内镜下胆道支架置入治疗肝胆外科术后胆漏的临床观察

目的探讨内镜下胆道支架置入对肝胆外科手术后胆漏的治疗效果。方法回顾性分析我院2001年1月～2005年12月收治的11例肝胆外科术后胆漏，提出胆漏新的临床分型：Ⅰ型，胆囊管漏；Ⅱ型，肝外胆管漏（漏口直径小于胆管直径1／3的为A型，大于1／3为B型）；Ⅲ型，肝内胆管漏（肝内胆管盲端漏为A型，引流肝段以下的肝内胆管漏为B型，引流肝段以上的肝内胆管漏为C型）；Ⅳ型，Luschka管漏。结果11例中Ⅰ型6例，ⅡA型2例，ⅢA型1例，ⅢB型2例。4例行单纯支架置入，7例行Oddi括约肌切开联合支架置人。术后3周拔除支架6例，1个月拔除支架2例，2周、6个月和9个月拔除支架各1例。11例经内镜治疗后腹痛缓解，腹腔胆汁引流消失，黄疸消退。1例随访6个月，10例随访1—3年，均未复发腹痛、发热、黄疸、腹腔积液，血胆红素正常。结论内镜下胆道支架置入是治疗肝胆外科术后大多数胆漏的有效手段之一，胆漏新临床分型对治疗方法的选择具有一定的指导意义。

TBL教学模式在肝胆外科临床教学中的应用

基于团队学习的教学模式（Team Based Learning，TBL）是目前最新的医学教育模式，它既注重培养学生主动学习和知识应用的能力，又能克服PBL（Problem Based Learning，PBL）教学模式的一些固有缺点，

PBL模式在肝癌介入外科教学中的应用研究

以问题为中心（Problem-Based Learning,PBL）的讨论式教学作为一种新型教学模式,近年来在世界各大高等院校日益受到重视[1]。PBL是一种以学生为中心,以教师为导向,以小组为单位,围绕实际问题进行讨论的启发式教学形式[2]。我科自2009年以来将PBL教学法应用于肝癌血管介入的教学实践,取得了较好的教学效果，现总结报告如下。

电视腹腔镜录像系统在腹部外科临床教学中的应用

随着腹腔镜外科的发展,多数腹部外科手术均能在腹腔镜下完成。通过先进的腹腔镜录像系统,可获得大量腹内脏器病变的录像资料。充分利用腹腔镜录像资料进行外科临床教学,可为学生提供真实、形象、生动、全面的疾病相关图像信息,不但可提高学生的学习兴趣,还能让学生更容易理解、掌握所学的知识。

腹腔镜外科医师技术培训方法探讨

微创外科是21世纪外科学发展的主要方向之一,腹腔镜外科作为微创外科的代表,其发展是外科技术的一场革命;加强腹腔镜外科医师继续教育与手术技术的培训是减少手术并发症,真正达到外科微创化的关键。对腹腔镜外科医师技术培训方法进行了探讨。

肝炎后肝硬变门脉高压症外科治疗的远期效果观察

对４６例肝炎后肝硬变门脉高压症患者应用脾切除加胃底、贲门周围血管离断术治疗共２６例，采用选择性远端脾腔静脉分流术（ＤＳＣＳ）进行治疗２０例，４０人获随访（失访者作死亡计算），结果断流组的５年、８年生存率分别为７３．５％、６５．４％，ＤＳＣＳ组术后５年、８年生存率分别为７０％、６０％（Ｐ＞０．０５）。在远期疗效的观察中，术后再出血率断流组明显高于ＤＳＣＳ组，且出血早，次数多，出血更严重，而ＤＳＣＳ术后再出血病例明显减少，出血时间推迟，程度减轻。

一线医院战伤分组救治法在平时突发性群体伤急救中的意义

总结一线医院大批战伤伤员分组救治的经验 ,提出在平时突发性群体伤抢救中应用的可行性 ,并对分组救治的意义、各专业组的人员配备与任务进行了阐述。

舒适护理模式实施优质护理在内镜下逆行胰胆管造影术患者中的应用

随着医学模式转变、社会发展，以及新技术的应用，肝胆系统疾病的护理模式也相应的发生着变化。接受内镜下逆行胰胆管造影（ERCP）术和内镜乳头括约肌切开术（EST）治疗的患者，由于ERCP开展时间较短，对该项新技术的治疗手段、手术效果、术后并发症的发生及术后护理的不了解，导致产生对治疗的恐惧，对手术效果、术后并发症发生情况等的担心，影响患者对治疗的配合。

