专业学位研究生拓展临床科研思维的探索

1991年我国硕士专业学位的教育开始起步,但大部分院校是2009年才开始规范的硕士专业学位研究生全日制培养的,近年来,国家教育部明确指出：“硕士研究生培养基本上是以面向实际应用为主”并希望能够“进一步调整和优化硕士研究生培养的结构,将硕士研究生教育逐渐从以培养学术型人才为主的模式向以培养临床应用型人才为主的模式转变,实现研究生教育在规模、质量、结构、效益等方面的协调和可持续发展”。

新改良PCR／LDR／毛细管电泳技术产前诊断胎儿β-地中海贫血的可行性研究

目的研究采用新改良聚合酶链反应(PCR)/连接酶检测反应(LDR)/毛细管电泳技术产前诊断胎儿β-地中海贫血的可行性。方法使用不同浓度梯度的正常DNA与微量β-地中海贫血突变杂合子DNA混合后进行PCR扩增,扩增产物进行LDR反应后通过毛细管电泳技术检测其连接产物。采用CEQ8000型遗传分析仪分析LDR产物,并观察其灵敏度。结果将含有相同浓度CD17(A→T)突变的扩增产物作为LDR模板,采用8U DNA连接酶进行连接反应,检测灵敏度可达1:5000,产物峰的面积随着正常人外周血DNA浓度的增加而减少,至1:10 000处不能与杂峰区分,且无CD17(A→T)突变扩增产物的阴性对照未检测到LDR产物。正常孕妇血浆DNA中加入20pg CD17(A→T)突变杂合子外周血DNA扩增产物,LDR产物峰可明显与杂峰区分。结论新改良PCR/LDR/毛细管电泳技术有望通过孕妇血浆DNA检测进行β-地中海贫血的产前诊断。

小鼠合体滋养细胞微绒毛膜制备方法的研究

目的建立一种制备小鼠合体滋养细胞微绒毛膜(STBM)的方法。方法收集足月孕小鼠的胎盘,利用机械分离法剪碎胎盘进行差速离心,分离小鼠STBM。用Lowry法测定制备的小鼠STBM蛋白水平,用组织多肽抗原作为小鼠STBM的标记物,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测STBM的水平,利用电镜观察并分析小鼠STBM的形态结构。结果实验获得的小鼠STBM制剂的蛋白水平为(0.69±0.12)mg/mL,TPA水平为(61.49±9.78)ng/mL。电镜下小鼠STBM的直径为(228.52±90.06)nm的囊泡状结构。结论制备的小鼠STBM与人STBM高度相似,可为子痫前期致病机制的探索提供在体研究的实验基础。

妊娠期胆汁淤积症对胎儿影响的研究进展

妊娠期肝内胆汁淤积症（ICP）是一种特发于妊娠中、晚期特发的疾病，其病因及发病机制迄今不明。它以妊娠期出现皮肤瘙痒及肝内胆汁淤积的血液学生化指标异常为特点，发病率为0．8％-12．O％，有明显的种族和地域差异。ICP是孕妇的一种妊娠并发症，其病因及发病机制迄今不明。但对围产儿有严重的不良影响，可导致早产、羊水胎粪污染，难以预测的胎死宫内及新生儿窒息等，增加围产儿患病率及病死率，导致剖宫产率上升。

细胞骨架与人滋养细胞迁移关系的研究进展

滋养细胞迁移与细胞骨架密切相关,若细胞骨架中微丝微管的动态性重组受阻,则滋养细胞迁移受到抑制,其侵袭入子宫螺旋动脉及蜕膜层不足,导致滋养细胞着床变浅,进而引起胎盘缺血缺氧,最终导致子痫前期的发生。而滋养细胞浅着床是子痫前期发病的关键环节,滋养细胞的浸润深度直接影响子痫前期的发病。因此研究细胞骨架与人滋养细胞迁移之间的关系对深入了解子痫前期的发病机制具有重要意义。近年来关于细胞骨架在滋养细胞迁移中的作用时有报道,本文对此加以综合分析。

PEDF对小鼠树突细胞表型及免疫功能影响的实验研究

目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)对小鼠骨髓源性树突细胞(BMDCs)表型及其免疫功能的影响。方法从小鼠骨髓中分离单个核细胞(MNC),用小鼠重组粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)、小鼠重组白细胞介素-4(rmIL-4)培养5d后将其分为5组,实验组分别加入50、100、200ng/mL PEDF,阳性对照中加1μg/mL脂多糖(LPS),阴性对照中加等量的RPMI1640培养基(对照组),继续培养3d。流式细胞术(FCM)分析DCs表面CD11c、CD80、CD86表达情况,混合淋巴细胞反应(MLR)检测BMDCs对T细胞的刺激能力,ELISA法检测其培养上清液中IL-12水平。结果 PEDF处理后的BMDCs明显上调了CD11c、CD80和CD86的表达,并能明显增强T细胞的活性,促进其分泌IL-12。结论 PEDF可明显上调体外培养的小鼠BMDCs免疫标记分子的表达,并增强其免疫活性。

