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人骨保护素基因重组腺病毒的构建及鉴定
被引量:
1
1
作者
王晓军
王爱民
+6 位作者
张忠荣
吴思宇
郭庆山
吴军
贺伟峰
汤守营
张全顺
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
2005年第2期167-170,共4页
目的构建人骨保护素(hOPG)基因的重组腺病毒载体并检测其转染能力。方法采用基因工程技术,将hOPG基因片段插入到腺病毒载体质粒pAdTrack-CMV上,利用PadEasy系统与骨架质粒在大肠杆菌BJ5183胞内进行同源重组,经293细胞包装、扩增,得到携...
目的构建人骨保护素(hOPG)基因的重组腺病毒载体并检测其转染能力。方法采用基因工程技术,将hOPG基因片段插入到腺病毒载体质粒pAdTrack-CMV上,利用PadEasy系统与骨架质粒在大肠杆菌BJ5183胞内进行同源重组,经293细胞包装、扩增,得到携带hOPG基因的重组腺病毒AdEasy-PAdtrack-CMV-hOPG,将重组腺病毒AdhOPG对大鼠骨髓基质细胞(rMSCs) 进行感染。采用PCR方法对重组腺病毒载体进行鉴定,利用绿色荧光报告基因转染结果,以荧光计数法检测重组腺病毒的滴度。结果酶切鉴定及PCR结果证明hOPG基因重组腺病毒载体成功, 病毒滴度可达2.5×108pfu/ml,具有很强感染能力,结论应用细菌内同源重组法,成功构建了含 hOPG重组腺病毒载体。
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关键词
人骨保护素
基因重组腺病毒载体
adEasy系统
大鼠骨髓基质细胞
细菌内同源重组法
基因工程技术
293细胞
PCR方法
载体质粒
基因片段
大肠杆菌
骨架质粒
基因转染
酶切鉴定
病毒滴度
感染能力
G基因
hOP
计数法
检测
荧光
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职称材料
题名
人骨保护素基因重组腺病毒的构建及鉴定
被引量:
1
1
作者
王晓军
王爱民
张忠荣
吴思宇
郭庆山
吴军
贺伟峰
汤守营
张全顺
机构
第三军医大学大坪附属医院野战外科研究所全军战创中心骨创伤科
第三军医大学
西南
医院
烧伤
研究所
解放军第
出处
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
2005年第2期167-170,共4页
文摘
目的构建人骨保护素(hOPG)基因的重组腺病毒载体并检测其转染能力。方法采用基因工程技术,将hOPG基因片段插入到腺病毒载体质粒pAdTrack-CMV上,利用PadEasy系统与骨架质粒在大肠杆菌BJ5183胞内进行同源重组,经293细胞包装、扩增,得到携带hOPG基因的重组腺病毒AdEasy-PAdtrack-CMV-hOPG,将重组腺病毒AdhOPG对大鼠骨髓基质细胞(rMSCs) 进行感染。采用PCR方法对重组腺病毒载体进行鉴定,利用绿色荧光报告基因转染结果,以荧光计数法检测重组腺病毒的滴度。结果酶切鉴定及PCR结果证明hOPG基因重组腺病毒载体成功, 病毒滴度可达2.5×108pfu/ml,具有很强感染能力,结论应用细菌内同源重组法,成功构建了含 hOPG重组腺病毒载体。
关键词
人骨保护素
基因重组腺病毒载体
adEasy系统
大鼠骨髓基质细胞
细菌内同源重组法
基因工程技术
293细胞
PCR方法
载体质粒
基因片段
大肠杆菌
骨架质粒
基因转染
酶切鉴定
病毒滴度
感染能力
G基因
hOP
计数法
检测
荧光
Keywords
Osteoporotegerin
Adenovirus
Homogenous recombination
Gene therapy
分类号
R394 [医药卫生—医学遗传学]
R373 [医药卫生—病原生物学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人骨保护素基因重组腺病毒的构建及鉴定
王晓军
王爱民
张忠荣
吴思宇
郭庆山
吴军
贺伟峰
汤守营
张全顺
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
2005
1
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