Foxp3转染对大鼠CD4^+T淋巴细胞体外增殖能力的影响

目的探讨Foxp3基因转染对大鼠CD4+CD25-T淋巴细胞体外增殖能力的影响。方法以逆转录病毒载体介导Foxp3基因进入大鼠CD4+CD25-T淋巴细胞,以TGF-β诱导Foxp3基因表达。通过观察报告基因的表达水平及流式细胞仪检测评价转染效率,将转染Foxp3基因的大鼠CD4+CD25-T淋巴细胞、CD4+CD25+T淋巴细胞、大鼠脾脏单个核细胞分别与同系大鼠单个核细胞混合培养,液体闪烁法测定各组细胞增殖水平。结果Foxp3组增殖水平(3 354.18±203.73)略高于调节性T细胞组(2 919.25±137.91),但明显低于空白对照组(12 706.06±967.47)。结论经逆转录病毒介导Foxp3基因可在CD4+CD25-T淋巴细胞高表达,并使该细胞获得与CD4+CD25+T淋巴细胞相似的免疫无能及免疫抑制特性。

供体抗原特异性的CD4^+CD25^+Treg对肾移植大鼠体内B细胞功能的影响

目的供体抗原特异性的CD4+CD25+Treg体内应用后对同种异系肾移植大鼠受体B细胞功能的影响。方法以F344大鼠为供体、Lewis大鼠为受体建立大鼠肾移植模型,于术前1天、术后2周分别将供体抗原特异性的CD4+CD25+Treg(1×106)于尾静脉注入受体体内,术后1月抽取大鼠外周血,分离B细胞,检测其在抗IgM抗体刺激下的增殖情况,检测大鼠外周血IgG、IgA水平,以判断应用CD4+CD25+Treg后大鼠体内B细胞功能状态。实验分组:实验组术前、术后2周使用CD4+CD25+Treg(n=8),阳性对照组术前、术后未使用CD4+CD25+Treg(n=8),空白对照组未移植大鼠(n=8)。结果实验证实实验组B细胞增殖水平最低、空白对照组其次,阳性对照组最高,三者均有显著差异(P<0.05),外周血IgG、IgA水平检测证实,实验组与空白对照组无显著差异(P>0.05),二者明显低于阳性对照组(P<0.01)。结论经尾静脉注入CD4+CD25+Treg后肾移植受体体内B细胞的功能可明显受到抑制,CD4+CD25+Treg可通过对B细胞的这一作用调节受体免疫状态,从而达到控制排斥反应,诱导免疫耐受的作用。