骨髓切片组织病理检查在血液病诊断中的临床应用

目的研究骨髓切片组织病理检查对血液病的诊断价值。方法采用骨髓活组织病理学、骨髓涂片细胞形态学检测方法。结果300例血液病患者中骨髓细胞形态学检查与骨髓活检结果完全吻合者215例(占71.67%),骨髓形态学不能肯定诊断而经骨髓活检结果确诊的病例30例(占10%),骨髓细胞形态学检查与骨髓活检结果不相吻合的有55例(占18.33%)。结论骨髓活检病理诊断是对骨髓形态学检查的补充和修正,二者合用能提高血液病诊断的正确率。在MDS、AA、MF的诊断上,骨髓活检病理检查具有决定性的意义,对转移性肿瘤和急性髓细胞白血病是否合并骨髓纤维化的诊断也具有特殊价值。

外周血干细胞移植治疗血液肿瘤283例临床观察

目的观察外周血干细胞移植（PBSCT）治疗血液肿瘤临床疗效。方法自2001年3月～2007年4月，对283例血液肿瘤患者施行外周血干细胞移植，其中自体移植231例，异基因移植52例，观察其临床疗效和并发症。结果除1例ALL外，230例患者行自体外周血干细胞移植后造血功能均快速重建。异基因移植中急性移植物抗宿主病发生率23.1%，慢性移植物抗宿主病发生率21.2%，其中局限型占15.4%；9例患者于移植后1～16个月分别死于移植物抗宿主病、感染和疾病复发或进展，35例患者已无病存活3～46个月。结论外周血干细胞移植是治疗血液肿瘤的有效方法，依据患者疾病诊断、年龄、身体状况、供者情况选择移植方式。

端粒/端粒酶在恶性血液病中的研究进展

端粒是真核细胞染色体末端特有的一段DNA序列和几种特异性蛋白质构成的复合物。端粒酶是一种核糖核酶,能以自身RNA为模板,合成端粒DNA,从而维持端粒的长度。端粒/端粒酶的表达调控对肿瘤的发生发展及细胞的衰老、永生化起着重要的作用,深入研究端粒/端粒酶的结构功能及其在恶性血液病细胞和正常造血细胞中的表达和调控,将有助于达到控制和治疗恶性血液病的目的。

高原医学专业血液系统临床教学的探索和实践

高原医学专业血液系统的临床教学,是高原医学临床教学的重要内容,如何实现血液系统教学与高原特殊的地域环境和疾病特点的有效结合,是顺利实施教学的关键因素。在高原医学专业血液系统临床教学的实践中,充分利用高原地区血液系统疾病的地域聚集性和病种特殊性以及高原地区的卫生条件等因素,对血液系统临床教学的教学内容、教学方法和教学模式进行了探索。

急性混合细胞白血病诊断及疗效的临床研究

目的探索急性混合细胞白血病(acute mixed lineage leukemia,AMLL)的临床和实验室特征以及疗效和预后。方法根据骨髓细胞形态学、化学染色和免疫表型结果诊断AMLL,评价疗效及影响疗效的有关因素。结果AMLL可有发热、贫血、淋巴结肿大、肝脾肿大等临床表现。半数患者属高白细胞白血病。所有患者骨髓增生明显活跃,原始+幼稚细胞占0.86(0.79～0.96)。8例患者免疫表型均为B-Ly/My+。兼顾粒、淋二系的方案诱导化疗的7例AMLL中,6例首次完全缓解(CR1),1例发生诱导化疗有关死亡,完全缓解后坚持巩固强化治疗的3例患者,已平均无病生存7(5～9)个月。结论AMLL属特殊类型的白血病,其诊断有赖于对细胞形态学、化学染色和免疫分型的综合判断。对AMLL的治疗应予兼顾粒、淋二系的诱导和巩固化疗方案,缓解率较高,但长期疗效的评价还有待进一步观察。

