蛋白芯片用于筛选急性髓系白血病患者血清标志物的初步研究

目的利用生物素标记蛋白芯片筛选急性髓系白血病(AML)患者血清中可用于AML早期诊断、预后判断的血清标志物。方法采用生物素标记抗体芯片技术,对11名不同细胞遗传学和分子生物学特征的AML患者[分为预后良好组(5名),预后不良组(6名)]和5名健康体检者(对照组)的血清检测,采用芯片分析软件提取数据,获得的数据采用AAH-BLG-1数据分析软件作统计分析。结果 2个AML组与正常对照组相比,生长因子MFG-E8、osteoactivin、Hepassocin、M-CSF、M-CSF R、Insulin R,白细胞介素家族的IL-20、IL-3、IL-1 F8、IL-2 R alpha、IL-2 R beta、IL-1 R6凋亡因子(Fas)、粘附因子(ICAM-3)、趋化因子(CCL21)、载脂蛋白(Lipocalin-1)、跨膜蛋白(TMEFF1)、基质金属蛋白酶(MMP-3)和肿瘤坏死因子受体超家族的GFR alpha-4、TNF-alpha、TNFRF18、TNFRSF21等22个标志因子水平明显上调(P<0.05);预后不良组与预后良好组相比,IL-17RD、VEGF-D、IGFBP1、基质金属蛋白酶抑制剂TIMP-2、血管生成抑制剂Endostatin、蛋白水解酶uPA、趋化因子MIP-2、FGF-19、结合蛋白LBP、粘附分子L-selectin、载脂蛋白SAA等11个标志因子水平明显上调(P<0.05)。结论生物素蛋白质芯片共检测出33个AML血清标志物,证实这些标志物参与了AML细胞趋化、黏附、迁移、降解基质、恶性增殖、抗凋亡等过程。蛋白芯片有助于早期正确判断AML患者的预后,指导不同强度的个体化治疗。

HLA不全相合造血干细胞联合脐血移植治疗急性白血病的临床观察

目的观察HLA不全相合造血干细胞联合脐血移植治疗急性白血病的有效性及安全性。方法 2008年6月～2010年12月本科20名急性白血病患者接受HLA不全相合造血干细胞联合脐血移植,和同期进行的HLA不全相合造血干细胞移植的51名急性白血病患者,进行造血重建、植入,移植相关并发症和疗效方面的比较。结果联合移植组平均输入脐血有核细胞数2.96×107/kg,CD34+细胞2.99×105/kg;1名患者未植入,ANC≥0.5×109/L的平均时间为12.6±2.50 d,Plt≥20×109/L的平均时间为17.2±3.70 d和对照组均无显著差异(P>0.05);植入检查均为完全供者型;联合移植组Ⅲ～Ⅳ度的严重aGVHD的发生率为5.0%显著低于对照组的11.7%(P<0.05);1年OS联合移植组为80%优于对照组的72.5%(P<0.05);两组间cGVHD发生率、复发率和感染并发症的比较无统计学意义(P>0.05)。结论 HLA不全相合造血干细胞联合脐血移植降低严重aGVHD的发生率,提高长期生存率,是对HLA不全相合造血干细胞移植方法的改良,临床应用安全有效。

白血病成骨细胞屏蔽共培养AML细胞化疗杀伤作用的研究

目的探讨白血病成骨细胞对急性髓性白血病(AML)细胞屏蔽化疗杀伤的作用,及其与促血小板生成素/血小板生成素受体(TPO/c-MPL)信号通路的关系。方法分离培养白血病骨髓间充质干细胞并行成骨诱导,ELISA法检测成骨细胞分泌血小板生成素(TPO)水平,流式细胞仪检测人红白血病细胞株(HEL)c-MPL表达。成骨细胞与HEL细胞共培养,观察在化疗药物柔红霉素干预下HEL细胞存活率。结果白血病骨髓成骨细胞培养d7、d14 TPO表达分别为(176.84±15.32)ng/mL和(198.24±13.49)ng/mL,明显高于正常对照的TPO水平,分别为d7(140.13±20.12)和d14(157.66±18.82)ng/mL。应用柔红霉素干预后,AML成骨细胞与HEL细胞共培养组半抑制浓度(IC50)为(3.320±0.218)μg/mL,高于HEL+正常来源成骨细胞组(2.236±0.167)μg/mL和HEL+hFOB1.19组(2.254±0.111)μg/mL。生长曲线研究发现,在不同浓度DNR干预下,AML成骨细胞与HEL细胞共培养组中HEL细胞的细胞存活率最大,均高于其他HEL共培养组。结论白血病成骨细胞能有效屏蔽化疗药物对白血病细胞的杀伤作用,这种作用可能与白血病骨髓微环境内TPO/c-MPL信号通路相关。

