缺氧性肺动脉高压大鼠肺血管病变及其机制的实验研究

模拟海拔 5km高原连续缺氧 ,制备缺氧性肺动脉高压 (HPH)大鼠动物模型 ,应用光镜、电镜、组织化学等方法 ,研究缺氧后 10、2 0、30天和对照组大鼠肺血管病理变化及其机制。发现缺氧后各时相各级肺小动脉管壁增厚、管腔狭窄 ,尤以 2 0天为著。主要表现为中膜平滑肌细胞 (SMC)增生 ,内弹力膜增厚 ,外膜胶原纤维增多。肺腺泡内无肌型和部分肌型动脉SMC增生、肌化 ,使肌型动脉数量增加 ;缺氧各组肌型动脉数量与对照组比较差异非常显著 (P <0 0 1)。缺氧后肺毛细血管基底膜不规则增厚 ;内皮细胞肿胀、胞质电子密度降低 ,饮泡增多 ,有的胞质形成乳头突向腔面 ;多数毛细血管充血、瘀血 ,中性粒细胞嵌塞 ,血小板聚集。表明缺氧可引起肺血管结构重塑 ,肺血流阻力增加 ,导致HPH。肺毛细血管超微结构病变所致的肺微循环障碍也是HPH发生。

急性肺损伤环氧合酶-2表达的研究

目的：探讨急性肺损伤（ＡＬＩ）肺组织环氧合酶 ２（ＣＯＸ ２）ｍ ＲＮＡ 表达和ＡＬＩ中前列腺素（ＰＧｓ）变化的关系，以及ＣＯＸ ２ 在ＡＬＩ发病中的可能作用。方法：在脂多糖（ＬＰＳ）诱发的ＡＬＩ模型，采用逆转录聚合酶链反应，检测肺组织ＣＯＸ ２ ｍ ＲＮＡ表达情况，并观察了ＰＧｓ的变化。结果：生理盐水对照组的大鼠肺组织有极少量的ＣＯＸ ２ ｍ ＲＮＡ表达（０．３２±０．１１）；而在ＡＬＩ大鼠，肺组织ＣＯＸ ２ｍ ＲＮＡ表达显著增加，比生理盐水对照组升高达５～８ 倍，同时伴有ＰＧｓ的升高〔生理盐水对照组为（１４１．６４±４１．７９）μｇ·Ｌ－ １ ·ｇ－ １ ，ＡＬＩ大鼠分别为（１９０．５３±４７．９１）～（４７０．９５±１８４．１７）μｇ·Ｌ－ １·ｇ－ １ 〕。结论：正常肺组织有极少量的ＣＯＸ ２ ｍ ＲＮＡ表达，ＣＯＸ ２参与ＡＬＩ的发病，并可能是引起ＡＬＩ时ＰＧｓ升高的主要同工酶。

ARDS患者肺组织Bax和Bcl-2表达的变化及意义

目的 探讨Bax和Bcl- 2表达的变化在ARDS发病中的作用 ,试图为进一步阐明ARDS的发病机制和在细胞凋亡水平防治本病提供理论依据。方法 ARDS组 9例 ,对照组 5例 ,采用TUNEL法以及免疫组化技术观察ARDS患者肺组织细胞凋亡及Bax和Bcl- 2表达的变化。结果 ARDS急性期患者肺组织细胞凋亡率较对照组明显增加 ,且主要表现为肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡增加 ;Bcl- 2表达ARDS组和对照组无显著差异 ,Bax在ARDS急性期患者肺组织表达明显上调 ,并且Bax表达的增加与肺组织细胞凋亡增加呈平行关系。结论 肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡改变和Bax/Bcl- 2表达的变化可能参与临床ARDS急性期的发病。

急性肺损伤兔血浆颗粒膜蛋白-140的改变

目的：观察实验兔急性肺损伤（ＡＬＩ）时血浆颗粒膜蛋白 １４０（ＧＭＰ １４０）的变化并探讨其诊断价值。方法：同种骨髓提取液（ＢＭＥ）经兔颈静脉缓慢恒流注入复制骨髓型ＡＬＩ模型，多时间点检测血中循环内皮细胞（ＣＥＣ）、ＧＭＰ １４０、内皮素 １（ＥＴ １）、血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）以及肺组织ＧＭＰ １４０含量。结果：致伤后０．５小时，血中ＣＥＣ、ＧＭＰ １４０、ＥＴ １、ＡＣＥ均显著升高并持续６ 小时，而肺组织ＧＭＰ １４０ 含量降低。血浆ＧＭＰ １４０ 早期升高，幅度较大〔伤后０．５ 小时为（５２．５７±１０．２５）μｇ／Ｌ，较伤前（１６．１８±４．３３）μｇ／Ｌ 高（＞ ３ 倍），伤后１ 小时达峰值（５６．３２±１２．４３）μｇ／Ｌ〕，与其他指标有较好的相关性。结论：血浆ＧＭＰ １４０可作为临床ＡＬＩ的早期诊断、病情监测和评估的有用指标。