急性髓细胞白血病患者DC-CIK治疗后T细胞亚群动态变化的临床观察

目的观察急性髓细胞白血病患者经自体外周血移植联合自身白血病细胞冻融抗原负载的DC-CIK输注治疗后体内的T细胞亚群动态变化。方法选择50名初发急性髓细胞白血病患者,抽取其未缓解的骨髓制备自身白血病细胞冻融抗原,在自体外周血干细胞采集时分离部分单个核细胞培养DC-CIK,以自身白血病冻融抗原共培养激活扩增DC-CIK。患者自体外周血造血干细胞移植30～60 d输注自身白血病细胞冻融抗原负载的DC-CIK,每例每疗程回输细胞总数>7×109,同时给予IL-2(20 WU皮下注射,1次/d,连续10 d)皮下注射。动态观察患者接受DC-CIK细胞输注治疗后不同时间点体内T细胞亚群动态变化,并与既往接受自体外周血移植但未输注DC-CIK细胞治疗的52名急性髓细胞白血病患者进行比较分析。结果 50名患者DC-CIK输注后患者体内CD8+、CD16+、CD56+淋巴细胞均显著高于输注治疗前水平(P<0.01),治疗组同一随访时间段CD3+、CD4+、CD8+、CD16+、CD56+淋巴细胞均显著高于未采用DC-CIK治疗组(P<0.01)。结论对急性髓细胞白血病患者采用自体外周血移植联合自身白血病细胞冻融抗原负载的DC-CIK输注治疗,能显著提高患者肿瘤杀伤性T细胞水平,有助于清除移植后微小残留病,改善患者无病生存率(PFS)。

多发性骨髓瘤患者APE1蛋白表达的临床意义

目的 检测多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)患者脱嘌呤 脱嘧啶核酸内切酶(apurinic apyrimidinicendonu clease,APE1)基因表达,探讨其临床意义。方法 采用免疫细胞化学、Westernblot分析在MM细胞系KM3、32例MM患者 和10例正常自愿者骨髓标本中检测APE1蛋白表达及定位,并且通过图像分析系统计算其积分光密度值。结果 在阳性 对照的MM细胞系KM3中胞核、胞核 胞浆、胞浆均有APE1表达,其中尤以胞核明显。APE1胞浆阳性分度在正常对照组、 初治组、复发或难治组间依次增高(P<0.01,0.05)。结论 APE1蛋白表达强度与MM疗效有关,APE1基因表达增强可能 是MM患者预后不良的指标之一。

自体造血干细胞移植治疗结外NK/T细胞淋巴瘤鼻型9例临床分析

目的观察放/化疗加APBSCT治疗NK/T细胞淋巴瘤鼻型的疗效。方法用CHOP＋Lasp方案1个疗程、CHOP（或MOED、COED）＋HD-MTX方案化疗2～3个疗程，行干细胞动员、采集，CEAC方案预处理及APBSCT及移植后局部病灶的放疗；病程中共行3次鞘内注射化疗药，6～8次联合化疗。结果Ⅰ～Ⅱ期患者移植后1年生存率55.6%（5/9例），2年生存率为44.4%（4/9例）；Ⅲ～Ⅳ期患者移植后3个月～1年内由CR到病情复发，死亡4例，2年生存率为0。结论NK/T细胞淋巴瘤鼻型分期晚的治疗效果差，大剂量化/放疗＋APBSCT治疗NK/TCL可能是有效的措施之一。

人脐血基质细胞自发分泌多种造血生长因子的实验研究

目的 探讨体外培养的人脐血基质细胞分泌血小板生成素(thrombopoietin ,TPO)、粒 巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte macrophagecolonystimulatingfactor,GM CSF)、干细胞生长因子(stemcellfactor ,SCF)的能力。方法 留取不同培养时相点的培养液上清,ELISA法检测上清中TPO、GM CSF、SCF的浓度,并与骨髓基质细胞的培养上清液对照比较其特点。结果 人脐血基质细胞和骨髓基质细胞均可分泌TPO、GM CSF和SCF等造血生长因子,二者造血生长因子的分泌随着培养时间的延长而逐渐下降,其中人脐血基质细胞分泌TPO和SCF的高峰期出现在第7天,而GM CSF的分泌则无高峰期的出现;通过与骨髓基质细胞分泌三种造血生长因子量进行对比发现,人脐血基质细胞SCF和GM CSF的分泌量低于骨髓基质细胞,而TPO的分泌高于同期培养的骨髓基质细胞。结论 人脐血基质细胞与骨髓基质细胞一样具有分泌造血生长因子,支持调控造血的作用。

通过“教学评价”促进临床教学工作的体会

高等院校的教学评价工作是通过全面系统地收集院校的教学信息,在学校自评基础上,按照有关评价方案而开展的,它通过逐项考察核实,达到对教育活动的实施以及目标的分析和判断。通过教学评价工作,可从多方面促进教学工作的开展和深入,既能加大高校及主管部门对学校本科教学工作的投入,又可促进包括学科专业建设、课程建设、

