慢性肾功能衰竭血清对兔主动脉内皮细胞增殖、凋亡及核因子κB信号通路活化的作用

目的 探讨慢性肾功能衰竭（CRF）血清对兔主动脉内皮细胞（AEC）增殖、凋亡和核因子κB信号通路活化及其下游炎症因子表达的影响.方法 建立CRF兔模型,采集其血清 不同浓度的CRF血清刺激原代培养的兔AEC后,四甲基偶氮噻唑盐检测细胞增殖,Hoechst33342染色观察细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期 反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western印迹法分别检测核因子κB、IκB mRNA及蛋白和肿瘤坏死因子（TNF）α蛋白表达 免疫荧光观察核因子κB P65核转位、电泳迁移率变异试验（EMSA）检测核因子κB DNA结合活性 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞培养液中TNF-α和白细胞介素（IL）6浓度.结果 （1）在较低浓度（≤10%）时,CRF血清对AEC的增殖有明显的促进作用,但血清浓度继续增加后,对AEC的增殖作用却明显减弱,促凋亡作用却增强,与对照组相比,差异均有统计学意义（均P＜0.01）.（2）10%CRF血清刺激后,与对照组相比,核因子κB mRNA（0.35：±0.05比0.26±0.02）及蛋白（1.67±0.15比0.41±0.05）表达均高 IκB mRNA（0.13±0.03比0.24±0.04）和蛋白（0.29±0.06比0.65±0.08）表达均低 核因子κB P65发生核转位 核因子κB DNA结合活性高（均P＜0.01）.与对照组相比,10%CRF血清刺激后AEC分泌TNF-α和IL-6高,细胞中TNF-α蛋白表达高（0.37±0.04比0.14±0.03）（均P＜0.01）.结论 CRF血清可导致AEC活化,低浓度导致AEC增殖,高浓度导致细胞凋亡 促增殖作用可能与其活化了核因子κB信号通路有关.这为进一步采取措施,防治CRF加速性动脉粥样硬化提供了一定的理论和实验依据.