白细胞介素-2对allo-HSCT后白血病早期复发患者治疗效果的临床研究

目的观察白细胞介素-2(IL-2)对异基因造血干细胞移植术(allo-HSCT)后白血病早期复发患者的治疗效果。方法 2010年6月～2011年6月,本科共对14例allo-HSCT后复发的患者给予IL-2治疗,观察其临床疗效及并发症。结果 13名患者随访13～24月(中位时间18月),未出现本病全面复发,无病生存率为92.85%。GVHD的表现均为Ⅰ度,发生率为35.7%。结论 IL-2是治疗allo-HSCT后早期复发的有效且重要的方法,取得了较好的疗效,且治疗后GVHD的发生率低、表现较轻。

HLA不全相合外周血造血干细胞回输的临床观察与护理

异基因造血干细胞移植（HSCT）是目前治疗恶性血液病最有效的方法。外周血干细胞输注是将采集的供者外周血单个核细胞（富含干细胞）经受着的静脉通道直接输给受者,通过干细胞的游走、归巢等运动,进入受者的造血微环境,进而定居、分化和成长发育[1]。而在AHSCT过程中造血干细胞回输是确保AHSCT成功的关键[2～4],

造血干细胞移植中的输血相关问题

在造血干细胞移植预处理后到造血重建这一段时间内,由于移植患者的骨髓重度抑制,引起全血细胞极度低下,因而可导致贫血、出血和严重感染,输血液制品便成为此时间段帮助患者度过造血抑制期的重要支持治疗措施。

获得性凝血因子Ⅷ抑制物1例并文献复习

获得性凝血因子Ⅷ抑制物,又叫做获得性血友病A（acquired haemophilia A,AH-A）,极其罕见,该病多发生于非血友病健康人群,目前发病机制不明,主要见于自身免疫性疾病、恶性肿瘤、药物变态反应等。获得性凝血因子Ⅷ抑制物导致患者止血、凝血及纤维蛋白溶解等机制的缺陷或异常而引起患者自发性出血或轻微损伤后出血不止，治疗需针对病因并补充足够的凝血因子W。日前本科收治1例患者，并取得较好疗效，本文结合文献，进一步探讨其诊断、鉴别诊断及治疗方案。

造血干细胞移植患者全程营养筛查的临床研究

目的调查造血干细胞移植患者的营养风险发生情况,为临床进行营养支持提供依据。方法采用营养风险评价工具NRS2002对71例造血干细胞移植患者进行全程营养筛查。结果在不同阶段存在营养风险的患者,发生的移植相关风险不同,其中:移植+7～+21 d有营养风险患者感染的几率较高,分别为91.0%～93.6%,50%～75%;移植0～+7 d消化道反应较重分别为67.1%～92.5%,50.0%～83.3%。而全程有营养风险者,造血重建时间延长。结论对造血干细胞移植患者进行全程营养筛查,及时而有效的进行营养干预,特别是早期干预,会促进造血重建和免疫功能,增强疗效,减少治疗风险。

人脐血源基质细胞与骨髓基质细胞对造血功能损伤修复作用的比较研究

目的比较人脐血源基质细胞(hUCBDSCs)与骨髓基质细胞(hBMSCs)对造血功能损伤的修复作用。方法取63只BALB/c小鼠均给予6.0 Gy60Co射线全身照射,随机分为hUCBDSCs组(n=21)、hBMSCs组(n=21)和对照组(生理盐水组)(n=21),分别于移植后1、3、5、7、10、14、21 d检测1次外周血细胞,于照射后7和21 d分别制备股骨骨髓涂片观察骨髓细胞形态学改变,收集小鼠骨髓细胞并作集落培养。结果 3组小鼠移植后白细胞、血小板、红细胞在3～5 d降至最低,hUCBDSCs组白细胞和血小板均从7 d开始回升,10 d后回升速度与程度提高,21 d时回升接近未照射水平,hBMSCs组从7 d开始回升,回升趋势与hUCBDSCs组相似,21 d后回升程度低于未照射水平,对照组从7 d后开始回升,回升较慢,21 d回升程度低于实验组(P<0.05);hUCBDSCs组,hBMSCs组及对照组红细胞均在3 d时降至最低,21 d后恢复,但实验组较对照组回升更快,(P<0.05),hUCBDSCs组与hBM-SCs无甚差异(P>0.05)。集落培养CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-GMEM,hUCBDSCs组21 d为(113±6)、(167±6)、(131±6)、(14±4)个,hBMSCs组(46±6)、(141±11)、(118±18)、(10±1)个,对照组为(87±3)、(122±4)、(84±7)、(5±1)个(P<0.05)。hUCBDSCs组所有小鼠均存活。结论 hUCBDSCs较hBMSCs修复造血功能损伤和血小板恢复的作用更佳,hUCBDSCs移植是1种安全有效的促进造血损伤修复的方法。