血浆置换治疗血栓性血小板减少性紫癜的临床研究

目的研究血浆置换(PE)治疗血栓性血小板减少性紫癜(TTP)的疗效。方法对12例患者进行血浆置换治疗,并结合免疫抑制剂及抗血小板、改善微循环治疗。结果治疗总有效率为91.7%(11/12),1例患者死亡。结论血浆置换治疗结合免疫抑制剂及抗血小板、改善微循环治疗是TTP的有效治疗方法。

NHE-1特异性抑制剂DMA逆转HL-60/ADM细胞多药耐药的实验研究

目的探讨钠/氢交换器-1(Na+/H+exchanger-1,NHE-1)特异性抑制剂二甲基氨氯吡咪(dimethyl amilo-ride,DMA)是否能在体外逆转耐药细胞株HL-60/ADM的多药耐药及其可能机制。方法以阿霉素诱导产生多药耐药(multidrug resistance,MDR)的HL-60/ADM细胞株为研究对象,用MTT法检测化疗药物敏感性,流式细胞仪检测细胞内柔红霉素积累量,RT-PCR法检测mrp、bcl-2、bax mRNA表达,免疫细胞化学法检测细胞膜多药耐药相关蛋白(MRP)表达,TUNEL法检测原位细胞凋亡。结果与50μmol/L DMA共同培养24h后,HL-60/ADM细胞对ADM、MIT、VCR、HAR4种化疗药物的IC50值分别由(839.5±45.2)、(321.2±28.9)、(70.5±15.5)、(65.2±20.7)ng/ml降低至(180.5±38.9)、(76.4±12.0)、(30.2±7.5)、(31.7±7.2)ng/ml;分别与50、100μmol/LDMA共培养24h后,HL-60/ADM细胞内DNR积累量荧光强度由作用前的33.56升高到48.74和70.10,细胞内mrp mRNA表达量、MRP蛋白表达量及bcl-2mRNA表达量明显降低,bax mRNA表达量明显升高;与100μmol/L DMA共同培养24h后,5μg/ml ADM作用下的HL-60/ADM细胞凋亡率明显增高。结论DMA可逆转HL-60/ADM细胞的MDR,其机制可能与下调MRP表达及促进bcl-2/bax凋亡途径有关。

CAOLD方案治疗难治复发性血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤的临床观察

目的观察CAOLD方案治疗难治复发性血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(AILT)的疗效。方法对18例难治复发性AILT患者应用CAOLD方案化疗,化疗大于或等于2个周期,评定疗效。结果 18例患者总有效率为77.7%,完全缓解(CR)率为44.4%(8/18),部分缓解(PR)率为33.3%(6/18),未缓解率为22.3%(4/18)。结论 CAOLD方案治疗难治复发性AILT有较好的疗效,值得临床进一步推广。

人脐血源基质细胞移植促进裸鼠造血损伤修复的实验研究

目的观察人脐血源基质细胞(hUCBSCs)移植对裸鼠造血损伤的修复效果。方法6.5Gy辐照裸鼠后,分别从尾静脉输入1×105个人脐血源基质细胞及生理盐水,分别于移植+1、+3、+5、+7、+10、+14、+21d观察裸鼠血象、骨髓象以及不同时相点CFU-F、CFU-GM、BFU-E、CFU-Meg动态变化。结果HUCBSCs移植组裸鼠在血象、骨髓象恢复时间、不同时相点骨髓CFU-F、CFU-GM、BFU-E、CFU-Meg等方面与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论HUCBSCs移植具有促进裸鼠造血损伤修复的作用。

外周血造血干细胞动员采集264例临床分析

目的探讨外周血造血干细胞动员采集的方法及其效果。方法对恶性血液病患者及健康供者经单一生长因子和化疗联合生长因子方案动员后,使用CS3000 Plus3000血细胞分离机(Baxter公司)进行外周血造血干细胞采集,对不同动员方案、疾病、年龄、性别及供者的动员采集效果进行分析。结果所有患者均成功动员采集。健康供者较恶性血液病患者动员效果佳;在恶性血液病中,非霍奇金淋巴瘤动员效果最好,多发性骨髓瘤最差。恶性血液病患者中,采集所获得的单个核细胞数中,非霍奇金淋巴瘤最好,多发性骨髓瘤最差,在采集所获得的CD34+细胞数中,急性淋巴细胞白血病最好,多发性骨髓瘤最差;化疗联合G-CSF和IL-11为最好的动员方案;成人采集效果最好,老年患者最差;男性较女性好。健康供者男女采集效果无差别;健康供者较恶性血液病患者采集效果好。无论是健康供者还是恶性血液病患者,动员采集过程中不良反应较小。结论根据不同的疾病、性别、年龄,采用不同的动员采集方案,一般可以成功采集。