关注产科出血

＂产科出血危及母亲生命＂自2008年提出以来已经受到广泛的关注。产科出血中86.6%是产后出血,产前出血占13.4%。全球每天有1 000名妇女死于产科并发症,99%在发展中国家,并且主要集中在非洲和南亚国家。2005年世界卫生组织公布的一项数据显示,全球每年大约有60万孕产妇死亡,产后出血所致的占25%,

胎盘合体滋养细胞微粒注射对孕鼠肾功能和病理形态损伤的研究

目的观察经孕鼠尾静脉注射合体滋养细胞微粒(syncytiotrophoblast microparticles STBM)后,小鼠肾功能及肾脏病理改变。方法收集孕18 d C57小鼠的胎盘,制备小鼠合体滋养细胞微粒,利用电镜观察C57小鼠STBM的形态结构,BCA法测定C57小鼠STBM的蛋白水平;将C57孕鼠分为STBM组、对照组和PBS组,STBM组:自C57小鼠孕8 d起,每天以蛋白浓度为0.15 mg/m L的STBM(0.2 m L)经鼠尾静脉回输至小鼠体内,至孕18 d时收集小鼠24 h尿液测定尿微量蛋白(M-TP)、尿肌酐(U-Crea)、尿蛋白肌酐比(M-TP/Cr)、尿酸(U-Uric)、24 h尿蛋白(24 h U-TP),采集全血测定血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、胱抑素C(Cys-C),取肾脏标本切片后行HE染色观察肾组织结构变化;对照组:正常孕18 d小鼠收集尿液、采集全血、取肾脏进行检测;PBS组:自孕8 d起每天经鼠尾静脉注射PBS 0.2 m L,余处理同STBM组。结果 STBM组孕鼠尿液M-TP、M-TP/Cr、24 h U-TP明显高于对照组和PBS组(P<0.01),与对照组比较,PBS组U-Uric未见明显变化(P>0.05),而STBM组U-Uric显著降低(P<0.01);STBM组血清BUN、Scr、Cys-C含量显著升高(P<0.01);STBM组肾脏HE染色可见肾小球内皮细胞增生、肿胀、变形,肾小管云雾状变性。结论类子痫前期模型鼠有肾损伤,STBM可能在子痫前期肾损害中起重要作用。

950例宫颈癌临床特征研究

目的总结并分析近10年来第三军医大学大坪医院收治的宫颈癌患者的临床特征。方法回顾性分析2004年1月-2013年12月第三军医大学大坪医院经病理证实的浸润性宫颈癌患者的临床资料,并将患者按照不同年龄段分组,就其年龄构成、临床特征、病理类型、手术选择等进行分层研究。结果共纳入浸润性宫颈癌患者950例,平均年龄46.9岁。不同年龄段的患者其临床特征、病理类型及手术方案的选择各有不同。从入院患者年龄构成来看,发病年龄呈逐年增长的趋势。结论不同年龄段宫颈癌患者发病各有特征,应分年龄段制定防控措施。

MMP-9及其相关因子与宫颈癌

宫颈癌是全球女性常见的恶性肿瘤之一,其占女性新增癌症患者的9%（529 800）,癌症死亡总数的8%（275 100）[1]。宫颈癌晚期死亡的主要原因之一就是癌细胞的浸润和转移。肿瘤细胞侵袭和转移的步骤之一是对细胞外基质（extracellular matrix,ECM）的降解,而ECM降解的关键酶是基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）。

甲状腺癌颈部淋巴结清扫术后并发症25例分析

甲状腺癌是最常见的甲状腺恶性肿瘤，约占全身恶性肿瘤的1%。手术切除是除未分化癌以外各型甲状腺癌的基本治疗方法，甲状腺癌的手术治疗包括甲状腺腺体本身的手术，以及颈部淋巴结清扫（临床上常简称颈清术）[1]，在清扫过程中，由于甲状腺解剖复杂、血管神经丰富、淋巴系统变异较多、手术范围大、创伤大，并发症率高，严重危及生命。我科自2009年1月至2013年7月共行甲状腺癌切除加颈清术152例，术后25例出现并发症，经积极处理后均取得满意疗效，现将术后并发症及应对措施总结报告如下。

二胎生育与高危妊娠

全面放开二胎生育,妊娠质量十分重要,孕前和孕期保健是降低孕产妇死亡和出生缺陷的重要措施。有准备、有计划地妊娠,避免出生缺陷和妊娠并发症应当关注。

印迹基因在子痫前期发病中的作用

子痫前期(preeclam psia,PE)是母体常见的妊娠期并发症之一,有关病因学说的研究历时半个多世纪,至今病因不明。许多临床现象引发我们深思,从胎盘浅着床的滋养层局部的改变,到终止妊娠是解脱母体伤害,保障母婴平安的唯一方法,但始终没有找到问题的症结,使治疗无法掌控。随着母胎医学的研究深入,子痫前期的研究让人们聚焦在母胎对话的界面上,印迹基因作为90年代后期关注的表观遗传学领域的重要代表。

