0年 12月间 32例咽喉结核的临床资料。结果 ①咽喉结核局部病变以单一病灶为主 ,主要侵犯声带 ( 10例 ) ;②病变形态以肿块 ( 11例 )或肉芽 ( 8例 )增生为主 ;③治疗以系统抗结核治疗为主 ,手术治疗为辅。 12例患者临床愈合 ;6例行手术治疗一期愈合 ,无并发症 ;14例经系统抗结核治疗后均得到有效控制。结论 咽喉结核的既往典型特征已不明显 ,现今临床症状与局部病变密切相关。

盐酸左西替利嗪对124例变应性鼻炎的前瞻性临床研究

目的评价盐酸左西替利嗪治疗变应性鼻炎的临床疗效及安全性。方法选择124例变应性鼻炎患者,其中西替利嗪组61例,左西替利嗪组63例,采用多中心、随机、双盲、对照临床研究。结果治疗2周后左西替利嗪组改善情况评价明显好于西替利嗪组,两组差异有统计学意义(P<0.05),治疗3周后西替利嗪组的总有效率为83.61%,左西替利嗪组为87.30%,两组差异无统计学意义(P>0.05)。两组共发生不良反应4例,西替利嗪组不良反应的总发生率为3.28%,左西替利嗪组为3.17%(P>0.05)。结论盐酸左西替利嗪片治疗变应性鼻炎安全、有效。

中等强度冲击波负压暴露后豚鼠耳蜗毛细胞核形态学观察

目的观察冲击波负压(BUP)暴露后早期豚鼠耳蜗毛细胞胞核的病理形态学变化。方法将豚鼠在负压峰值为-44.5^-48.8kPa的中等强度BUP暴露3次,于BUP暴露后7d解剖取出耳蜗,应用DNA荧光染料Hoechst 33342显示毛细胞核,在荧光显微镜下毛细胞病理损害情况并进行计数。结果BUP暴露后7d,豚鼠耳蜗毛细胞可见胞核肿胀、胞核缺失、胞核固缩3种病变,以核肿胀发生最高,其次是核缺失,核固缩最为少见,3种病变的总发生率达(17.3±3.2)%,明显高于正常对照组(P<0.001)。结论BUP暴露可导致耳蜗外毛细胞核明显的病理性改变,这种改变可能是造成听力损失的主要原因之一。

提高乳突手术后干耳率的对策

目的探讨提高慢性化脓性中耳炎乳突根治术后干耳率的对策。方法对360例行乳突手术患者的临床资料进行分析。结果随访6个月后,330例住院手术患者中有27例术后未干耳,干耳率为91.8%。门诊发现30例在外院行中耳手术后未干耳病例。在所有未干耳患者中18例术腔内肉芽增生或胆脂瘤复发,24例面神经嵴过高,12例外耳道口狭窄,3例术后换药不当。结论术中彻底清除病变,术腔引流通畅,重视术后术腔换药是提高乳突手术后干耳率的重要环节。术后不干耳患者经术腔换药治疗无效,可再次手术治疗。

豚鼠冲击波负压暴露后耳蜗毛细胞扫描电镜和透射电镜观察

目的探讨冲击波负压(BUP)暴露后豚鼠耳蜗毛细胞的超微结构变化特点。方法将豚鼠暴露于不同强度的实验性BUP 1次,8h^7d后应用扫描电镜和透射电镜技术观察耳蜗基底膜毛细胞的超微结构变化。结果负压峰值为-22.4^-63.3kPa的BUP暴露后,豚鼠耳蜗毛细胞的超微结构变化发生了不同程度的病理性改变,主要表现为第2、3排外毛细胞散在性缺失,甚至节段性外毛细胞缺失、纤毛融合甚至巨纤毛形成及胞浆溢出,纤毛内微丝解聚、线粒体肿胀、溶酶体数量增多和胞浆内空泡形成。结论不同强度的BUP暴露可导致豚鼠耳蜗毛细胞的超微结构病变,且BUP强度越高,病变越重。

儿童分泌性中耳炎临床分析

目的探讨儿童分泌性中耳炎的临床特点及不同治疗方案的治疗效果。方法回顾性分析50例患者的临床资料,收集资料完整的听力学检查结果20例做治疗前后的对比。结果儿童渗出性中耳炎易反复发作,本组患儿每年发作2次以上者26例(52.0%)。但该病也表现一定的自限性。鼓膜穿刺或置管并同时切除增殖体病变后,患儿听力显著提高(P<0.05)。结论鼓膜穿刺治疗有效,但对反复发作顽固性渗出性中耳炎患儿应行鼓膜置管,时间应当保留6个月以上;并积极处理增殖体病变。