急性肺损伤大鼠肺组织细胞凋亡及Fas/FasL系统表达改变及其意义

目的：探讨细胞凋亡与急性肺损伤（ＡＬＩ）发生、发展的关系以及Ｆａｓ和／ＦａｓＬ系统表达改变的意义。方法：复制内毒素性大鼠ＡＬＩ模型；采用ＴＵＮＥＬ法、原位杂交、半定量逆转录聚合酶链反应（ＳｑＲＴ ＰＣＲ）及免疫组化等技术观察大鼠ＡＬＩ发生过程中，肺组织细胞凋亡变化以及Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统蛋白质和ｍ ＲＮＡ表达的改变。结果：内毒素性ＡＬＩ早期（＜ ２４ 小时），大鼠肺泡上皮细胞和肺血管内皮细胞凋亡明显增加；肺组织Ｆａｓ／ＦａｓＬｍ ＲＮＡ和蛋白质表达明显上调，且与肺组织细胞凋亡的增加相一致。结论：肺组织细胞凋亡以及Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统表达明显上调可能参与大鼠ＡＬＩ的发病机制。

ARDS患者肺组织细胞凋亡的变化及意义

目的：探讨细胞凋亡在急性呼吸窘迫综合征（ＡＲＤＳ）发病中的作用及基因调控机制，为进一步阐明ＡＲＤＳ的发病机制和在细胞凋亡水平防治本病提供理论依据。方法：ＡＲＤＳ组９例，对照组５例，采用ＴＵＮＥＬ法以及免疫组化技术观察ＡＲＤＳ患者肺组织细胞凋亡及Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统表达的变化。结果：ＡＲＤＳ早期患者肺组织细胞凋亡率较对照组明显增加，且主要表现为肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡增加；Ｆａｓ抗原、ＦａｓＬ在ＡＲＤＳ早期患者肺组织表达明显上调，并且Ｆａｓ、ＦａｓＬ表达的增加与肺组织细胞凋亡增加呈平行关系。结论：肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡增加和Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统活化可能参与临床ＡＲＤＳ早期的发病。

急性呼吸窘迫综合征患者肺组织细胞凋亡及Fas/FasL表达的变化及意义

目的 探讨细胞凋亡在急性呼吸窘迫综合征（ＡＲＤＳ） 发病中的作用机制。方法 ＡＲＤＳ组９ 例，对照组５ 例，采用ＴＵＮＥＬ法以及免疫组织化学技术观察ＡＲＤＳ患者肺组织细胞凋亡及Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统表达的变化。结果 ＡＲＤＳ急性期患者肺组织细胞凋亡率明显高于对照组，且主要表现为肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡增加；Ｆａｓ 抗原、ＦａｓＬ在ＡＲＤＳ急性期患者肺组织中的表达与对照组比较明显上调，并且与肺组织细胞凋亡增加呈正相关。结论 肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡增加和Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统活化可能参与ＡＲＤＳ急性期的发病。

地塞米松对急性肺损伤大鼠肺组织细胞凋亡及Fas基因与Fas基因配体系统表达的影响

目的 探讨细胞凋亡与急性肺损伤 (ALI)发生、发展的关系以及地塞米松在全身炎症反应及急性肺损伤中的作用机制及意义。方法 通过复制内毒素性大鼠ALI模型 ,采用TUNEL法、原位杂交、SqRT PCR以及免疫组化等技术观察ALI肺组织细胞凋亡变化、Fas基因与Fas基因配体 (Fas/FasL)系统mRNA和蛋白质表达的改变以及地塞米松对细胞凋亡及Fas、FasL表达的影响。结果 ALI早期肺组织细胞凋亡明显增加 (P <0 0 1) ;Fas、FasLmRNA和蛋白质表达明显上调 (P <0 0 1) ,地塞米松可明显抑制大鼠ALI血清TNF α释放、抑制肺部炎症反应 ;明显抑制LPS诱导的肺组织细胞凋亡 (P<0 0 1) ,并明显下调Fas、FasLmRNA和蛋白质的表达 (P <0 0 1)。结论 肺组织细胞凋亡及Fas/FasL系统表达上调 ,可能参与大鼠ALI早期的发病 ;地塞米松可通过抑制炎症介质释放 ,抑制Fas/FasL系统的活化 ,阻断、调控肺组织靶细胞凋亡 ,而减轻肺组织损伤。

缺氧性肺动脉高压大鼠肺组织中肾上腺髓质素的合成释放及其意义

目的 探讨缺氧性肺动脉高压 (HPH)肺组织中肾上腺髓质素 (AM)的合成分泌及其在HPH病理生理过程中的作用。方法 模拟 5km高原连续缺氧 ,复制大鼠HPH动物模型。应用光镜、免疫组化、放射免疫测定等方法 ,观察、测定缺氧后 10d、2 0d、30d和对照组大鼠肺组织中AM蛋白表达及血浆、支气管肺泡灌洗液 (BALF)AM含量的动态变化。结果 各组大鼠肺血管内皮细胞 (EC)、血管及支气管平滑肌细胞 (SMC)、支气管粘膜上皮、肺巨噬细胞 (MΦ)、Ⅱ型肺泡上皮及支气管软骨细胞AM均呈阳性表达。缺氧各时相 ,尤以 2 0d ,上述各种细胞表达明显增强 ;其中EC、SMC、MΦ表达呈强阳性。各时相血浆AM含量显著高于对照组 (P <0 0 1)。BALFAM含量于缺氧 10～ 2 0d显著高于对照组 (P <0 0 1) ,且 2 0d明显高于 10d ;30d含量下降 ,趋于正常。结论 缺氧可促使肺组织中AM的合成和释放。AM作为一种局部激素及循环激素 ,对HPH病理过程中肺循环、肺通气。