妊娠期高血压疾病扩容治疗

妊娠期高血压疾病（hypertensivedisorderscomplicatingpregnancy，HDCP），是妊娠期特有的一组与血压升高并存的疾病，是多因素参与的综合结果，

异位妊娠危险因素及诊断研究进展

11世纪，一位阿拉伯医生从患者脐部化脓性窦道中拉出了胎儿骨骼，继而第一次提出了异位妊娠（ectopic preg—nancy，EP）的概念，意指受精卵在子宫腔以外的部位着床发育，是妇产科常见急症，也是妊娠早期孕妇死亡的首要原因，其发病率1．5％-2．0％，而发展中国家更高。统计显示发展中国家死亡率高达9％-14％，并呈逐年上升趋势”。目前，我国异位妊娠发病率总体呈上升趋势，但准确数字尚有待大宗病案流行病学研究结果”。

合体滋养细胞微泡对树突状细胞免疫功能影响实验研究

目的研究小鼠合体滋养细胞微泡(STBM)对骨髓源性树突状细胞(BMDCs)免疫功能的影响。方法 2015年于第三军医大学大坪医院野战外科研究所妇产科中心,机械分离法将小鼠胎盘剪碎,采用差速离心法制备合体滋养细胞微泡。添加重组粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rm GM-csf)、重组白细胞介素-4(IL-4)培养骨髓源性树突状细胞,6 d后将其分为阴性对照组和实验组1、2、3、4以及阳性对照组。实验组1、2、3、4分别加入终浓度为1.0、1.5、2.0、2.5 mg/L的STBM,阴性对照组加等量的磷酸盐缓冲液(PBS),阳性对照组加入2.0 mg/L的脂多糖(LPS),继续培养2 d。流式细胞学技术(FCM)检测树突状细胞表面标志物CD11c及CD86的表达情况。同时ELISA法检测不同浓度STBM诱导下树突状细胞(dendritic cells,DCs)分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α),干扰素-γ(IFN-γ)及IL-12的含量。结果不同浓度STBM处理后的BMDCs明显上调了CD11c、CD86的表达,其中1.0、1.5、2.0、2.5 mg/L的STBM诱导DCs的CD11c/CD86双阳性表达率分别为46.1%、56.9%、60.5%、88.9%,与PBS组(18.2%)相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。不同浓度的STBM刺激DCs后产生的TNF-α[(6.91±1.37)、(7.98±1.55)、(9.40±0.93)、(12.65±1.62)ng/L],IFN-γ[(12.14±1.39)、(17.52±1.67)ng/L]及IL-12[(6.98±1.19)、(7.88±0.10)、(9.18±1.69)ng/L]分别与各PBS组[(3.61±0.64)、(3.15±0.90)、(3.51±1.09)ng/L]相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 STBM促进DCs的成熟,激活母体系统性炎症反应,可能是引起子痫前期发生重要原因。

产科出血血栓并发症及二者平衡问题

产科出血和栓塞是产科常见的两大严重威胁母亲生命并发症,产科出血及血栓并发症及二者平衡问题应当引起关注。妊娠和产褥期妇女是一个特殊的群体,在产前进行凝血功能检查非常必要。产科出血和静脉血栓栓塞症,重要的在于重视、早期识别、积极处理。

子痫前期研究现状与思考

妊娠期高血压疾病是妊娠与高血压并存的一组疾病,是妊娠期特有的一种系统性疾病,是母体、胎盘、胎儿等众多因素参与的综合结果。子痫前期多器官功能损害发生早,对母婴危害大,但至今病因不明,本文对该病发病及死亡情况、病因及影响因素、研究现状及未来展望进行简述,旨在与同道们共同关注。

树突状细胞对宫颈癌作用的研究进展

人乳头瘤病毒(human papilloma viruses,HPV)的持续性感染已被证实与宫颈癌的发生关系十分密切,尤其是高危型HPV(主要为HPV-16、HPV-18)的感染。在HPV感染导致宫颈癌发生的过程中,宫颈局部的微环境发生了一系列的变化,比如细胞的迁移、增生、化生,细胞因子的产生、增加或减少,新通路的产生等。同时,导致机体将产生一系列的免疫反应,即细胞免疫和体液免疫,但主要是细胞免疫。其中,T细胞介导的细胞免疫发挥着主导作用,在激活T细胞的过程中需要抗原递呈细胞(antigen presenting cells,APC)的参与,而树突状细胞(dendritic cells,DC)正是启动和调节免疫反应的APC。故对于感染HPV的患者发生宫颈癌时,DC在宫颈局部发挥的作用非常关键。因此,对DC进行研究在宫颈癌的研究中有着举足轻重的作用。

产后出血及其临床救治

产后出血是一种常见的并发症,是产妇发病率和死亡率的主要原因。产后出血有许多潜在的原因,但最常见的是子宫收缩乏力。所有产科工作人员和参与孕产妇保健的工作人员,必须有一个产后出血的预防和管理的明确计划。应当记住:"一到位,两个重视,三个正确",提高产后出血救治水平。