内耳手术围手术期护理

目的总结内耳手术围手术期护理经验。方法对216例内耳手术护理进行回顾总结。结果216例内耳手术，眩晕控制率78％，听力得以保存或提高的占65％，有16例出现不同程度的面瘫，5例发生脑脊液耳漏，8例表现出明显的紧张、焦虑等心理。结论内耳手术为无菌手术，术前彻底清洁外耳道；术后卧床休息5～7d；严密观察全脑征；观察有无面神经损伤症状；观察有无脑脊液耳漏等。同时做好心理疏导工作。

冲击波暴露合并缺氧对豚鼠内耳的影响

目的探讨急性缺氧对冲击波暴露后豚鼠听功能和听毛细胞损伤的影响。方法对冲击波暴露后不同组采用耳蜗基底膜铺片技术和听性脑干反应测试技术进行观测。结果冲击波暴露后单纯冲击伤组、冲击伤加缺氧组听阈均较暴露前明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),听毛细胞受到损伤,冲击伤加缺氧组更为明显。结论冲击波暴露后早期听阈阈值及听毛细胞损伤与缺氧有密切关系。

豚鼠耳蜗和内淋巴囊水通道蛋白的表达

目的 研究豚鼠耳蜗和内淋巴囊组织中水通道蛋白 (aquaporin ,AQP)不同亚型的定位表达及其意义。方法 用兔抗大鼠AQP1、AQP2、AQP3、AQP4的多克隆抗体 ,采用免疫组化SP法分别检测相应AQP蛋白亚型在豚鼠耳蜗和内淋巴囊组织中的表达模式。结果 在耳蜗组织中 ,AQP1、4广泛分布于耳蜗的各个区域 ,如血管纹、螺旋韧带、Corti器、螺旋缘、螺旋神经节等 ,AQP3除了在血管纹表达呈弱阳性外 ,其余区域的表达与AQP1和AQP4相似 ,AQP2则仅表达于Reissner膜。在内淋巴囊组织中 ,AQP1、AQP3和AQP4在内淋巴囊上皮细胞和上皮下纤维组织均呈强阳性表达 ,只是AQP3的表达强度稍弱于AQP1和AQP4 ,而AQP2在内淋巴囊上皮细胞和上皮下组织均呈阴性表达。结论 水通道蛋白 1、3、4以相似的方式广泛分布于豚鼠耳蜗和内淋巴囊组织中 ,而AQP2则仅表达于Re issner膜 ,提示不同亚型的AQP可能在不同区域协同作用参与内淋巴的调节 。

冲击波作用下豚鼠耳蜗螺旋神经节细胞PARP的表达

目的观察气体冲击致豚鼠耳蜗损伤后耳蜗螺旋神经节细胞PARP的表达。方法20只豚鼠随机分为2组,实验组用YBD-2000型冲击波发生器对豚鼠耳蜗致伤,实验前后测试听力,12h后处死动物制作耳蜗标本,免疫组化法测定耳蜗螺旋神经节细胞PARP的表达。结果ABR:实验组听性脑干反应阈值(ABR阈值为50.94±5.98)较正常对照组(ABR阈值为5.60±1.78)明显上升(P<0.01),听力下降明显。免疫组化显示:实验组耳蜗螺旋神经节细胞PARP表达阳性,对照组无阳性表达,愈近底回愈多,愈近顶回则愈少。结论PARP在气体冲击致豚鼠耳蜗螺旋神经节细胞损伤后呈阳性表达,提示耳蜗螺旋神经节细胞凋亡在冲击波致聋的发病机制中起重要作用。

急性缺氧后早期豚鼠耳蜗糖皮质激素受体表达的变化

目的观察缺氧后早期豚鼠耳蜗糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)的变化特点。方法利用低氧舱使动物缺氧,应用免疫组化SP法结合图像分析技术检测缺氧后豚鼠耳蜗GR的表达。结果缺氧后GR在豚鼠耳蜗各回均有不同程度的染色,主要阳性部位是螺旋韧带、血管纹、螺旋器和螺旋神经节。与正常组相比缺氧后早期GR在耳蜗各阳性部位的表达均明显减弱,其中在螺旋韧带和血管纹的表达减弱最明显,有统计学意义(P<0.01)。结论缺氧可使GR在豚鼠耳蜗中的表达减弱。缺氧对耳蜗的损伤可能和GR表达的减弱有关。