白血病骨髓基质细胞促进Jurkat细胞抗药物诱导凋亡研究

目的探索骨髓基质细胞增强白血病细胞抗凋亡、抗药特性的可能机制。方法体外分离培养骨髓基质细胞模拟骨髓微环境功能,与白血病细胞Jurkat体外共培养。0.5μmol/L DNR处理Jurkat细胞诱导凋亡,应用AnnexinV/PI双标法流式细胞仪检测白血病细胞凋亡率。PI染色流式细胞仪检测细胞周期分布。结果0.1～2.0μmol/L浓度范围DNR作用一定时间后,Jurkat细胞发生的凋亡率随药物浓度的增加与作用时间的延长而升高。共培养后骨髓基质细胞抑制药物诱导的白血病细胞凋亡,白血病细胞凋亡率明显低于单独悬浮培养组(P<0.05)。白血病骨髓基质对白血病细胞的屏蔽效应强于正常骨髓基质细胞[白血病细胞凋亡率分别是(5.73±1.78)%,(8.39±4.08)%,(P<0.05)]。DNR处理共培养组Jurkat细胞G0/G1期阻滞,而正常与白血病骨髓基质细胞屏蔽的白血病细胞G0/G1期阻滞现象无显著性差异(P>0.05)。结论一定浓度的DNR在体外可诱导Jurkat细胞凋亡。骨髓基质细胞抑制化疗药物诱导的白血病细胞凋亡,这种保护作用可能部分通过阻滞白血病细胞于G0/G1期实现。白血病骨髓基质细胞对白血病细胞的屏蔽效应可能存在较细胞周期阻滞更复杂的机制。

造血干细胞移植后早期感染的预防及护理

目的探讨造血干细胞移植后早期感染的预防及护理对策。方法对2009年1月-2009年12月在我科接受外周血造血干细胞移植治疗的113例患者临床资料和对早期感染的预防及护理措施进行回顾性分析。结果 113例患者移植后早期感染发生率为92.1%（104/113）,严重感染发生率10.6%（12/113）,死亡5例（4.4%）;首次感染发生的时间为移植后1-10 d,中位时间为第5 d,高峰时间为移植后2-7 d,此时中性粒细胞绝对计数多〈0.5×10^9/L,感染持续时间为2-12 d,感染部位常见的有口咽部、肠道、肛周、会阴等,死亡原因为颅内出血、急性心功能不全和肝静脉阻塞病。结论造血干细胞移植后粒细胞缺乏期是早期感染的高发期,口咽部、消化道、肛周、会阴部等的清洁、抗菌是积极预防和治疗感染的关键,实施有效、可行的预防及护理措施的同时,加强患者的预防和治疗依从性也非常重要。

格列卫治疗慢粒白血病发生严重体液潴留1例报道及文献复习

目的探讨应用伊马替尼(格列卫)治疗慢性粒细胞白血病发生严重水潴留的处理及其可能的发生机制。方法报道1例在应用格列卫治疗慢性粒细胞白血病加速期患者的过程中,发生严重全身水肿、胸腹腔积液的处理过程及经验,结合文献对其发生的可能机制进行综述。结果在用格列卫治疗慢粒的各阶段均有少数患者可能发生严重的水肿和体液潴留的不良反应,但在急变期和高龄患者较多见,若不及时处理有可能危及生命,需高度重视。格列卫引起严重水肿的机制目前认为与其抑制PDGF受体的活性相关。结论在应用格列卫治疗慢粒时应警惕该类不良反应的发生,一旦出现需及时对症处理并严密观察,必要时停药,待症状消失后再开始用药是安全的。

法尼酯X受体对脂肪酸合酶表达的影响

目的探讨法尼酯X受体(farnesoid X receptor,FXR)对脂肪酸合酶(fatty acid synthetase,FAS)表达的影响。方法用FXR激动剂CDCA作用人肝癌细胞株(HepG2),应用RT-PCR和Western blotting分别从mRNA水平和蛋白质水平检测FAS的表达情况。结果用不同浓度的CDCA(25、50、75μmol/L)分别作用于HepG2细胞,6、12、24、48h后,FASmRNA和蛋白质水平呈时间和剂量依赖性下调。结论FXR激动剂可抑制脂肪酸合酶的表达。