HDGF、VEGF在人肝细胞癌中的表达及其与肿瘤血管生成的关系

目的探讨肝癌衍生生长因子(hepatoma-derived growth factor,HDGF)、血管内皮生长因子(vascular endothe-lial growth factor,VEGF)在人肝细胞癌组织中的表达与肿瘤组织微血管形成过程之间的关系和临床意义。方法对108例人肝细胞肝癌及相应的癌旁肝组织标本进行了HDGF、VEGF和CD34免疫组织化学EnVisionTM法检测,并初步分析结果。结果HDGF、VEGF在肝癌组织中阳性表达率分别为63.2%、69.1%;癌旁组织中阳性率分别为16.7%、20.3%。肝癌组织中HDGF、VEGF的表达呈正相关(P<0.05),且两者共同阳性表达与肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)值之间呈正相关(r=0.728,P<0.01;r=0.608,P<0.05)。结论肝癌组织中异常表达增高的HDGF、VEGF与肝癌微血管形成过程相关,可作为判断肝细胞癌侵袭能力、血管生成、判断患者预后的参考标志。

上腹部手术后行腹腔镜胆囊切除的临床体会

目的探讨有上腹部手术史患者再次行腹腔镜胆囊切除术(LC)的可行性及临床疗效。方法对2000年1月￣2004年7月间施行的有上腹部手术史的48例LC病例(A组)进行回顾分析,并随机选择同期进行的无上腹部手术史的100例LC病例(B组)进行对比。结果A组有2例中转开腹(中转率为4%),B组有1例中转开腹(中转率为1%);平均手术时间:A组(68.6±15.7)min,B组(38.6±5.4)min,P<0.01;平均住院天数:A组(5.12±0.61)d,B组(4.96±0.48)d,P>0.05。两组病例均无手术并发症。结论对有上腹部手术史的胆囊病变,LC是安全、有效的,仍可作为首选的治疗方法。

BC047440-siRNA对肝癌HepG2细胞增殖抑制及其分子机制的初步探讨

目的利用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制肝癌相关基因BC047440的表达,观察其受抑制后对细胞增殖能力的影响并初步分析其抑制增殖的分子机制。方法设计针对BC047440基因的siRNA,构建pGenSil-1-BC047440-siRNA真核表达载体。分别用脂质体法将介导siRNA的真核绿色荧光表达载体pGenSil-1-BC047440-siRNA、空载体质粒pGenSil-1转染人肝癌HepG2细胞建立稳定细胞株;随后实验分为3组:转染siRNA表达载体组(PP2)、转染空质粒组(PP1)和未处理的亲本HepG2细胞组(PP0)。采用荧光定量PCR检测BC047440mRNA表达变化;CCK-8分析细胞增殖活性;平板克隆形成实验检测单个细胞的增殖能力;最后选取NF-κB下游增殖相关基因c-myc、bcl-2、cyclin D1,用荧光定量PCR检测其mRNA水平的变化。结果成功转染并获得PP1、PP2组抗性克隆,PP2组与PP0组比较,BC047440mRNA水平明显降低,抑制率约为75%;细胞增殖实验中PP2组细胞增殖能力明显降低,平板克隆形成实验结果显示PP2组克隆形成率为(8.42±0.82)%,明显低于PP1组[(39.31±5.39)%]和PP0组[(40.96±3.21)%](P<0.01)。检测NF-κB下游增殖相关的几个基因时发现PP2组c-myc mRNA表达明显降低,约为PP0组的12/25;其余基因无明显变化。结论干扰BC047440基因表达可以抑制肝癌细胞的增殖,初步揭示BC047440基因可以对c-myc起正向调控作用,从而促进肝癌细胞的增殖,提示抑制BC047440基因可能成为控制人肝癌细胞生长的有效靶点。

肝癌相关cDNA片段的快速克隆和表达

目的:克隆原发性肝癌相关新基因. 方法:利用抑制消减杂交法(suppression subtractive hybridi- zation,SSH)已经发现了1条新的肝癌相关基因片断表达序列标签(EST),长447 bp,经Genebank检索,90%无同源性.在其保守序列区设计了2条用于3’Race扩增的寡聚核苷酸引物(3’GSP2:5’-CGCATAGTACCAGTATCGAC AAAGG-3’,3’NGSP2:5’-TCCACATTACGGACC CGACGGATT-3’),利用cDNA末端快速扩增法(RACE) 进一步克隆该基因的全长cDNA序列.人原发性肝癌细胞株HepG2,体外传代培养,培养基为RPMI1640培养基.提取HepG2总RNA,方法参照SV Total RNA Isolation System 的说明进行.RACE法扩增采用Clontech公司的Smart TM Race cDNA Amplification Kit.将3’RACE-PCR扩增的目的片段以Race自带的产物纯化试剂盒进行纯化、回收,然后将其克隆到PMD 18-T Vector中,提纯质粒后进行酶切鉴定,确认质粒内有插入片段,由宝生物工程(大连)有限公司协助完成测序.将克隆所得cDNA片段用NCBI 提供的BLASTN与GeneBank的dbEST、nr数据库进行同源性比较,确认代表新基因的EST并且登录GeneBank (http://www.ncbi.nlm.nih.Gov/submission).3例病理标本取自西南医院肝胆科,病理证实均为原发性肝细胞肝癌, 分别提取肝癌及远端正常肝组织总RNA.将酶切回收的克隆插入片段分别进行同位素标记获得cDNA探针,利用Clontech公司的ExpressHybTM杂交液通过RNA印记法检测克隆片段在肝癌及正常肝组织中的表达,方法参照ExpressHybTM Hybridization Solution user manual说明进行. 同时,利用互联网的基因表达分析序列数据库(http://www. ncbi.nlm.nih.gov/SAGE)(series analysis of gene expression, SAGE)对基因的表达及其表达水平进行分析,从而确定其组织的分布. 结果:得到5条3’EST(694 447-3,724 447-3,697 447-3,711 447-3,692 447-3;大小500-550 bp),5 条3’EST均已登录GeneBank(登录号:CK730344, CK730345,CK730346,CK730347,CK730348).对其中2条带有poly-A尾的3’EST(694 447-3,724 447-3),进行序列分析后,发现他们是代表新基因或不同剪接体的EST,且具有共同的保守序列.RNA印记分析显示694 447- 3,724 447-3在3例肝癌组织中的表达强度明显高于对应的正常肝组织.通过SAGE文库分析基因的表达谱,发现694447-3和724 447-3在神经系统肿瘤、结肠癌、胃癌、乳腺癌肿瘤文库的表达高于对应的正常组织文库. 结论:克隆所得的2条带有poly-A尾的3’EST可能是新的肝癌多基因家族成员.利用RACE技术可以快速、高效的克隆疾病相关基因.

PBL与LBL相结合的教学法在本科临床护理教学中的应用

临床护理带教是对学生学习能力的全面培养，是学生由学校走向社会的重要过渡阶段。传统的教学方法主要是基于课堂的学习（lecture based learning，LBL）教学法，LBL教学因其能够系统、

经皮射频消融术与腹腔镜肝癌切除术治疗小肝癌的临床疗效观察

目的对比经皮射频消融术与腹腔镜肝切除术治疗小肝癌的临床疗效。方法选择2011年1月至2015年12月在我院诊治的126例小肝癌患者,根据治疗方法的不同分为两组,采用腹腔镜肝癌切除术者61例(腹腔镜肝癌切除术组),采用经皮射频消融术者65例(经皮射频消融术组),观察两组预后情况。结果所有患者顺利完成手术,腹腔镜肝癌切除术组无中转开腹情况。经皮射频消融术组完全消融,术后1个月的疼痛、肺部感染、出血、恶心呕吐等并发症发生率(8.3%)低于腹腔镜肝癌切除术组(26.7%)(P<0.05)。两组术后1个月的血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)与门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平低于术前(P<0.05),同时经皮射频消融术组术后1个月的的血清ALT与AST明显低于腹腔镜肝癌切除术组(P<0.05)。经皮射频消融术组的生存时间与无瘤生存时间分别为(34.21±2.98)月和(27.20±3.11)月均高于腹腔镜肝癌切除术组(28.44±4.19)月和(22.98±3.78)月(P<0.05)。结论相对于腹腔镜肝切除术,经皮射频消融术在小肝癌治疗中的应用成功率高,有利于促进肝功能的恢复,减少术后并发症的发生,从而延长肝细胞癌患者的生存时间。

BC047440基因在肝细胞癌中的表达及其意义

目的探讨肝癌相关的新基因BC 0 4 7 4 4 0在肝细胞癌(HCC)中的表达及其病理学意义。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测3 6例HCC及其相应的癌旁肝组织中BC 0 4 7 4 4 0 mRNA的表达,并将该基因在HCC中的表达分为过高表达组及较高表达组,分析其与肿瘤病理变化的关系。结果3 6例HCC中BC 0 4 7 4 4 0基因mRNA的表达较癌旁肝组织高,其平均光密度比值分别为0.2 5 9 4±0.0 9 2 8和0.0 9 4 2±0.0 4 4 3,差异有极显著性意义(P<0.0 1);过高表达组与较高表达组相比较,前者肝癌直径较大,门静脉受侵较严重,差异有显著性(P<0.0 5)。结论BC 0 4 7 4 4 0基因与HCC的发生、发展和侵袭转移有关。